Proposal Dicky Ibnu Fernandes 5.docx

PROPOSAL SKRIPSI

FORMULASI DAN UJI EFEKTIVITAS ANTIOKSIDAN SABUN MANDI CAIR EKSTRAK ETANOL 96 % BUAH STRAWBERRY ( Fragaria x ananassa ) DENGAN METODE DPPH (2,2-diphenyl-1picrylhydrazil) Disusun Untuk Melengkapi Persyaratan Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm)

Oleh : Dicky Ibnu Fernandes 15040091

PROGRAM STUDI S1 FARMASI SEKOLAH TINGGI FARMASI MUHAMMADIYAH TANGERANG BANTEN 2019

PROPOSAL SKRIPSI

FORMULASI DAN UJI EFEKTIVITAS ANTIOKSIDAN SABUN MANDI CAIR EKSTRAK ETANOL 96% BUAH STRAWBERRY ( Fragaria ananassa ) DENGAN METODE DPPH (2,2-diphenyl-1picrylhydrazil) Disusun Untuk Melengkapi Persyaratan Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm)

Oleh : Dicky Ibnu Fernandes 15040091

PROGRAM STUDI S1 FARMASI SEKOLAH TINGGI FARMASI MUHAMMADIYAH TANGERANG BANTEN 2019

HALAMAN PENGESAHAN FORMULASI DAN UJI EFEKTIVITAS ANTIOKSIDAN SABUN MANDI CAIR EKSTRAK ETANOL 96 % BUAH STRAWBERRY ( Fragaria x ananassa ) DENGAN METODE DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazil)

Disusun Oleh: Dicky Ibnu Fernandes 15040091

Telah Disetujui Oleh

Pembimbing Utama

Pembimbing Pendamping

M. Zaky, S.Si., M.Farm.,Apt. NIDN. 0412047407

Nita Rusdiana, S.Farm., M.Sc., Apt. NIDN. 0428028406

i

KATA PENGANTAR Bismillahirrahmanirrahim Puji dan syukur kehadirat Allah SWT atas segala berkah dan rahmatnya sehingga penulis dapat menyelesaikan proposal skripsi ini yang berjudul “Formulasi Sabun Mandi Cair Antioksidan Ekstrak Etanol 96% Buah Strawberry (Fragaria x ananassa) Dengan Metode DPPH (2,2-diphenyl-1picrylhydrazil)“. Penulisan proposal skripsi dimaksudkan untuk melengkapi syarat – syarat guna memperoleh gelar Sarjana Farmasi di Sekolah Tinggi Farmasi Muhammadiyah Tangerang, Banten tepat pada waktunya. Terwujudnya proposal skripsi ini tidak lepas dari bantuan berbagai pihak yang telah mendorong dan membimbing penulis, baik ide–ide, maupun pikiran. Oleh karena itu penulis mengucapkan terima kasih kepada : 1.

Nita Rusdiana, S.Farm., M.Sc., Apt., selaku ketua Sekolah Tinggi Farmasi Muhammadiyah Tangerang dan dosen pendamping.

2.

Dina Pratiwi, S.Farm., M.Si., selaku ketua program studi S1 Farmasi Sekolah Tinggi Farmasi Muhammadiyah Tangerang.

3.

M.Zaky, S.Si., M.Farm.,Apt, selaku dosen utama yang dengan sabar telah memberikan banyak masukan dan dukungan kepada penulis.

4.

Dosen – Dosen Sekolah Tinggi Farmasi Muhammadiyah Tangerang yang telah memberikan ilmu dan masukan yang bermanfaat selama perkuliahan dan penyusunan proposal skripsi ini.

ii

5.

Ayah tercinta Jumardi dan almarhumah ibunda tercinta Ernawati yang selalu memberikan do’a, kasih sayang, motivasi dan dukungannya baik moril maupun materi kepada penulis. Semoga Allah memberikan balasan yang berlipat ganda.

6.

Untuk kakak ku tersayang Muhardinami Suci yang telah memberikan ide, saran serta motivasi yang tiada hentinya diberikan kepada penulis. Teman – teman seperjuangan angkatan sembilan dan sahabatku. Terima

7.

kasih untuk bantuan dan dukungannya dalam pembuatan proposal skripsi ini. 8.

Seluruh pihak yang terlibat dan tidak bisa disebutkan satu persatu dalam membantu menyelesaikan proposal skripsi ini. Penulis menyadari bahwa proposal ini msih jauh dalam kesempurnaan, oleh

karenan itu kritik dan saran yang membangun sangat penulis harapkan demi kesempurnaan proposal skripsi ini. Sehingga kemudian hari dapat menjadi bermanfaat bagi yang memerlukan.

Tangerang, 12 September 2018

Dicky Ibnu Fernandes

iii

DAFTAR ISI HALAMAN JUDUL

................................................................................ i

LEMBAR PENGESAHAN KATA PENGANTAR DAFTAR ISI

..................................................................... i

.............................................................................. ii

............................................................................................. iv

DAFTAR TABEL

.................................................................................... vi

DAFTAR GAMBAR

................................................................................ vii

DAFTAR LAMPIRAN

............................................................................ viii

DAFTAR SINGKATAN

.......................................................................... ix

BAB I

BAB 1I

PENDAHULUAN

.................................................................. 1

1.1 Latar Belakang

................................................................. 1

1.2 Rumusan Masalah

............................................................ 6

1.3 Tujuan Penelitian

............................................................. 6

1.4 Manfaat penelitian

............................................................ 7

TINJAUAN PUSTAKA

........................................................ 8

II.1. Buah Strawberry ( Fragaria x ananassa ) ......................... 8 II.2. Simplisia ........................................................................... 23 II.3. Ekstraksi

.......................................................................... 24

II.4. Radikal Bebas II.5. Antioksidan II.6. Kulit

.................................................................. 30 .................................................................... 35

............................................................................... 40

II.7. Sabun Mandi Cair

.......................................................... 45

II.8. Uji Aktivitas Antioksidan Dengan Metode DPPH II.9. Spektrofotometri UV - Vis II.10. Deskripsi Bahan II.11. Penelitian Relevan

.......... 48

.............................................. 49

......................................................... 51 ...................................................... 59 iv

II.12. Kerangka Konsep ........................................................ 59 II.13. Hipotesis BAB III

.................................................................... 60

METODOLOGI PENELITIAN

.......................................... 61

III.1.

Rancangan Penelitian ................................................. 61

III.2.

Alat dan bahan penelitian

III.3.

Variabel penelitian

.................................................... 62

III.4.

Rencana penelitian

.................................................... 63

III.5.

Prosedur penelitian

.................................................... 63

III.6.

Metode penelitian

...................................................... 65

III.7.

Teknik analisis data

III.8.

Analisis data

III.9.

Definisi operasional

................................................... 74

.............................................................. 75

III.10.

Skema alur penelitian

III.11.

Rencana penelitian

DAFTAR PUSTAKA LAMPIRAN

.......................................... 62

.................................................. 75 ................................................ 76 .................................................... 77

............................................................................... 78

.............................................................................................. 80

v

DAFTAR TABEL Tabel II.1

Kandungan Zat Gizi Buah Strawberry

.................................. 11

Tabel II.6

Radikal Bebas ......................................................................... 31

Tabel III.1

Formulasi sediaan sabun cair ekstrak buah strawberry

Tabel III.2

Rencana penelitian

........ 68

................................................................ 77

vi

DAFTAR GAMBAR

Gambar II.1

Buah Strawberry

............................................................ 7

Gambar II.1.5

Struktur Antosianin

Gambar II.1.5

Struktur Kimia Ellagic Acid ........................................... 13

Gambar II.1.5

Struktur Vitamin C ......................................................... 14

Gambar II.1.6

Skrinning Fitokimia

A. Struktur Flavonoid B. Struktur Monoterpen C. Struktur Steroid

........................................................ 12

....................................................... 15 ......................................................... 16 ...................................................... 18

.............................................................. 21

E. Struktur Tanin ................................................................. 22 F. Struktur Triterpenoid ...................................................... 23 Gambar II.8

Anatomi Kulit

................................................................ 40

Gambar II.11

Mekanisme Penghambatan Radikal DPPH

vii

................... 49

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1.1

Perhitungan formulasi

.................................................... 80

viii

DAFTAR SINGKATAN

W/V

: Berat Volume

Depkes RI

: Departemen Kesehatan Republik Indonesia

UV - A

: Ultraviolet A

OH

: Hidroksida

Dirjen POM

: Direktorat Jenderal Pengawasan Obat Dan Makanan

DPPH

: Difenil pikrilhidrazil

pH

: Power of Hydrogen

Cm

: Centi meter

µg

: Mikrogram

g

: Gram

Ca

: Calsium

Mg/Kg

: Miligram per Kilogram

F. virgiana

: Fragaria virgiana

F. chiloensis

: Fragaria chiloensis

RI

: Republik Indonesia

Cu

: Cuprum

LDL

: Low Density Lipoprotein

C

: Celcius

C2H5OH

: Etanol

ix

kPa

: Kilopascal

Pka

: Prekallikrein activator

Cp

: Canadian Press

DNA

: Deoxyribo Nucleic Acid

HCI

: Hidrogen klorida

CI2

: Gas klor

ROOR

: Peroksida

Kkal

: Kilokalori

HOCI

: Hipoklorit

HNO2

: Asam Nitrit

N2O4

: Dinitrogen tetraoksida

Nm

: Nanometer

OH

: Hidroksida

x

BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang Indonesia merupakan salah satu negara dengan kekayaan hayati sangat tinggi. Bahan alam Indonesia telah diketahui memiliki berbagai manfaat dalam bidang kesehatan dan telah diformulasikan dalam berbagai sediaan seperti sediaan topikal. Penelitian sebelumnya telah menunjukkan manfaat tanaman seperti nanas yang dapat digunakan dalam penyembuhan luka, daun binahong sebagai antibakteri, kulit buah manggis untuk mempercepat penyembuhan luka bakar, lidah buaya sebagai antiacne. Bahan tumbuhan tersebut telah dibuat menjadi senyawa aktif dalam berbagai sediaan topikal (Rahayu, Agustina dan Tjandrawinata, 2017). Bagian tubuh yang terpenting dari tubuh kita yang melindungi bagian dalam tubuh dari gangguan fisik maupun mekanik, gangguan panas atau dingin, gangguan sinar radiasi atau sinar ultraviolet, gangguan kuman, bakteri, jamur, atau virus adalah kulit. Kulit merupakan “selimut” yang menutupi permukaan tubuh dan memiliki fungsi utama sebagai pelindung dari berbagai macam gangguan dan rangsangan luar. Fungsi perlindungan ini terjadi melalui sejumlah mekanisme biologis, seperti pembentukan lapisan tanduk secara terus – menerus, respirasi dan pengaturan suhu tubuh, produksi sebum dan

