SEA TURTLE NECROPSY Sartika Rahma E. (165130100111021), Wilda Azizah F. (165130107111028)
Necropsy adalah salah satu alat dasar yang digunakan untuk menentukan mengapa seekor hewan mati. Ini melibatkan pemeriksaan menyeluruh dari bangkai secara eksternal dan internal untuk setiap indikasi penyebab kematian (lesi). Secara umum, temuan akan menyimpang dari normal baik dalam bentuk, warna, konsistensi, jumlah atau ukuran. Sebagai contoh, hati kura-kura hijau normal (Chelonia mydas) akan keras dengan batas bulat dan berwarna ungu-coklat gelap homogen. Suatu kelainan pada hati dapat memanifestasikan dirinya dalam bentuk warna abnormal (bintik-bintik atau bercak), konsistensi (terlalu lunak, terlalu keras), ukuran (terlalu besar atau kecil), atau bentuk (benjolan, benjolan atau bekas luka) (Work, 2014). ALAT ALAT YANG DIBUTUHKAN UNTUK NEKROPSI Gunting
Forceps bergigi
Gloves
Kantong plastik
Permanent Marker
Toples
Pisau
Scalpel handle
Gergaji Tulang
Blade
Alumunium foil
Water
Formalin 10%
Label
Tatakan/Telenan
Pensil dan kertas
Alat tambahan yang akan membantu antara lain timbangan, meteran, kaliper dan kamera. Beberapa jenis kantong plastik juga harus tersedia termasuk kantong yang lebih besar untuk pembuangan karkas dan kantong yang lebih kecil untuk menyimpan organ individu (Work, 2014).
TAHAPAN NEKROPSI 1. External Examnation Periksa bagian eksternal kura-kura dari kepala hingga ekor jika ada kelainan atau kerusakan. Saat memeriksa bangkai, periksa hal berikut: - Plastron dan karapas Diperiksa kondisi sisik apakah ada yang mengelupas, adanya lintah dan ganggang, adanya pertumbuhan abnormal pada kulit. - Kondisi tubuh Kura-kura dalam kondisi baik biasanya akan memiliki plastron bulat yang bagus. Pada kura-kura yang sangat kurus, plastron terlihat dan cekung.
tulang rusuk menonjol (panah-foto di sebelah kanan) (Work, 2014).
-
-
-
-
-
-
-
Kloaka Dilihat apakah ada sesuatu yang menonjol yang keluar dari kloaka. Nostrils Dilihat ada tidaknya darah atau lendir yang keluar dari hidung. Mulut Membran mukosa di mulut harus homogen. Warna-warna seperti bercak merah atau area berwarna kuning-coklat tidak normal. Perhatikan adanya ulcer, luka, plak, pertumbuhan, kait, tali pancing, darah, flek atau benjolan di rongga mulut. Perhatikan juga keberadaan alga di mulut dan kumpulkan sampel dalam botol kecil formalin yang terpisah. Mata Apakah mata collaps dan keruh, adakah pertumbuhan abnormal disekitar mata. Sirip Sirip utuh dan tidak ada luka ataupun kail yang tertanam disirip. Kelainan lain yang berupa benjolan atau eksudat di tempat yang tidak biasa. Jumlah lemak tubuh lapisan dalam karapas. Hewan dalam kondisi tubuh yang baik memiliki lemak coklat-kehijauan dalam jumlah besar (foto kiri) sedangkan yang dalam kondisi tubuh buruk memiliki sedikit lemak yang terlihat berair dan gelap dengan
2. Plastron Removal
Sebelum memulai necropsy, letakkan kura-kura di terbalik (bagian punggung dibawah). Dengan menggunakan pisau tajam atau pisau bedah, potonglah sepanjang garis putusputus (lihat foto). Jika akan memotong antara karapas dan plastron, harus menemukan tulang rawan yang dapat dipotong dengan pisau. Lingkaran putih menunjukkan area dimana klavikula (depan) atau panggul (belakang) menempel pada plastron. Ini dapat terlepas dari plastron dengan memotong ligamen dan tulang rawan dekat dengan bagian dalam plastron (Work, 2014).
