Sodio

Plasma: Utilice como anticoagulante heparina de litio, heparina de amonio u oxalato de litio. Orina: Diluya una porción de orina de 24 horas 1:10 (1+9) con agua destilada. Dependiendo del contenido de sodio, se puede requerir una dilución de 1:5 (1+4) ó 1:2 (1+1).

Estabilidad de muestra: Los niveles de sodio permanecen

Sodio Determinación Cuantitativa Colorimétrica de Sodio en suero, plasma u orina. Resumen y Principio. Anteriormente al fotómetro de flama y los electrodos ionselectivos, el método más popular para deteminar sodio en los fluidos corporales involucran su precipitación como una sal triple de acetato de zinc uranilo sódica. Esta técnica fue introducida por 1 Kolthoff en 1927, con la subsecuente utilización del precipitado en varias formas. Una aproximación fue la determinación colorimétrica del residuo solubilizado, ya sea directamente, como 2 lo reporto Albanese y Lein , o por el monitoreo de la disminución del color del sobrenadante amarillo después de la precipitación, 3 como lo describió Bradbury.

estables por lo menos 14 días de 293 – 298 K (20-25°C). Sustancias de interferencia: El material de vidrio contaminado es la princiapal fuente de error. Todo éste material se debe lavar con ácido nítrico al 10 – 20%, se enjuaga con agua destilada, se seca y se almacena en un área que no tenga polvo.

Reactivo de Color de Sodio. Solución de acetato de uranilo, 5.3g/dL y acetato de zinc,15.4g/dL , en solución acuosa ácido acético-etanol. Reactivo precipitante. Solución acuosa de Acido tricloroacético (TCA), 10g/dL. Estándar de sodio. Cloruro de sodio,4.091 g/L, en solución TCA. Equivalente a un valor de sodio de 140mmoI/L cuando se utiliza como se indica en éste método. Precauciones: Para uso de diagnóstico in-vitro. Tenga cuidado en el manejo del Reactivo Precipitante y el Estándar de Sodio ya que son medianamente cáusticos. Estabilidad y Almacenamiento del Reactivo: Todos los reactivos son estables de 288 a 303 K (20 - 30°C) hasta la fecha de caducidad.

Preparación del sobrenadante libre de proteínas. 1. Añada 0.5 mL de suero, plasma u orina diluida a tubos adecuadamente marcados. 2. Añada 0.5 mL del Reactivo Precipitante gota a gota a cada tubo con agitación vigorosa (se sugiere usar vortex). 3. Déjelo reposar por 5 minutos, después centrifigue a alta velocidad por 5 – 10 minutos.

Procedimiento. 1.

Pipetee en los tubos marcados los siguientes volumenes (mL), agitando rápidamente después de cada adición del Reactivo de Color.

NOTA: Los valores de orina se deben multiplicar por el factor de dilución apropiado. Sodio en orina (mmoI/24 h) = Sodio en orina (mmol/L) x volumen de 24 h (mL)

Agua destilada Estándar Sobrenadante Reactivo de color 2. 3. 4. 5. 6.

Reactivo blanco (RB) 0.5

Estándar (s)

2.5

Rango normal:

4

Suero/plasma Orina

135 – 155 mmoI/L 75 – 200 mmoI/24h

Características de funcionamiento.

5

Presición: Múltiples ensayos (n=20) en un pool de sueros (media= 100.7 mmoI/L) durante un período de 11 días revelaron una desviación estándar (SD) de 1.5 mmoI/L y un coeficiente de variación (CV) de 1.4%.

Muestra (U)

0.5 2.5

Linearidad: Cuando se realiza como indica, el método es lineal de 0- 160 mmoI/L.

0.5 2.5

1000

Valores esperados.

Correlación: Cada uno de 6 pools de sueros fue analizado para Sodio por fotometría de flama (rango: 126 – 149 mmoI/L). Los análisis por duplicado (n=6) utilizando el método presentado revelaron una desviación promedio del método de referencia de 1.5 mmoI/L.

Nuevamente mezcle el contenido de todos los tubos. Incube los tubos por 10 minutos a temperatura ambiente 288-298 K (15– 25 °C). Después del periodo de incubación, mezcle fuertemente y centrifugue a alta velocidad por 5 minutos. Transfiera con cuidado el sobrenadante de cada tubo a la celdilla apropiada. Con el espectrofotómetro a 420 nm calibre a cero el instrumento con agua. Lea y registre la absorbancia del Blanco de Reactivo (RB), del Estándar (s) y de la Muestra (U) en 30 minutos.

Control de calidad: Se debe incluir en cada serie de ensayos un suero control y/u orina analizado para el contenido de sodio por este método, fotometría de flama, o electrodo ión-selectivo. Para esta prueba se recomienda correr los controles Ser-T-Fy I y II de Stanbio. Resultados.

Materiales requeridos pero no proporcionados.

Lo valores se derivan del siguiente cálculo:

Espectofotrómetro capaz de leer absorbancias a 420 nm. Centrifuga con alta capacidad de velocidad (>1500 rpm) Pipetas exactas de 0.5 y 2.5 mL. Tubos de prueba y celdillas, Agitador Vortex, Cronómetro.

Sodio en suero, plasma u orina (mmoI/L)= Abs(RB) – Abs(U) Abs(RB) – Abs(S)

Recolección y Preparación de la Muestra.

Donde Abs (RB), Abs (U) y Abs(S) representan las absorbancias del Blanco de reactivo, Muestra y Estándar respectivamente, y 140 es el valor equivalente del estándar de sodio en mmoI/L.

Suero: Remueva del coágulo pronto y con cuidado para evitar la hemólisis.

Sodio (mmoI/L)= 1.385 - 0.936 X 140 = 150 1.385 - 0.967

Procedimiento.

El método presentado es esencialmente una adaptación del 3 último esquema, en donde el sodio se precipita del sobrenadante libre de proteínas como triple sal. La disminución resultante de la absorbancia de la mezcla de reactivo de color-sobrenadante es proporcional al contenido de sodio de la muestra.

Reactivo

Ejemplo: Una muestra de suero probada por el método descrito da una absorbancia de 0.936, con una lectura de blanco de reactivo 1.385 y una lectura del estándar de 0.967. Por lo tanto:

X 140

Referencias 1. 2. 3. 4. 5.

Kolthoff IM: Zanal Chem 70:397,1927 Albanese AA, Lein MD: J Lab Clin Med 33:246,1948 Bradbury JT: J Lab clin Med 31: 1257,1946 Weissman N, Plieggn VJ: IN Clinical Cjemistry – Principle nd and Technics, 2 Ed. RJ Henry et al. Ed. Harper & Row, New York. 1974, p642-643. Stanbio Laboratory Data.

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Rev. 04/12/01 IN-316