1

keringat dan pembentukan pigmen melanin untuk melindungi kulit dari bahaya sinar ultraviolet matahari, sebagai peraba dan perasa, serta pertahanan terhadap tekanan dan infeksi dari luar (Kasenda, Paulina dan lolo astuty, 2016). Radikal bebas adalah atom atau molekul yang tidak stabil dan sangat reaktif karena mengandung satu atau lebih elektron tidak berpasangan pada orbital terluarnya. Untuk mencapai kestabilan atom atau molekul, radikal bebas akan bereaksi dengan molekul di sekitarnya untuk memperoleh pasangan elektron. Reaksi ini akan berlangsung terus–menerus

dalam

tubuh

dan

bila

tidak

dihentikan

akan

menimbulkan berbagai penyakit seperti kanker, jantung, katarak, penuaan dini, serta penyakit degeneratif lainnya. Oleh karena itu, tubuh memerlukan suatu substansi penting yaitu antioksidan yang mampu menangkap radikal bebas tersebut sehingga tidak dapat menginduksi suatu penyakit (Rival Ferdiansyah, Revika Rachmaniar, Haruman Kartamihardja, Elisabeth Meliana, 2016). Aktivitas penangkapan radikal bebas dievaluasi menggunakan sistem pendeteksian radikal bebas 2,2– difenil –1 pikrilhidrazil (DPPH). DPPH digunakan secara luas untuk menguji kemampuan suatu senyawa sebagai penangkap radikal bebas atau donor hidrogen, atau untuk mengevaluasi aktivitas antioksidan dari makanan. DPPH memberikan absorbsi

maksimum

pada

panjang

gelombang

menghasilkan warna ungu (Agustina et al., 2017).

2

516

nm

dan

Antioksidan adalah zat yang dapat menunda, memperlambat, dan mencegah terjadinya proses oksidasi serta menetralisir radikal bebas. Antioksidan

menstabilkan

radikal

bebas

dengan

melengkapi

kekurangan elektron yang dimiliki radikal bebas yang dapat menimbulkan stress oksidatif. Stress oksidatif (oxidative stress) adalah ketidakseimbangan antara radikal bebas (peroksidan) dan antioksidan yang dipicu oleh dua kondisi umum, yaitu kurangnya antioksidan dan kelebihan pereduksi radikal bebas (Umar, 2014). Antioksidan berfungsi mengatasi atau menetralisir radikal bebas sehingga diharapkan dengan pemakaian produk yang mengandung antioksidan dapat menghambat dan mencegah terjadinya kerusakan tubuh

dari

timbulnya

penyakit

degeneratif.

Bila

ketersediaan

antioksidan dalam tubuh tidak memadai, maka daya tahan tubuh akan menurun dan proses penuaan dini akan terjadi. Oleh sebab itu, ketersediaan antioksidan dalam tubuh harus dipertahankan dan ditingkatkan untuk dapat menangkal radikal bebas (Utama, 2017). Pada saat ini, strawberry adalah buah yang banyak dibudidayakan di Indonesia. Strawberry merupakan buah yang berpotensi dengan kandungan fitokimia yang tinggi (Wang dan Lin, 2000), seperti asam ellagik, katekin, kuarsetin, kaempferol, dan antosianin (pelargonidin dan sianidin) (Manach et al., 2005). Menurut Svarcova et al., ( 2007 ), buah strawberry berperan sebagai perlindungan terhadap sel kanker, pencegahan penyakit jantung iskemik, antitumorgenik, anti–inflamsi,

3

anti alergi, antimutagenik, antimikroba, dapat menghaluskan kulit, membuat warna kulit terlihat lebih cerah dan bersih, terutama antosianin.(Deni Anggraini, Armon Fernando, 2017). Antosianin dari strawberry adalah kandungan utama senyawa polifenol dengan efek antioksidan yang tinggi (Musilova et al., 2013 ). Menurut Giampieri et al. ( 2012 ), ekstrak strawberry sebanyak 0,5 mg / ml atau sebanyak 0,5 % ( w / v ) memiliki efek fotoprotektif yang dapat melindungi kulit dari kerusakan yang disebabkan oleh radiasi UV – A yang dapat menginduksi timbulnya radikal bebas (Deni Anggraini, Armon Fernando, 2017). Sabun secara umum didefinisikan sebagai garam alkali dari asam lemak rantai panjang. Saat lemak atau minyak disaponifikasi terbentuk garam natrium atau kalium dari asam lemak rantai panjang yang disebut sabun. Sabun dihasilkan dari dua bahan utama yaitu alkali dan trigliserida (lemak atau minyak) (Rika Yulianti, Damas Anjar Nugraha, 2015). Sabun mandi cair adalah sediaan pembersih kulit yang dibuat dari bahan dasar sabun dengan penambahan bahan lain yang diizinkan dan digunakan untuk mandi tanpa menimbulkan iritasi pada kulit. Sabun cair merupakan produk yang lebih banyak disukai dibandingkan sabun padat oleh masyarakat sekarang ini, karena sabun cair lebih higienis dalam penyimpanannya dan lebih praktis dibawa kemana – mana (Rika Yulianti, Damas Anjar Nugraha, 2015). 4

Terdapat beberapa penelitian relevan tentang buah strawberry. Berdasarkan jurnal yang berjudul “Formulasi Krim Sari Buah Strawberry (Fragaria x ananassa) Sebagai Antioksidan”. Seluruh sediaan memiliki aktivitas antioksidan dengan nilai IC50 52.29 ppm dan 66.96 ppm serta tidak menyebabkan iritasi (Rival Ferdiansyah, Revika Rachmaniar, Haruman Kartamihardja, Elisabeth Meliana, 2016). Berdasarkan jurnal yang berjudul “Formulasi Dan Evaluasi Sabun Mandi Cair Dengan Ekstrak Tomat (Solanum Lycopersicum L.) Sebagai Antioksidan”. Berdasarkan uji evaluasi yang telah dilakukan terhadap sabun cair maka dapat disimpulkan bahwa formula dengan konsentrasi carbopol 6% adalah yang terbaik (Agustina et al., 2017). Berdasarkan jurnal yang berjudul “Effects Of Temperature On The Chemical Composition And Antioxidant Activity Of Three Strawberry Cultivars”. Data yang diperoleh menunjukkan bahwa penyimpanan dingin adalah cara yang efektif untuk menjaga kualitas stroberi (Cordenunsi et al., 2005). Berdasarkan jurnal yang berjudul “Antioxidant Capacity And Antioxidants Of Strawberry, Blackberry, And Raspberry Leaves”. Kapasitas antioksidan infus daun stroberi (ditentukan dengan metode DPPH) lebih rendah daripada anggur merah dan infus teh, tetapi sebanding dengan kapasitas antioksidan dari anggur putih dan minuman buah (Buřičová, Andjelkovic dan Čermáková, 2011).

5

Berdasarkan literatur di atas, peneliti tertarik menggunakan buah strawberry sebagai antioksidan dalam sediaan sabun mandi cair untuk mengurangi radikal bebas pada tubuh sebagai upaya dalam menjaga kesehatan kulit. Metode yang digunakan dalam penelitian ini yaitu DPPH. 1.2

Rumusan Masalah 1. Metabolit sekunder apakah yang terdapat pada ekstrak etanol 96% buah strawberry (Fragaria x ananassa) ? 2. Apakah ekstrak etanol 96% buah strawberry (Fragaria x ananassa) memiliki aktivitas antioksidan terhadap radikal bebas DPPH pada sediaan sabun mandi cair ? 3. Berapakah konsentrasi sabun mandi cair ekstrak etanol 96% buah strawberry (Fragaria x ananassa) yang efektif sebagai antioksidan ?

1.3

Tujuan penelitian 1.

Untuk mengetahui metabolit sekunder yang terdapat pada ekstrak etanol 96% buah strawberry (Fragaria x ananassa).

2.

Untuk mengetahui aktivitas antioksidan sediaan sabun mandi cair ekstrak etanol 96 % buah strawberry (Fragaria x ananassa).

3.

Untuk mengetahui konsentrasi sabun mandi cair ekstrak etanol 96% buah strawberry (Fragaria x ananassa) yang efektif sebagai antioksidan.

6

1.4

Manfaat Penelitian 1. Bagi peneliti Dapat mengetahui aktivitas antioksidan pada ekstrak etanol 96% buah strawberry dengan metode DPPH (2,2-diphenyl-1picrylhydrazil). 2. Bagi Institusi Dapat menjadi acuan untuk penelitian – penelitian selanjutnya yang berhubungan dengan buah strawberry (Fragaria x ananassa). 3. Bagi Masyarakat Dapat menjadi sumber ilmu baru dalam penggunaan buah strawberry sebagai antioksidan

7

BAB II TINJAUAN PUSTAKA II.1

Buah Strawberry ( Fragaria x ananassa ) Tinjauan mengenai tumbuhan ini meliputi klasifikasi, uraian tumbuhan, manfaat serta kandungan kimia.