Saat memotong plastron perhatikan arah dan kedalaman potongan, khususnya
antara sisik marginal dan inframarginal. Dalam posisi ini rongga coelomic sangat dekat (terutama di musim panas, ketika ada lebih sedikit lemak), sementara di bawah bagian cranial dan caudal dari plastron, subkutis dan otot hadir antara plastron dan rongga tubuh. Selanjutnya tarik plastron ke atas dan potong otot di bawahnya (bagian anterior otot ventral - pectoralis mayor) dengan potongan sejajar dengan plastron dalam arah cranio-caudal. Pada sekitar seperempat panjang plastron (kurang lebih sentral di mana skutula gular bertemu dengan skut humerus) catat hubungan kuat putih plastron dengan proses akromion skapula. Potong sedekat mungkin ke plastron untuk menghindari kerusakan kantung perikard dan / atau jantung. Pada setengah bagian kedua plastron, sebagian besar permukaan di bawahnya ditutupi oleh otot (bagian ekor dari otot ventral rectus abdominis). Seperti sebelumnya, terus memotong dekat dengan plastron: di bagian tengah daerah ini, biasanya penumpukan lemak ditemukan antara plastron dan dasar peritoneum, tetapi untuk hewan cachectic atau selama musim panas ini bisa sangat tipis (Poppi, 2013). Setelah plastron diangkat, permukaan yang ditutupi oleh otot dan lemak dapat diamati. Lemak biasanya sebagian akan mencair, mengkilap, perfusi dan berlubang; warnanya hijau zaitun atau oranye-kecoklatan, tergantung pada jenis dan persentase mineral di dalamnya, yang dihasilkan dari pakan. Lemak menutupi seluruh area perut. Selama pelaksanaan semua prosedur ini, pengembangan, ketebalan, tekstur dan warna otot serta ketebalan dan warna endapan lemak harus dicatat, dan juga adanya perdarahan, hematoma, edema atau lesi fokal / multifokal lainnya di seluruh bidang. Dapatkan sampel otot untuk histologi dan kontaminan serta sampel lemak untuk
analisis toksikologi dan komposisi lemak (Poppi, 2013).
3. Nutritional condition score Setelah plastron dihilangkan, dimungkinkan untuk menentukan skor kondisi gizi yang benar. Sangat penting untuk diingat bahwa penumpukan lemak (lokalisasi, ketebalan dan warna) sangat tergantung pada jenis kelamin, ukuran, musim (pakan, suhu air, waktu yang dihabiskan dalam kegiatan makan) dan tahap reproduksi. Score 1 - Excellent: Jaringan adiposa integral atau sebagian cair meliputi seluruh area perut. Lipidosis hati juga ada. Score 2 – Verry good: Jaringan adiposa integral atau sebagian cair mencakup seluruh area perut. Score 3 - Fair: Jaringan adiposa integral atau sebagian cair mencakup bagian perifer dari area ventral. Score 4 - Scarce: Jaringan adiposa integral atau sebagian cair hanya ada di bagian perifer terbatas pada area ventral. Score 5 – Not valueable: Bangkai mumi (Poppi, 2013). 4. Removal of the Scapula and approaches to the viscera. Untuk membuka visera, lakukan pemotongan sagital melalui otot-otot dada, dengan lembut memisahkan semua massa otot termasuk skapula kedua sisi dari bawah perikardium dan peritoneum, memutar seluruh sirip ke depan. Dengan cara ini, arteri brakialis, vena aksila, dan pleksus brachialis dapat diamati dan dengan membalikkan sirip di bawah bangkai. Potong peritoneum secara sagital (evaluasi ketebalan lemak jika mungkin) dan amati lokasi, ukuran dan warna hati
dan saluran pencernaan masing-masing dan jika ada eksudat atau endapan fibrin. Potong perikardium dan amati jantung serta pembuluh darah besar. Cari lesi dan eksudat dan jelaskan (lokalisasi, penampilan, dan kuantitas). Bagaimanapun, jika ada cairan, ukurlah dan dibuat apusan sitologis. Untuk tampilan keseluruhan organ utama, pindahkan saluran pencernaan dengan lembut untuk melihat paru-paru, kelenjar, kandung kemih, dan kelenjar adrenal di atasnya dan identifikasi massa ginjal retroperitoneal. Pankreas dan limpa dapat diamati di sepanjang usus (Poppi, 2013). 5. Heart and Great Vessels. Jantung, pembuluh darah besar, kelenjar tiroid, dan timus ditemukan di ruang di bawah otot yang terletak di antara dua akromion dan prosessus coracoid. Perikardium sangat tipis dan dekat dengan massa otot, sehingga biasanya akan rusak selama pengangkatan skapula. Sebelum menangani jantung, amati perikardium. Perhatikan jika ada cairan berlebihan dan jelaskan karakteristiknya. Perhatikan juga ketebalan jaringan. Potong perikardium dan amati epicardium (permukaan luar jantung) in situ. Catat ukuran, warna, dan tekstur setiap struktur jantung: sinus venosus, dua atrium besar (kanan dan kiri) dan ventrikel, dan pembuluh darah besar: dua aorta (kanan dan kiri) dan batang paruparu. Ventrikel melekat pada perikardium melalui jaringan ikat fibrosa yang disebut gubernaculum cordis. Untuk menghilangkan jantung, perlu memotong sinus venosus dan gubernaculum cordis. Saat membuka bilik jantung dan pembuluh darah besar, periksa dengan cermat untuk mencari parasit atau lesi yang disebabkan olehnya. Ambil sampel ventrikel, atrium, dan aorta untuk histologi (Poppi, 2013).