Gambar II.I Buah Strawberry (sumber: balitjestro.litbang.pertanian.go.id/2015/07) II.I.1 Klasifikasi Tumbuhan Menurut

(Inggrid,

2015),

tanaman

diklasifikasikan sebagai berikut sebagai berikut : 

Kingdom

: Plantae



Divisi

: Spermatophyta



Sub Divisi

: Angiospermae



Kelas

: Discotyledonae



Sub Kelas

: Rosidae



Ordo

: Rosales

8

strawberry



Famili

: Rosaceae



Genus

: Fragaria



Spesies

: Fragaria x ananassa

II.1.2 Uraian Tumbuhan Strawberry adalah tanaman dengan famili Rosaceae. Tanaman strawberry umumnya tumbuh pada daerah dataran tinggi dengan suhu udara yang sejuk, di Jawa Barat strawberry banyak dibudidayakan pada daerah Lembang dan Cianjur. Tanaman strawberry merupakan tanaman herbal. Buah strawberry memiliki struktur akar tanaman yang terdiri atas pangkal akar, batang akar, ujung akar, bulu akar serta tudung akar. Tanaman strawberry berakar tunggang panjangnya dapat mencapai 100 cm, akan tetapi pada umumnya hanya menembus lapisan atas tanah sedalam 15 cm – 45 cm. Bunga strawberry tersusun sebagai bunga majemuk yang berukuran panjang, terletak pada ujung tanaman. Batang tanaman strawberry beruas – ruas pendek dan berbuku – buku, banyak mengandung air. Tanaman strawberry merupakan salah satu tanaman buah – buahan yang mempunyai nilai ekonomi tinggi. Daya pikatnya terletak pada warna buah yang merah mencolok dengan bentuk yang mungil, menarik, serta rasa yang manis dan segar (Gunawan.,W, 2003 ).

9

Buah strawberry mengandung banyak air dan serat, memiliki banyak biji kecil pada bagian buahnya. Buah strawberry umumnya berbentuk kerucut hingga bulat, buah yang muda berwarna hijau namun setelah tua berubah menjadi warna merah atau kuning kemerah – merahan. Biji strawberry berukuran kecil dan terletak diantara daging buah (Inggrid, 2015). Sifat dan ketahanan buah strawberry untuk setiap varietas berbeda, sehingga perlakuan yang diberikan untuk setiap varietas dapat berbeda. Kondisi ini mengakibatkan buah strawberry yang dipanen, baik waktu maupun tingkat kesegaran dan kekerasan buah tidak sama. Kualitas strawberry ditentukan oleh rasa, kemulusan kulit dan keutuhan akibat benturan atau hama penyakit.(Inggrid, 2015). Strawberry merupakan buah yang sangat berguna untuk kesehatan manusia karena banyak mengandung banyak nutrisi dan senyawa bioaktif, diantaranya adalah senyawa fenol vitamin C , flavonoid dan ellagic acid. Biji strawberry mengandung 72% asam lemak tidak jenuh dan mikronutrien esensial sebesar 20 – 25 µg/100 g buah segar. Warna merah pada strawberry disebabkan adanya pigmen alami yang kaya akan senyawa polifenol seperti antosianin, dari hasil penelitian didapat kadar antosianin pada strawberry adalah 150 – 600 mg/kg buah segar ( Francesca Giampieri, et al., 2012 ). Antosianin dalam strawberry tidak hanya 10

memberikan warna merah yang menarik, tetapi juga berfungsi sebagai antioksidan (Inggrid, 2015). Strawberry yang dapat kita temukan di pasar swalayan adalah hibrida yang dihasilkan dari persilangan F. Virgiana L. Var Duchesne asal Amerika Utara dengan F. Chiloensis L. Var Duchesne asal Chili. Persilangan ini menghasilkan hibrid yang merupakan strawberry modern ( komersil ) Fragaria x annanassa var Duchesne (Recsanti, 2009). Rasa strawberry berasal dari kombinasi fruktosa, glukosa dan sukrosa, asam organic ( asam sitrat dan asam fenolik ) serta tannin bercampur dengan aroma senyawa yang terkandung di dalamnya (Recsanti, 2009). II.1.3 Manfaat Tumbuhan Strawberry merupakan sumber senyawa polifenol yang besar dengan aktivitas antioksidan dapat memberikan perlindungan terhadap penyakit kardiovascular (Recsanti, 2009). Senyawa fenolik strawberry terdiri atas senyawa polimer (ellagitannin dan gallotannin), dan juga molekul – molekul monomer seperti asam ellagic dan glikosid asam ellagic, antosianin,

flavonols,

cathecin

dan

coumaroyl

glycosides.

Ellagitannin termasuk senyawa tannin yang dapat dihidrolisis juga

11

ditemukan dalam buah delima, raspberry merah dan hitam, blackberry dan beberapa kacang – kacangan (Recsanti, 2009). Strawberry adalah salah satu buah yang kaya akan pigmen warna. Warna merah pada strawberry disebabkan oleh antosianin, pigmen

warna

yang

juga

memiliki

aktivitas

antioksidan.

Kandungan antioksidan, yang cukup tinggi dibandingkan buah – buahan dan sayuran lain, menyebabkan strawberry dapat digunakan untuk menanggulangi masalah penyakit akibat radikal bebas seperti kanker, stroke dan proses penuaan. Di samping itu dapat mencegah terjadinya radang dan alergi. Strawberry merupakan buah – buahan yang mengandung gula rendah sehingga cocok untuk diet pengidap diabetes, melawan encok dan radang sendi. Karena antioksidan yang tinggi, buah ini juga dapat digunakan untuk menghaluskan kulit dan membuat cerah (Recsanti, 2009). Kandungan antioksidan lain yang terdapat dalam buah strawberry adalah senyawa derivat fenol catechin, quercetin dan kaemferol yang merupakan senyawa antioksidan aktif yang berperan dalam proses inflamasi. Selain itu, strawberry juga mengandung

asam

ellagic

yang

bermanfaat

sebagai

anti

karsinogenik dan anti mutagenik ( Johnston, 2005 ). Di dalam strawberry juga terdapat sejumlah kandungan vitamin C yang

12

cukup banyak dan mineral lainnya yang juga bermanfaat bagi tubuh manusia (Recsanti, 2009) II.1.4 Kandungan Zat Gizi Buah Strawberry Adapun kandungan zat gizi buah strawberry yang dapat dimakan mencapai 96%, sedangkan kandungan nutrisi per 100 gram dapat dilihat dalam tabel sebagai berikut: Tabel II.1 Kandungan Zat Gizi Buah Strawberry Nutrisi Kandungan Energi 37 Protein 0,8 Lemak 0,5 Karbohidrat 8,0 Kalsium 28 Fosfat 27 Besi 0,8 Vitamin A 60 Vitamin B1 0,03 Vitamin C 60 Air 89,9 (Sumber : Departemen Kesehatan RI, 1989)

Satuan Kkal g g g mg mg mg SI mg mg g

II.1.5 Senyawa Fitokimia Senyawa yang terdapat dalam strawberry adalah golongan fenol, komponen yang terbanyak adalah flavonoid (terutama antosianin, flavonol), tannin (ellagitannin dan gallotannin), asam fenolat ( asam hidroksibenzoat dan asam hidroksisinamat ) dan proanthocyanidin sebagai komponen minor ( Francesca Giampieri, et al., 2012; Kong JM, 2003 ). Golongan senyawa fenol banyak ditemukan pada tanaman. Senyawa fenol yang mengandung lebih 13

dari satu gugus hidroksi pada cincin aromatik disebut polifenol. Senyawa ini dapat membentuk eter, ester atau glikosida.(Inggrid, 2015). A. Antosianin Antosianin merupakan senyawa penting dalam strawberry, termasuk golongan senyawa polifenol, kandungan antosianin pada strawberry sekitar 150 – 600 mg / kg buah segar. Antosianin merupakan pigmen pemberi warna merah pada strawberry, antosianin pada strawberry merupakan derivat dari pelargonidin ( Pg ) dan cyanidin ( Cy ) aglycone, jenis antosianin yang paling banyak terdapat dalam buah adalah Pg 3 – glucoside ( Pg 3-gluc ), selain itu diketahui terdapat sekitar dua puluh lima pigmen antosianin dalam berbagai varietas strawberry ( Lopes da Silva, 2007 ). Berikut adalah struktur kimia dari antosianin :(Inggrid, 2015) Warna pigmen antosianin sangat dipengaruhi oleh pΗ larutan, pada kondisi asam bentuk pigmen antosianin adalah kation flavilium yang berwarna merah ungu. Stabilitas antosianin dipengaruhi oleh pΗ, temperatur dan kehadiran oksigen atau cahaya. Antosianin umumnya tidak stabil pada temperatur tinggi, sehingga selama proses pengolahan atau penyimpanan dapat menyebabkan

perubahan

antioksidan (Inggrid, 2015).

14

warna

atau

penurunan

aktivitas

Gambar II.I.5 Struktur Antosianin B. Ellagic Acid Ellagic acid merupakan senyawa fenolik alami, jenis tanaman yang banyak mengandung ellagic acid di antaranya adalah strawberry dan apel. Pada strawberry, senyawa tersebut terdapat pada bagian biji, daun, dan daging buah. Kandungan dalam daun per berat kering pada umumnya adalah yang terbesar, terutama pada varietas Tribute. Buah yang masih mentah mengandung ellagic acid lebih tinggi daripada buah yang matang. Di samping itu, varietas strawberry juga menentukan kandungan ellagic acid di dalam buah. Kandungan ellagic acid dalam buah strawberry berkisar 0,43–4,64 mg per gram berat kering, salah satu manfaatnya adalah untuk mencegah kanker (Inggrid, 2015). Ellagic acid adalah persenyawaan fenolik alamiah yang ditemukan

dalam

beberapa

anggota

Rosaceae,

Fragaceae,

Saxifragaceae, Cunominaceae, dan Myrothamnaceae. Rumus molekul ellagic acid adalah C14H6O8 dengan rumus bangun sebagai berikut : ( Dr. Ir. Livy Winata Gunawan, 2003 )

15

C. Kaempfenol, Quercetin dan Catechin Strawberry juga mengandung komponen fenolik lain yang berfungsi

sebagai

antioksidan,

senyawa

tersebut

adalah

kaempfenol, quercetin dan catechin (Inggrid, 2015).

Gambar II.I.5 Struktur Katekin D. Vitamin C Vitamin C atau L – asam askorbat merupakan antioksidan yang larut dalam air. Secara alami bentuk vitamin C adalah isomer – L, isomer ini memiliki aktivitas lebih besar dibandingkan dengan bentuk isomer – D (Recsanti, 2009). Sebagai antioksidan , vitamin C bekerja dengan menjadi donor electron, dengan cara memindahkan satu electron ke senyawa logam Cu. Selain itu, vitamin C juga dapat menyumbangkan elektron ke dalam reaksi biokimia interseluler dan ekstraseluler. Vitamin C dapat menghilangkan senyawa oksigen reaktif, mencegah terjadinya LDL teroksidasi, mentransfer elektron ke dalam tokoferol teroksidasi dan mengabsorbsi logam dalam saluran pencernaan (Recsanti, 2009).

16

Antioksidan vitamin C mampu bereaksi dengan radikal bebas, kemudian mengubahnya menjadi radikal askorbil. Senyawa radikal ini akan segera berubah menjadi askorbat dan dehidroaskorbat. Asam askorbat dapat bereaksi dengan oksigen teraktivasi, seperti anion superoksida dan radikal hidroksil (Recsanti, 2009).

Gambar II.1.5 Struktur Vitamin C II.1.6 Skrinning Fitokimia A.

Flavonoid Flavonoid merupakan senyawa metabolit sekunder yang

banyak terdapat pada tumbuh – tumbuhan. Kandungan senyawa flavonoid di dalam tumbuhan sangat rendah, yaitu sekitar 0,25% dan secara umum terikat atau terkonjugasi dengan senyawa gula membentuk glikosida (Robinson, 1991). Flavonoid umumnya larut dalam air dan dapat diekstraksi dengan etanol 70%. Pada penyarian lebih lanjut digunakan petroleum eter (PE), etanol 80%, dan pelarut organik lain, flavonoid tetap berada dalam lapisan air (Prianingrum, 2006).

17

Efek

flavonoid

terhadap

organisme

sangat

banyak

macamnya sehingga tumbuhan yang mengandung flavonoid dapat dipakai

dalam

pengobatan

(Robinson,1991).

Flavonoid

menunjukkan aktivitasnya sebagai anti alergi, anti inflamasi, anti mikrobial, dan anti kanker. Pada kenyataannya, flavonoid bekerja sebagai anti oksidan kuat, melindungi dari serangan oksidatif dan radikal bebas (Anonim, 2006). Di antara senyawa flavonoid yang telah lama dikenal dan merupakan suatu kelompok antioksidan yakni, kelompok polifenol memiliki kemampuan sebagai scavenger superoksida, oksigen singlet, dan radikal peroksi lipid (Sitompul, 2003). Flavonoid dapat bekerja sebagai inhibitor lipoksigenase. Penghambatan lipoksigenase dapat menimbulkan pengaruh lebih luas karena reaksi lipoksigenase merupakan langkah pertama pada jalur yang menuju ke hormon eikosanoid seperti prostaglandin dan tromboksan (Prianingrum, 2006). Karakteristik struktur flavonoid yang mampu memberikan efek antioksidan antara lain karena adanya (1) gugus katekol ( O – dihidroksi ) pada cincin B yang mempunyai sifat sebagai donor proton, (2) gugus piragalol ( trihidroksi ) pada cincin B, (3) gugus 4 – oxo pada cincin heterosiklik, (4) gugus 3 – OH pada cincin heterosiklik, serta (5) gugus 5 – OH dan 7 – OH yang potensial pada keadaan tertentu (Prianingrum, 2006).

18

Gambar A. Struktur Flavonoid B.

Monoterpen Senyawa monoterpen yang terdiri dari 2 unit isopren

memiliki 10 atom karbon ( C ), meskipun ada beberapa yang kehilangan 1 – 2 atom C dalam proses pembentukannya. Kedua bentuk senyawa ini, yaitu siklik dan asiklik, banyak didapat secara alami. Banyak senyawa monoterpen telah berhasil diisolasi dari tumbuhan dan sebagian besar merupakan komponen dalam minyak atsiri yang memiliki nilai ekonomi yang cukup tinggi. Umumnya senyawa monoterpen tidak berwarna, tidak larut dalam air, ikut dalam fraksi terdestilasi uap, dan memiliki bau spesifik, serta beberapa di antaranya bersifat optik aktif. Untuk mendapatkan secara murni, ada sedikit kesulitan karena terdapat dalam campuran yang kompleks dan terjadinya isomerisasi ataupun penyusunan kembali

(rearrangement).

Keberadaan

senyawa

monoterpen

tersebar luas dalam tumbuhan, tetapi tidak spesifik untuk satu jenis atau kelompok tumbuhan. Dengan kata lain, tidak ada tumbuhan yang memiliki satu senyawa terpen, tetapi terkadang kandungan utamanya

berupa

sekelompok

19

senyawa

terpen.

Senyawa

monoterpen juga terdapat pada beberapa Briofita dan fungi. Beberapa senyawa monoterpen asiklik dapat dilihat pada gambar, biasanya terdapat perbedaan pada posisi ikatan rangkap dan gugus fungsi yang dikandungnya. Proses

siklisasi

dapat

terjadi

dalam

pembentukan

monoterpen sehingga membentuk suatu monoterpen siklik, seperti pada gambar di atas. Senyawa monoterpen juga terdapat dalam bentuk bisiklik sebagai turunan dari senyawa monoterpen siklik, seperti contoh pada gambar

Gambar B. Struktur Kimia Monoterpen C.

Seskuiterpen Kelompok seskuiterpen ( C- 15 ) termasuk kelompok yang

ikut dalam proses destilasi uap seperti monoterpen. Senyawa yang

20

banyak dijumpai dalam tumbuhan adalah farnesol yang merupakan senyawa seiskuiterpen alkohol asiklik. Beberapa contoh senyawa dari seiskuiterpen adalah bisabolen yang tersebar luas dalam tumbuhan, zingiberen (dalam Zingiber officinale), ar–turmeron (dalam Curcuma longa), lanseol (dalam Santalum lanceolatum), dan pereson (dalam Trixis pipitzahuac). Senyawa seiskuiterpen dengan struktur yang tidak biasa, merupakan suatu seiskuiterpen monosiklik, kemungkinan terbentuk dari penyusunan kembali (rearragements) dan reaksi oksidasi dari isopren, contohnya zerumbon (dalam Zingiber zerumber), humulen (dalam Humulus lupulus), elemol (dalam Canarium luzonicum) dan nootkatin (dalam Cupressus macrocarpa). Kelompok

senyawa

seiskuiterpen

bisiklik

dibedakan

menjadi tipe naftalen dan azulen berdasarkan struktur senyawa siklik yang terbentuk pada proses dehidrogenasi, selain itu ada juga yang membentuk aromatik. Sebagai contoh, seperti terlihat pada gambar di atas, yaitu α- kadinen ( dalam Cedrus spp. ), eudesmol ( dalam Eucalyptus piperita ), β- selinen ( dalam Apium graveolens ), dan santonin ( dalam Artemisia spp. ). Kelompok senyawa monoterpen

dan

seiskuiterpen

komponen minyak atsiri.

21

yang

umumnya

merupakan

D.

Steroid Steroid

merupakan

lipid

yang

dikarakteristikkan

mempunyai kerangka karbon yang dihubungkan dengan empat cincin (Prianingrum, 2006)

Gambar D. Struktur Steroid Sebagian besar senyawa steroid dan terpenoid adalah senyawa non polar dan karena itu dapat dipisahkan dari komponen tumbuhan yang polar dengan mengekstraksi menggunakan pelarut seperti benzena atau eter (Prianingrum, 2006). Sterol merupakan senyawa steroid berbentuk alkohol dengan kerangka karbon C27 - C29 dan mempunyai rantai cabang alifatik. Sterol yang terdapat dalam tumbuhan digolongkan dalam fitosterol, misalnya, β – sitosterol ( Harborne, 1984). Senggani juga memiliki komponen aktif steroid, misalnya β – sitosterol, α – amyrin, dan sitosterol 3–O–β–D-glucopyranoside. Pada umumnya steroid dapat bermanfaat untuk mengurangi inflamasi dan sebagai obat kontrasepsi oral (Prianingrum, 2006).

22

A.

Tanin Tanin merupakan substrat kompleks yang biasanya terjadi

sebagai campuran polifenol yang sulit diseparasi karena tidak dapat dikristalkan. Tanin terdapat luas dalam tumbuhan berpembuluh dalam angiospermae khususnya jaringan kayu. Dalam industri, tanin merupakan senyawa yang berasal dari tumbuhan yang mampu mengubah kulit hewan mentah menjadi kulit siap pakai. Sedangkan dalam dunia kesehatan tanin bermanfaat sebagai astringen yang mengakibatkan pengurangan bengkak ( edema ), radang, dan sekresi

pada

gastrointestinal

(

Harborne,

1984

).

Tanin

terhidrolisiskan dan glikosida dapat diekstraksi dengan air panas atau campuran etanol – air (Prianingrum, 2006).

Gambar E. Struktur Tanin F.