6. Thyroid, Thymus, Parathyroid and Ultimobranchial Body Tiroid - Tiroid terletak di leher ventral, sering dilapisi dengan lapisan tipis lemak kuning, yang menutupi dengan sangat baik. Pada bangkai segar terlihat seperti agar agar, bisa juga terlihat cair dalam kondisi bangkai lainnya. erhatikan ukuran, bentuk, warna dan tekstur. Ambil sampel untuk penyelidikan histologi, mikrobiologi, dan molekuler. Timus - Timus adalah organ limfoid besar yang dibentuk oleh dua struktur. Pada bangkai yang terurai, ia menjadi lebih mirip dengan lemak di sekitarnya. Perhatikan ukuran, bentuk, warna dan tekstur. Sampel untuk penyelidikan histologi, mikrobiologi, dan molekuler. Parathyroid dan Ultimobrachial body - Kedua kelenjar ini hanya dapat dibedakan secara histologis. Mereka sangat sulit diidentifikasi bahkan dalam bangkai yang benar-benar segar. Mereka terletak di sepanjang arteri karotis dan serviks ventral. Jika
ditemukan, sampel untuk histologi (Poppi, 2013).
7. Liver and Gallbladder. Hati adalah organ visceral terbesar dan mengelilingi jantung. Dalam bangkai segar dan dalam beberapa periode tahun ini tidak biasa untuk menemukan hati pucat atau oranye dan lunak (lipidosis parah). Periksa permukaan hati dan perhatikan pola warna, tekstur, dan ukuran lobus. Periksa parenkim hati dan kantong empedu dengan melakukan beberapa pemotongan paralel melalui jaringan. Sekali lagi, perhatikan warna dan tekstur internal dan cari parasit. Sampel untuk kontaminan, histologi, mikrobiologi, dan investigasi molekuler (Poppi, 2013).
8. Oesophagus Esofagus terletak di sebelah kiri trakea, kemudian melewati bifurkasi trakea dan mengambil posisi di atas paru-paru dan di bawah jantung dan hati. Untuk mengekspos esofagus, potong kulit leher ventral dari posisi skute intergular (yang
sebelumnya diangkat) ke rahang, pisahkan otot-otot yang mendasarinya dan pindahkan ke samping trakea. Potong esofagus dan dilanjutkan lewat bifurkasi trakea; kemudian, tarik dengan seluruh saluran pencernaan. Dengan menggunakan gunting, potong seluruh panjang esofagus dari bagian thorax ke abdomen; amati permukaan serosa dan mukosa esofagus dan keberadaan, jumlah dan jenis pakan dan parasit.
9. Gastrointestinal Setelah dilakukan nekropsi pada bagian esofagus, dilanjutkan dengan pemeriksaan saluran pencernaa dari lambung hingga usus. Lambung terbentuk dari dlatasi moderate saluran pencernaan. Untuk mengetahui kondisi lapisan saluran pencernaan, maupun kondisi sebenarnya organ intestinal diperlukan pemotongan saluran. Pemeriksaan juga untuk menilai asupan pakan maupun status parasit yang dialami oleh penyu. Perlunya pencatatanmengenai status kesehatan dari saluran pencernaan, dari kondisi mukosa, perubahan warna yang terjadi, parasit, hingga ulcer. Sampel patologi yang terjadi pada organ dilakukan koleksi untuk dijadikan analisa secara histopatologi dan toksiko.
10. Pankreas Pankreas menempel pada mesenterium sepanjang sesudah lambung dan duodenum. Pengambilan pankreas dari saluran dengan memisahkannya dengan jaringa ikat dan duodenum. Dilakukan pencatatan ukuran bentuk, warna, dan permukaan organ. Potong parenkim dan catat perubahan yang terjadi. Apabila ditemukan beberapa perubahan patologis, maka dilakukan pengambilan sampel untuk dilakukan pemeriksaan histopatologi.