Saponin Dan Triterpenoid Saponin adalah senyawa glikosida steroid, steroid alkaloid,

atau triterpen yang ditemukan dalam tumbuhan, khususnya pada

23

kulit tumbuhan sebagai lapisan pelindung. Saponin dipercaya bermanfaat untuk diet manusia dan pengontrol kolesterol. Tetapi beberapa mempunyai sifat racun, misalnya, soapberry, jika dimakan dan menyebabkan ruam pada kulit. Saponin jenis ini disebut sebagai sapotoksin ( Anonim, 2006 ). Beberapa penelitian menunjukkan bahwa saponin mempunyai spektrum yang lebar sebagai anti – jamur, anti – bakteri, menurunkan kadar kolesterol darah, dan menghambat pembentikan sel kanker (Prianingrum, 2006). Saponin adalah glikosida triterpena dan sterol dan telah terdeteksi dalam lebih dari 90 suku tumbuhan. Saponin merupakan senyawa aktif permukaan dan bersifat seperti sabun, serta dapat dideteksi berdasarkan kemampuannya membentuk busa dan menghemolisis sel darah. Pencarian saponin dalam tumbuhan telah dipicu oleh kebutuhan akan sumber sapogenin yang mudah diperoleh dan dapat diubah di laboratorium menjadi sterol hewan yang

berkhasiat

penting

(

misalnya,

kortison,

estrogen,

kontraseptik, dll ) (Prianingrum, 2006). Senyawa glikosida seperti saponin dan glikosida jantung tidak larut dalam pelarut non polar. Senyawa ini paling cocok diekstraksi dari tumbuhan memakai etanol atau metanol panas 70 – 95 % (Prianingrum, 2006).

24

Gambar F. Struktur Triterpenoid II.2

Simplisia Dalam buku “ Materia Medika Indonesia “ ditetapkan definisi bahwa simplisia adalah bahan alamiah yang dipergunakan sebagai obat yang belum mengalami pengolahan apapun juga dan kecuali dikatakan lain, berupa bahan yang telah dikeringkan.(RI dan DIREKTORAT, 2000) Simplisia dibedakan menjadi simplisia nabati, simplisia hewani dan simplisia pelikan ( mineral ). Simplisia nabati adalah simplisia yang berupa tumbuhan utuh, bagian tumbuhan atau eksudat tumbuhan. Eksudat tumbuhan adalah isi sel yang secara spontan keluar dari tumbuhan atau isi sel yang dengan cara tertentu dikeluarkan dari selnya atau senyawa nabati lainnya yang dengan cara tertentu dipisahkan dari tumbuhannya dan belum berupa senyawa kimia murni (RI dan DIREKTORAT, 2000).

25

II.3

Ekstraksi

II.3.1 Definisi Ekstraksi Ekstraksi yaitu suatu proses pemisahan suatu substansi atau zat dari campurannya dengan menggunakan pelarut yang sesuai. Senyawa aktif yang terdapat dalam berbagai simplisia dapat digolongkan ke dalam golongan minyak atsiri, alkaloid, flavonoid, dan lain – lain. Dengan diketahuinya senyawa aktif yang dikandung simplisia akan mempermudah pemilihan pelarut dan cara ekstraksi yang tepat ( Depkes RI,2000). Efektifitas ekstraksi senyawa kimia dari tumbuhan bergantung pada ( Tiwari et al, 2011 ) : 1.

Bahan – bahan tumbuhan yang diperoleh.

2.

Keaslian dari tumbuhan yang digunakan.

3.

Proses ekstraksi.

4.

Ukuran partikel.

II.3.2 Metode Ekstraksi Metode ekstraksi dapat dibedakan menjadi dua yaitu ( Depkes RI, 2000 ) : 1.

Ekstraksi secara dingin a.

Maserasi

26

Maserasi adalah proses pengekstrakan simplisia dengan menggunakan pelarut dengan beberapa

kali

pengocokan atau pengadukan pada temperatur ruangan ( kamar ). b.

Perkolasi Perkolasi adalah ekstraksi dengan pelarut yang selalu

baru sampai sempurna (exhaustive extraction ) yang umumnya dilakukan pada temperatur ruangan. Proses terdiri dari tahapan pengembangan bahan, tahap maserasi antara, tahap perkolasi sebenarnya ( penetesan atau penampungan ekstrak ) sampai diperoleh ekstrak ( perkolat ) yang jumlahnya 1 – 5 kali dari bahan. 2.

Ekstraksi Secara Panas a.

Refluks Refluks

adalah

ekstraksi

dengan

pelarut

pada

temperatur titik didihnya, selama waktu tertentu dan jumlah pelarut terbatas yang relatif konstan dengan adanya pendingin balik. Umumnya dilakukan pengulangan proses pada residu pertama sampai 3 – 5 kali sehingga dapat termasuk proses ekstraksi sempurna. b.

Soxhlet

27

Soxhlet adalah ekstraksi menggunakan pelarut yang selalu baru yang umumnya dilakukan dengan alat khusus sehingga terjadi ekstraksi kontinu dengan jumlah pelarut relatif konstan dengan adanya pendingin balik. c.

Digesti Digesti adalah maserasi kinetik ( dengan pengadukan

kontinu ) pada temperatur yang lebih tinggi dari temperatur ruangan ( kamar ), yaitu secara umum dilakukan pada temperatur 40 – 50 oC. d.

Infusa Infus adalah ekstraksi dengan pelarut air pada

temperatur penangas air ( bejana infus tercelup dalam penangas air mendidih, temperatur terukur 96 – 98 oC ) selama waktu tertentu ( 15 – 20 menit ). e.

Dekok Dekok adalah infus pada waktu yang lebih lama (

≥30OC ) dan temperatur sampai titik didih air. ( Depkes RI, 2000 ). Dekok adalah ekstraksi dengan pelarut air pada temperatur 90OC selama 30 menit. Metode ini digunakan untuk ekstraksi konstituen yang larut dalam air dan

28

konstituen yang stabil terhadap panas dengan cara direbus dalam air selama 15 menit ( Tiwari et al, 2011 ). II.3.3 Parameter Ekstraksi Dalam memperoleh ekstraksi yang baik harus diperhatikan parameter – parameter sebagai berikut ( Depkes RI, 2000 ) : 1.

Parameter Uji Non Spesifik Ekstrak a.

Susut pengeringan Parameter susut pengeringan adalah sisa zat setelah pengeringan pada temperatur 105OC selama 30 menit atau sampai berat konstan, yang dinyatakan nilai

persen.

Tujuannya

memberikan

batasan

maksimal ( rentang ) tentang besarnya senyawa yang hilang pada proses pengeringan. b.

Bobot jenis Parameter bobot jenis adalah massa persatuan volume yang diukur pada suhu kamar tertentu ( 25OC ) yang menggunakan alat khusus piknometer. Tujuannya

adalah

memberikan

batasan

tentang

besarnya massa persatuan volume yang merupakan parameter khusus ekstrak cair sampai ekstrak pekat ( kental ) yang masih dapat dituang. Memberikan gambaran kandungan kimia terlarut.

29

c.

Kadar air Parameter

kadar

air

adalah

pengukuran

kandungan air yang berbeda didalam bahan, dilakukan dengan cara yang tepat diantara cara titrasi, destilasi atau gravimetri, yang bertujuan untuk memberikan batasan minimal atau rentan tentang besarnya kandungan air dalam bahan. d.

Kadar abu Parameter kadar abu adalah bahan dipanaskan pada temperatur dimana senyawa organik dan turunannya terdekstruksi dan menguap. Sehingga unsur

mineral

dan

anorganik,

dengan

tujuan

memberikan gambaran kandungan mineral internal dan eksternal yang berasal dari proses awal sampai terbentuknya ekstrak. e.

Sisa pelarut Parameter

sisa

pelarut

adalah

penentuan

kandungan sisa pelarut ( yang memang ditambahkan ) yang secara umum dengan kromatografi gas. Untuk ekstrak cair berarti kandungan pelarutnya, misalnya kadar alkohol. Tujuannya adalah memberikan jaminan bahwa ekstrak selama proses tidak meninggalkan sisa pelarut yang memang seharusnya tidak boleh ada.

30

Sedangkan untuk ekstrak cair menunjukkan jumlah pelarut ( alkohol ) sesuai dengan yang ditetapkan. f.

Residu pestisida Parameter residu pestisida adalah menentukan kandungan sisa pestisida yang mungkin saja pernah ditambahkan atau mengkontaminasi pada bahan simplisia

pembuatan

memberikan

jaminan

ekstrak,

dengan

bahwa

ekstrak

tujuan tidak

mengandung pestisida melebihi nilai yang ditetapkan karena berbahaya ( toksik ) bagi kesehatan. g.

Cemaran logam berat Parameter

cemaran

logam

berat

adalah

menentukan kandungan logam secara spektroskopi serapan atom atau lainnya yang lebih valid, bertujuan untuk memberikan jaminan bahwa ekatrak tidak mengandung logam berat tertentu ( Hg, Pb, Cd ) melebihi

batas

yang

telah

ditetapkan

karena

berbahaya bagi kesehatan. h.

Cemaran mikroba Parameter cemaran mikroba adalah penentuan adanya

mikroba

mikrobiologis.

yang

patogen

Tujuannya

secara

adalah

analisis

memberikan

jaminan bahwa ekstrak tidak boleh mengandung

31

mikroba non patogen melebihi batas yang ditetapkan karena berpengaruh pada stabilitas ekstrak dan berbahaya ( toksik ) bagi kesehatan. 2.

Parameter Spesifik a.

Identitas Meliputi deskripsi tata nama ( nama ekstrak, nama

latin

tumbuhan,

bagian

tumbuhan

yang

digunakan, nama tumbuhan Indonesia ) dan dapat mempunyai senyawa identitas. Tujuannya untuk memberikan identitas objektif dari nama dan spesifik dari senyawa identitas. b.

Organoleptik Meliputi

penggunaan

panca

indra

untuk

mendeskripsikan bentuk ( padat, serbuk, kering, kental, cair ) warna ( kuning, coklat, dan lain – lain ), bau ( aromatik, tidak berbau, berbau ), rasa ( pahit, manis, kelat ). Dengan tujuan untuk pengenalan awal yang sederhana. c.

Senyawa yang terlarut dalam pelarut tertentu Melarutkan pelarut ekstrak dengan pelarut ( alkohol atau air ) untuk ditetapkan jumlah solute yang identik dengan jumlah senyawa kandungan secara gravimetri.

32

II.4

Radikal Bebas Radikal bebas adalah molekul yang mengandung satu atau lebih elektron tidak berpasangan pada orbital terluarnya, radikal bebas sangat reaktif dan tidak stabil, sebagai usaha untuk mencapai kestabilannya radikal bebas akan bereaksi dengan atom atau molekul di sekitarnya untuk memperoleh pasangan elektron. Reaksi ini berlangsung terus – menerus dalam tubuh, dan menimbulkan reaksi berantai yang mampu merusak struktur sel, bila tidak dihentikan akan mengoksidasi asam nukleat, protein, lemak dan DNA sel, sehingga dapat menimbulkan berbagai penyakit seperti kanker, jantung, katarak, penuaan dini, serta penyakit degeneratif lainnya.(Inggrid, 2015) Manusia telah memiliki sistem pertahanan terhadap oksidasi yang berasal dari dalam maupun luar tubuh. Pertahanan tubuh dari dalam berupa enzim – enzim peroksidase, katalase, glutation, tetapi seringkali enzim tersebut tidak mencukupi akibat pengaruh lingkungan yang buruk. Pada kondisi ini manusia membutuhkan antioksidan yang diperoleh dari makanan.(Inggrid, 2015) Sumber radikal bebas ada dua yaitu yang berasal dari dalam tubuh sendiri ( endogen ) dan dari luar tubuh ( eksogen ). Sumber radikal bebas endogen berasal dari

33

dalam

sel

oleh

mitokondria,

lisosom,

endoplasmic

rericulum dan inti sel. Sumber radikal bebas eksogen dapat berasal dari polutan, obat, makanan, radiasi, asap rokok, bahan pengawet, pestisida dan lainnya. Beberapa contoh senyawa Reactive Oxygen Spesies ( ROS ) yang ditemukan pada organisme hidup adalah superoksida ( O2* ), hidroksil ( OH* ), peroksil ( RO2* ), alkoksil ( RO* ) dan hidroperoksil ( HO2* ) ( Mark Percival, 1998 ). Berikut ini adalah beberapa contoh radikal bebas :(Inggrid, 2015) Tabel II.6. Radikal Bebas ( Mark Percival, 1998 ) Kelompok Oksigen Reaktif O2*

Radikal Superoksida

OH*

Radikal hidroksil

ROO*

Radikal peroksi

H2O2*

Hidrogen Peroksida

1

O2

Oksigen tunggal

NO*

Nitrit oksida

ONOO*

Nitrit peroksida

HOCI

Asam hipoklor

Radikal bebas juga disebut sebagai spesies oksigen reaktif ( ROS ) yang mencakup semua molekul yang mengandung oksigen yang sangat reaktif. Tekanan oksidatif ( oxidative stress ) merupakan suatu keadaan dimana tingkat 34

oksigen reaktif ( ROS ) yang toksik melebihi pertahanan antioksidan endogen. Keadaan ini akan menyebabkan tubuh kelebihan radikal bebas, sehingga dapat menyebabkan oksidasi pada lemak, protein dan kerusakan DNA.(Inggrid, 2015) II.4.1

Reaksi Pembentukan Radikal Bebas Mekanisme reaksi radikal bebas paling tepat

dibayangkan sebagai suatu deret reaksi – reaksi bertahap, yaitu (Umar, 2014) : a) Inisiasi Tahap inisiasi ialah pembentukan awal radikal – radikal bebas. Dalam klorinasi metana, tahap inisiasi ialah pemaksapisahan ( cleavage ) homolitik molekul C12 menjadi dua radikal bebas klor. Energi untuk reaksi ini diberikan oleh cahaya ultraviolet ( UV ) atau oleh pemanasan campuran

ke

temperatur

yang

sangat

tinggi.(Umar, 2014) b) Propagasi Setelah

terbentuk,

radikal

bebas

klor

mengalami sederetan reaksi sehingga terbentuk radikal bebas baru. Secara kolektif, terbentuknya reaksi ini disebut tahap propagasi

35

dari reaksi

radikal bebas. Pada hakikatnya, pembentukan awal beberapa radikal bebas akan mengakibatkan perkembangbiakan radikal bebas baru dalam suatu reaksi pengabdian diri ( self perpetuating ) yang disebut

reaksi

rantai. Sebagai

tahap

propagasi pertama, radikal bebas klor yang reaktif merebut sebuah atom hidrogen dari molekul metana, menghasilkan radikal bebas metal dan HCI. Radikal bebas metal itu juga reaktif. Dalam tahap propagasi kedua, radikal bebas metil merebut sebuah atom klor dari dalam molekul CI2. Tahap ini menghasilkan salah satu dari produk keseluruhan klormetana. Produk ini juga menghasilkan ulang radikal bebas klor, yang nantinya dapt merebut atom hidrogen dari molekul metana lain dan memulai deret propagasi selanjutnya.(Umar, 2014) c) Terminasi Daur propagasi terputus oleh reaksi – reaksi pengakhiran ( termination ) reaksi apa saja yang memusnahkan radikal bebas atau mengubah radikal bebas menjadi radikal yang stabil dan tidak reaktif, dapat mengakhiri daur propagasi

36

radikal bebas. Klorinasi metana di akhiri terutama oleh bergabungnya radikal – radikal bebas, inilah pemusnahan radikal bebas. Senyawa apa saja yang mudah terurai menjadi radikal bebas dapat bertindak sebagai satu inisiator. Satu contoh ialah peroksida ( ROOR ), yang mudah membentuk radikal bebas karena energi disosiasi ikatan RO – RO hanyalah sekitar 35 kkal/mol, lebih rendah daripada kebanyakan ikatan.(Umar, 2014) II.4.2 Jenis – Jenis Radikal Jenis – jenis radikal bebas yang merusak lipid terdiri dari (Umar, 2014) : a)

Reactive Oxygen Species ( ROS ), yaitu

senyawa

reaktif turunan oksigen, misalnya

radikal superoksida ( O2* ), radikal hidroksil ( OH* ), radikal alkoksil ( RO* ), radikal peroksil ( RO2* ) serta senyawa bukan radikal yang berfungsi sebagai pengoksidasi atau senyawa yang mudah mengalami perubahan menjadi radikal bebas, seperti hidrogen peroksida ( H2O2 ), ozon ( O3 ) dan HOCI.(Umar, 2014)

37

b)

Reactive Nitrogen Species ( RNS ), misalnya

nitrogen dioksida ( NO2* ), dan peroksinitrit ( ONOO* ) dan bukan radikal seperti HNO2 dan N2O4. Radikal bebas DPPH ( 1,1 – difenil – 2 – pikrilhidrazil ), yaitu suatu senyawa organik yang mengandung

nitrogen

tidak

stabil

dengan

absorbansi kuat pada λmax 517 nm dan berwarna ungu gelap. Setelah bereaksi dengan senyawa antioksidan, DPPH tersebut akan tereduksi dan warnanya Perubahan

akan

berubah

tersebut

spektrofotometer

menjadi

kuning.

diukur

dengan

dapat

dan

diplotkan

terhadap

konsentrasi. Keberadaan sebuah antioksidan yang dapat menyumbangkan elektron kepada DPPH, menghasilkan warna kuning yang merupakan ciri spesifik dari reaksi radikal DPPH. Penangkap radikal bebas menyebabkan elektron menjadi berpasangan

yang

kemudian

menyebabkan

penghilangan warna yang sebanding dengan jumlah elektron yang di ambil (Umar, 2014). II.5.Antioksidan Antioksidan

merupakan

senyawa

menangkap radikal bebas ( Prakash, 2011 ) :

38

yang

1) Antioksidan digunakan untuk menghambat autooksidasi. Fenol – fenol, senyawa dengan satu gugus OH yang terikat pada karbon cincin aromatik, merupakan antioksidan yang efektif, produk radikal bebas senyawa – senyawa ini terstabilkan secara resonansi dan karena itu tidak reaktif dibandingkan dengan kebanyakan radikal bebas lain. Vitamin E dan flavonoid adalah suatu antioksidan alamiah yang dijumpai dalam minyak – minyak nabati (Umar, 2014). Dalam pengertian kimia, antioksidan adalah senyawa – senyawa pemberi elektron, tetapi dalam pengertian biologis lebih luas lagi, yaitu semua senyawa yang dapat meredam dampak negatif oksidan, termasuk enzim – enzim dan protein – protein pengikat logam (Umar, 2014). Adapun

penentuan

persen

peredaman

aktivitas antioksidan dapat dihitung dengan rumus :(Umar, 2014)

39

% peredaman =

𝑎𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛 𝐷𝑃𝑃𝐻−𝑎𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 𝑢𝑗𝑖 𝑎𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛 𝐷𝑃𝑃𝐻

x100%

II.5.1 Jenis – Jenis Antioksidan Berdasarkan sumbernya, antioksidan digolongkan menjadi 3 kelompok, yaitu antioksidan primer, antioksidan sekunder, dan antioksidan tersier (Umar, 2014). a)

Antioksidan primer Antioksidan primer adalah antioksidan yang sifatnya

sebagai pemutus reaksi berantai ( chain – breaking antioxidant ) yang bisa bereaksi dengan radikal – radikal lipid dan mengubahnya menjadi produk – produk yang lebih stabil.(Prof.Dr. Ir. Kesuma Sayuti, MS Dr. Ir. Rina Yenrina, 2015) Antioksidan

primer

disebut

juga

antioksidan

enzimatis. Suatu senyawa dikatakan sebagai antioksidan primer apabila dapat memberikan atom hidrogen secara cepat

kepada

senyawa

radikal,

kemudian

radikal

antioksidan yang terbentuk segera berubah menjadi senyawa yang lebih stabil. Antioksidan primer meliputi enzim superoksida dismutase ( SOD ), katalase dan glutation peroksidase. Sebagai antioksidan, enzim – enzim tersebut menghambat pembentukan radikal bebas dengan cara memutuskan reaksi berantai, kemudian mengubahnya

40

menjadi lebih stabil. Misalnya Transferin, Feritin, albumin (Umar, 2014). b)

Antioksidan sekunder Antioksidan sekunder disebut juga antioksidan

eksogenus atau non – enzimatik. Antioksidan dalam kelompok ini juga disebut sistem pertahanan preventif. Dalam sistem pertahanan ini terbentuknya senyawa oksigen reaktif dihambat dengan cara pengkhelatan metal, atau dirusak pembentukannya. Pengkhelatan metal terjadi dalam cairan ekstraseluler. Antioksidan non – enzimatis dapat berupa komponen non – nutrisi dan komponen nutrisi dari sayuran dan buah – buahan. Kerja sistem antioksidan ini yaitu dengan cara memotong reaksi oksidasi berantai dari radikal bebas atau dengan cara menangkapnya. Akibatnya, radikal bebas tidak akan bereaksi dengan komponen seluler, misalnya Superoxide Dismutase ( SOD ), Glutathion Peroxidase ( GPx ), vitamin C, vitamin E dan β – Caroten (Umar, 2014). c)

Antioksidan tersier Antioksidan tersier bekerja memperbaiki kerusakan

biomolekul

yang disebabkan radikal

bebas.