13. Trakea Untuk memeriksa trakea, diperlukan pemotongan kulit dari bagian ventral leher dengan posisi sisik intergular ke rahang dan memisahkan beberapa otot yang ada disekitarnya. Dengan menggunakan gunting, dilakukan pemotongan trache hingga bifurcatio. Dilakukan pemeriksaan mukosa dan identifikasi serta deskripsi beberapa kelainan yang ada didalam trakea.
11. Spleen Spleen terdapat pada mesenterium dan diujung pankreas. Catat perubahan yang terjadi mulai dari ukura, bentuk, warna dan permukaan. Kemudian bila ditemukan perubahan patologis, perlu dilakukan pemeriksaan lanjut berupa pemeriksaan histopaatologi, mikrobiologi, dan molekular. 12. Urinary bladder (VU) VU terletak ditengah, dibawah pelvis dan diantara rektum. Sebelum dilakukan pengambilan VU dilakukan pengeklaman pada VU sehingga tidak terjadi kebocoran. Posisi anatomi VU terkadang tergantung dari material asing yang masuk ke dalam tubuh misalnya adanya feses, pasir, telur pada betina dan juga parasit.
14. Pulmo Pulmo menempel pada karapas dan columna vertebrae, sehingga dalam mengambil pulmo dalam keadaan utuh sangat sulit. Sehingga perlu dilakukan pencatatan beberapa perubahan patologi yang dapat terjadi dan dilakukan pengambilan sampel untuk pemeriksaan lebih lanjut.
18. Otak
15. Adrenal gland Penyu memiliki satu kelenjar adrenal yang terletak di dorsal aorta dan diantara ginjal. Untuk melepaskan kelenjar adrenal perlu ditarik dan dipotong jaringan ikat disekitarnya. Pencatatan sangat penting sbelum dilakukan sectioning. 16. Urogenital system Sistem urinaria dan genital merupakan sistem yang unik . selama melakukan nekropsi, gonad sangat mudah untuk dilakukan pemeriksaan. Ovarium: ovarium dan oviduct dapat berubah drastis tergantung ukuran dan umur sesuai dengan masa kawin maupun tidak. Dilakukan pemeriksaan ukuran, entuk, warna, dan tahap perkembangannya. Testes: testis terletak pada mesorchium hingga peritoneum, dilakukan pemeriksaan ukuran, bentuk, warna, dan permukaan eksternal maupun internal. 17. Kidney Kidney kanan maupun kiri terletak di retroperitoneal dan caudal karapas. Untuk pengambilan ginjal cukup sulit sehingga dilakukan pemeriksaan insitu. Cara termudah untuk melakukan pemeriksaan dengan cara memotongnya dan dilakukan pemeriksaan patologi makroskopik.
Pemeriksaan otak perlu dilakukan nekropsi pada bagian tengkorak penyu. Otak penyu merupakan organ yang mudah rapuh sehingga perlu dilakukan nekropsi dengan sangat hati-hati. Observasi yang dilakukan dengan memeriksa keadaan eksternalnya seperti adanya perubahan warna, tekstur dan adanya lesi atau tidak. Kongesi vaskular otak merupakan efek dari keracunan dan post mortem yang tidak tepat. Pengambilan sampel dilakukan dengan cara mengambil sebagian otak dan disimpan pada formalin, kemudian dilakukan pemeriksaan mikrobiologi dan molekular.
19. Pituitary gland apabila telah dilakukan pengambilan otak, pituitary gland dapat terlihat di bawah nervus optikus. Dapat dilakukan pengambilan sampel dengan cara digunakan small forceps dan scalpel blade untuk memisahkannya. 20. Salt gland Memiliki nama lain glandula lakrimal yang terletak di dorsal dan medial mata penyu, dan tidak dapat dilakukan pengambilan organ dilakukan cukup sulit.
Daftar Pustaka Flint M, Patterson-Kane JC, Limpus CJ, Work TM, Blair D, Milis PC. 2009. Postmortem diagnostic investigation of disease in freeranging marine turtle populations: a review of common pathologic findings and protocols. J Vet Diagn Invest 21: 734. Poppi, Lisa dan Erica. 2013. Standard Protocols for Post Mortem Examination on Sea Turtles. UK: NETCET. Prasetya, RimaR.. 2017. Identifikasi Gen Aerolysin dan Sensitivitas Antibiotik Aeromonas Hydrophila Penyebab Kematian Tukik di Pulau Serangan, Bali. Denpasar: FKH Udayana. Work, Thierry M. 2014. Sea Turtle Necropsy Manual. U. S. Geological Survey National Wildlife Health Center Hawaii Field Station.