Contoh

antioksidan tersier adalah enzim – enzim yang memperbaiki

41

DNA dan metionin sulfida reduktase (Prof.Dr. Ir. Kesuma Sayuti, MS Dr. Ir. Rina Yenrina, 2015). Berdasarkan sumbernya antioksidan dibagi dalam dua kelompok, yaitu antioksidan sintetik ( antioksidan yang diperoleh dari hasil sintesa reaksi kimia ) dan antioksidan alami ( antioksidan hasil ekstraksi bahan alami ). Beberapa contoh antioksidan sintetik yang diizinkan penggunaannya secara luas diseluruh dunia untuk digunakan dalam makanan adalah Butylated Hidroxyanisol ( BHA ), Butylated Hidroxytoluene ( BHT ), Tert – Butylated Hidroxyquinon ( TBHQ ) dan tokoferol. Antioksidan tersebut merupakan antioksidan yang telah diproduksi secara sintetis untuk tujuan komersial (Prof.Dr. Ir. Kesuma Sayuti, MS Dr. Ir. Rina Yenrina, 2015). II.5.2 Mekanisme Antioksidan Reaksi oksidasi dapat dicegah oleh bahan – bahan berikut (Umar, 2014) : a.

Bahan pengkhelat, yaitu untuk ion – ion logam pencetus terjadinya reaksi oksidasi radikal bebas. Berlangsungnya reaksi oksidatif seringkali diinisasi oleh adanya logam seperti Fe3+, Cu3+, Ni2+, Mn3+. Ion – ion logam ini bertindak sebagai inisiator,

42

karena pada tahap oksidasi mereka mampu bekerja sebagai radikal. Sebagai contoh, Cu2+ memiliki 27 elektron dan memerlukan sebuah elektron lebih untuk melengkapi pasangan elektronnya. Ion logam mengkatalisis reaksi oksidatif lewat sejumlah cara. Mereka dapat bereaksi langsung dengan oksigen menghasilkan radikal oksigen, yang kemudian menginisiasi suatu autoksidasi. Ion logam dapat membentuk kompleks dengan oksigen dan kemudian membentuk radikal peroksi. Bahan pengkhelat memiliki

kekuatan

antioksidan

dalam

bentuk

pengikatan ion logam, jadi secara termodianamik di katakan melepaskan logam tersebut dari lingkungan dalam larutan.(Umar, 2014) b.

Bahan pereduksi, yakni senyawa yang dapat mereduksi obat yang teroksidasi.(Umar, 2014)

c.

Senyawa – senyawa yang mudah teroksidasi, yaitu berupa bahan yang mempunyai sifat lebih mudah teroksidasi dibanding obat yang dilindungi. Ada beberapa senyawa

yang sangat

lebih mudah

teroksidasi dibanding senyawa yang dilindungi. Sesungguhnya bahan – bahan ini bertindak sebagai

43

pembersih oksigen yang baik dalam farmasi adalah natrium bisulfit dan asam askorbat.(Umar, 2014) d.

Terminator rantai, yaitu suatu bahan dalam obat mampu

bereaksi

dengan

radikal,

membentuk

senyawa baru yang bersifat radikal terminator rantai, yang tidak lagi membuat pemasukan baru dalam siklus propagasi radikal. Radikal yang baru ini diharapkan akan bersifat stabil secara intrinsik atau mungkin dapat membentuk molekul yang inert. Setiap senyawa yang dapat memberikan radikal hidrogen, sementara dia sendiri membentuk radikal yang stabil dan tidak mampu meneruskan siklus propagasi rantai, dapat bereaksi sebagai antioksidan. Dengan demikian antioksidan ini bereaksi sebagai aseptor yang juga disebut sebagai terminator rantai.(Umar, 2014) II.5.3 Metode Penentuan aktivitas antioksidan Metode – metode pengukuran aktivitas antiradikal bebas diantaranya (Umar, 2014) : a.

Metode CUPRAC, menggunakan bis ( neokuproin ) tembaga ( II ) (Cu(Nc)22+) sebagai pereaksi

44

kromogenik. Pereaksi Cu(Nc)22+ yang berwarna kuning.(Umar, 2014) b.

Metode

DPPH

pikrilhidrazil

menggunakan

sebagai

1,1–difenil–2-

sumber

radikal

bebas.

Prinsipnya adalah reaksi penangkapan hidrogen oleh DPPH dari zat antioksidan.(Umar, 2014) c.

Metode FRAF ( benzie dan strain, 1996 ) menggunakan Fe ( TPTZ )23+ kompleks besi ligan 2,4,6-tripiridil-triazin

sebagai

pereaksi

yang

kompleks biru.(Umar, 2014)

II.6.Kulit Kulit adalah organ tubuh yang terletak paling luar dan membatasinya dari lingkungan hidup manusis. Luas kulit orang dewasa sekitar 1,5 m2 dengan berat kira – kira 15 % berat badan. Kulit merupakan organ yang esensial dan vital serta merupakan cermin kesehatan dan kehidupan. Kulit juga sangat kompleks elastis dan sensitif, serta bervariasi pada keadaan iklim, umur, seks, ras dan lokasi tubuh (Hangga Damai Putra Gandasasmita, 2009). Kulit merupakan organ peliput karena terdiri dari jaringan yang bergabung secara struktural dan membentuk fungsi spesifik. Dengan ketebalan sekitar 2,97±0,28 mm,

45

kulit melindungi jaringan dan organ-organ penting dalam tubuh dari pengaruh lingkungan luar (Hangga Damai Putra Gandasasmita, 2009).

Gambar II.6 Anatomi Kulit Kulit terdiri dari dua bagian utama. Lapisan yang terluar adalah lapisan epidermis, yaitu lapisan tipis yang tersusun dari sel-sel epitelium. Epidermis dihubungkan ke bagian yang lebih dalam dan lebih tebal, yaitu jaringan penghubung (connective tissue) yang disebut dermis. Di bawah dermis adalah lapisan subkutan yang disebut hipodermis yang terdiri dari jaringan areolar dan jaringan adiposa (Hangga Damai Putra Gandasasmita, 2009). Kulit atau sistem peliput berfungsi antara lain sebagai pengatur suhu tubuh, pelindung, penerima rangsang, ekskresi, dan sintesis vitamin D. Dalam mengatur suhu, jika suhu lingkungan lebih tinggi dari suhu tubuh, maka hipothalamus

akan

46

memberikan

tanggapan

dengan

menstimulasi

pengeluaran

keringat

melalui

kelenjar

sudoriferus yang akan menurunkan suhu tubuh ke suhu normal kembali. Perubahan aliran darah ke kulit juga merupakan salah satu mekanisme pengaturan suhu tubuh. Dalam fungsi perlindungan dan penerima rangsang, kulit menutupi seluruh permukaan tubuh dan merupakan penyangga fisik yang melindungi jaringan di bawahnya dari gesekan fisik, serangan bakteri, dehidrasi dan radiasi ultraviolet. Kulit juga banyak mengandung syaraf-syaraf dan reseptor yang dapat mendeteksi stimulus yang berhubungan dengan suhu, sentuhan, tekanan dan nyeri. Selain memproduksi keringat yang membantu menurunkan suhu

tubuh,

kulit

juga

membantu

mengekskresikan

sejumlah kecil air, garam-garam, dan senyawa organik tertentu. Kulit juga berperan penting dalam sintesis vitamin D (Hangga Damai Putra Gandasasmita, 2009). Fungsi kulit menurut Wasitaatmadja (1997), yaitu: 1.

Proteksi Melindungi bagian dalam tubuh terhadap gangguan

fisik maupun mekanik, misalnya tekanan, gesekan, tarikan, gangguan kimiawi, seperti zat-zat kimia iritan (lisol, karbol, asam atau basa kuat lainnya), gangguan panas atau dingin,

47

gangguan sinar radiasi atau sinar ultraviolet, gangguan kuman, jamur, bakteri atau virus. 2.

Absorpsi Kemampuan absorpsi kulit dipengaruhi oleh ketebalan

kulit, hidrasi, kelembaban udara, metabolisme dan jenis vehikulum zat yang menempel di kulit. Penyerapan dapat melalui celah antar sel, saluran kelenjar atau saluran keluar rambut. 3.

Ekskresi Kelenjar-kelenjar pada kulit mengeluarkan zat-zat

yang tidak berguna atau sisa metabolisme dalam tubuh. Produk kelenjar lemak dan keringat di permukaan kulit membentuk keasaman kulit pada pH 5–6,5. 4.

Pengindra (sensori) Kulit mengandung ujung-ujung saraf sensorik di

dermis dan subkutis. Saraf-saraf sensorik tersebut lebih banyak jumlahnya di daerah erotik. 5.

Pengaturan suhu tubuh Kulit melakukan peran ini dengan mengeluarkan

keringat dan otot dinding pembuluh darah kulit. 6.

Pembentukan pigmen

48

Sel pembentuk pigmen kulit (melanosit) terletak di lapisan basal epidermis. Jumlah melanosit serta jumlah dan besarnya melanin yang terbentuk menentukan warna kulit. 7.

Keratinasi Proses keratinasi sel dari sel basal sampai sel tanduk

berlangsung selama 14–21 hari. Proses ini dilakukan agar kulit dapat melaksanakan tugasnya dengan baik. Pada beberapa macam penyakit kulit proses ini terganggu, sehingga kulit akan terlihat bersisik, tebal, kasar dan kering. 8.

Produksi vitamin D Kulit juga dapat membuat vitamin D dari bahan baku

7-dihidroksi kolesterol dengan bantuan sinar matahari. 9.

Ekspresi emosi Hasil gabungan fungsi yang telah disebut di atas

menyebabkan kulit mampu berfungsi sebagai alat untuk menyatakan

emosi

yang

terdapat

dalam

jiwa

manusia.(Hangga Damai Putra Gandasasmita, 2009) II.7.

Sabun

II.7.1

Definisi Sabun Sabun merupakan materi pembersih yang digunakan dengan air untuk membersihkan dan menghilangkan kotoran ( Edoga, 2009). Sabun mandi adalah senyawa natrium dan kalium dengan asam lemak dari minyak nabati

49

dan atau lemak hewani berbentuk padat, lunak, atau cair, dan

berbusa

digunakan

sebagai

pembersih

dengan

menambahkan zat pewangi dan bahan lainnya yang tidak membahayakan kesehatan. Sabun merupakan garam alkali karboksilat (RCOONa), dimana gugus R bersifat hidrofobik karena bersifat nonpolar dan COONa bersifat hidrofilik yakni bersifat polar ( Idrus, Ahmad, Kun Harismah, Agus Sriyanto, 2013).

Gambar II.7 Pembentukan lapisan tipis di atas permukaan air (Purnamawati, 2006) Molekul sabun memiliki rantai hidrokarbon panjang dengan gugus asam karboksilat pada salah satu ujungnya, yang memiliki ikatan ionik dengan ion logam biasanya natrium atau kalium. Dimana, ujung hidrokarbon bersifat nonpolar yang sangat larut pada substansi nonpolar dan ujung ionnya larut dalam air (Mishra, 2013). Sabun

50

memiliki struktur kimiawi dengan panjang rantai karbon C12 hingga C16, bersifat ampifilik yakni memiliki sifat hidrofobik (nonpolar) pada bagian ekornya yang dapat menarik kotoran dan lemak, serta sifat hidrofilik (polar) pada bagian kepala yang nantinya akan menarik kotoran yang larut dalam air (Nurhadi, 2012). Sabun yang dibuat pada penelitian ini merupakan sabun berbasisbsurfaktan yang memiliki wujud cairan kental. Sediaan ini mengandung suatubcampuran yang mengandung surfaktan dan bahan tambahan lainnya yang digunakan bersama dengan air untuk mencuci dan membersihkan kotoran (Christiani, 2015). II.7.2

Mekanisme Kerja Sabun Kemampuan sabun dalam membersihkan kotoran disebabkan sabun memiliki kemampuan untuk mengemulsi atau mendispersi bahan yang tidak larut dalam air. Kemampuan ini dapat terlihat dari struktur molekul sabun. Ketika sabun ditambahkan dengan air yang mengandung minyak atau bahan yang tidak larut dalam air, molekul sabun akan mengelilingi droplet minyak (Mishra, 2013).

51

Gambar II.7.2 Monomer surfaktan yang membentuk misel. Bagian kepala (hidrofilik) ditandai dengan lingkaran hitam. Bagian ekor (hidrofobik) ditandai dengan garis hitam (Yagui, CO Rangel,. Pessoa Jr A., Tavares LC,2005) Mekanisme

pembersihan

sabun

yakni

dengan

menurunkan tegangan antarmuka antara kotoran dengan permukaan kulit. Bagian hidrofilik surfaktan dalam sabun akan mengikat air, sedangkan bagian hidrofobiknya akan mengikat minyak atau lemak. Surfaktan akan menyusun diri membentuk misel dengan kotoran yang terjebak di dalamnya, sehingga ketika pembilasan misel tersebut akan terbawa oleh air dan kotoran juga akan ikut terbawa. II.7.3

Fungsi Sabun Fungsi utama dari penggunaan sabun adalah untuk membantu

menghilangkan

kotoran

dan

permukaan dan pori-pori kulit (Hidayat, 2006).

52

kuman

dari

II.7.4

Jenis Sabun Sabun umumnya dikenal dalam dua wujud, yakni sabun cair dan sabun padat. Perbedaan utama dari kedua wujud sabun ini adalah alkali yang digunakan dalam reaksi pembuatan sabun. Sabun padat menggunakan natrium hidroksida, sedangkan sabun cair menggunakan kalium hidroksida sebagai alkali (Syafruddin dan Kurniasih, 2013). Sabun yang beredar di pasaran saat ini tidak hanya dibuat melalui proses saponifikasi, pada akhir tahun 1940an sudah mulai dikembangkan pembuatan sabun melalui proses sintetis. Sabun yang dibuat secara sintetis dianggap sebagai alterrnatif yang lembut daripada sabun yang dibuat melalui proses saponifikasi. Sabun sintetis juga banyak digunakan dalam industri toiletries karena bahan ini lebih praktis dan ekonomis (Hidayat,2006). Meskipun sabun hasil saponifikasi dianggap lebih alami, ia memiliki kekurangan di antaranya yakni pH yang relatif tinggi, sifat daya bersihnya yang kurang efektif, dan membentuk gumpalan ketika digunakan dengan air sadah (Nix, 2000 dalam Hidayat, 2006).Sabun yang dibuat dengan proses saponifikasi dapat bekerja dengan baik pada soft water (bukan air sadah), tetapi dalam hard water (air sadah)

53

yang mengandung jumlah kalsium relatif tinggi, sabun dan kalsium bereaksi membentuk gumpalan yang disebut soap scum, sementara sabun sintetis mampu bekerja lebih efektif baik dalam soft maupun hard water tanpa disertai adanya pembentukan soap scum (Hidayat, 2006). II.7.5

Formula Sabun Secara garis besar, bahan-bahan penyusun sabun terdiri dari dua bagian yakni bahan dasar dan bahan tambahan. Bahan dasar terdiri dari pelarut atau tempat dasar bahan lain sehingga umumnya menempati volume yang lebih besar dari bahan lainnya. Bahan dasar memiliki fungsi utama untuk membersihkan dan menurunkan tegangan permukaan air. (Wasitaatmadja, 2007 dalam Gandasasmita, 2006). Bahan tambahan merupakan bahan-bahan yang sengaja

ditambahkan

dalam

formula

dengan

tujuan

memberikan efek-efek tertentu yang diinginkan konsumen seperti melembutkan kulit, aseptis, harum, dan lain sebagainya (Suryani et al., 2002 dalam Gandasasmita, 2006). Suatu sediaan sabun cair dapat diformulasikan dengan bahan-bahan berikut:

54

1.

Surfaktan primer yakni memiliki fungsi utama sebagai detergensia dan pembusaan. Secara umum surfaktan anionik digunakan karena memiliki sifat pembusaan yang baik, selain itu dapat pula digunakan surfaktan kationik,

namun

surfaktan

ini

memiliki

sifat

mengiritasi khususnya pada mata, sehingga perlu adanya kombinasi dengan surfaktan nonionik atau amfoter (Rieger, 2000 dalam Christiani, 2015). 2.

Surfaktan sekunder yaitu suatu bahan yang digunakan untuk memperbaiki fungsi dari surfaktan primer dalam hal detergensia dan pembusaan. Biasanya digunakan

surfaktan

nonionik

karena

mampu

menghasilkan busa yang lebih banyak dan mampu menstabilkan busa (Rieger, 2000 dalam Christiani, 2015). 3.

Bahan aditif yakni bahan-bahan tambahan yang dapat menunjang formula dan memberikan karakteristik tertentu pada sediaan (Rieger, 2000 dalam Christiani, 2015). Bahan-bahan aditif ini biasanya adalah: a. Pengatur viskositas adalah bahan yang digunakan untuk mengatur kekentalan sediaan. Menurut Buchmann

(2001)

kekentalan

sabun

cair

merupakan suatu aspek yang harus diperhatikan

55

karena terkait dengan preparasi, pengemasan, penyimpanan, aplikasi, dan aktivitas penghantaran (Christiani, 2015). Sediaan sabun cair diharapkan tidak hanya mudah digunakan, tetapi ia juga harus memiliki tampilan dan kekentalan yang menarik minat konsumen untuk menggunakan produk tersebut (Karsheva, M., Georgiva, S.,dan Handjiva, S., 2007). b. Humektan adalah bahan yang digunakan untuk meningkatkan kandungan air pada lapisan atas kulit (Barel, O. A., Marc Paye.,Howard, IMaibach, 2009). Berfungsi untuk memberikan kesan lembut di kulit. Hal ini kaena konsumen tidak hanya menghendaki

sabun

yang

berfungsi

sebagai

pembersih saja (Christiani, 2015). Humektan yang paling sering digunakan adalah gliserin, karena ia mampu memberikan kesan heavy dan tacky, yang biasanya sering digunakan dengan kombinasi humektan lainnya seperti sorbitol. Propilen glikol merupakan pilihan humektan dengan harga yang lebih murah dibandingkan gliserin, namun ia dapat menurunkan

56

viskositas larutan surfaktan dan

memicu adanya penekanan pada daya busa (Barel, O. A., Marc Paye., Howard, IMaibach,2009). c. Agen pengkhelat merupakan bahan yang dapat mengkhelat ion kalsium dan magnesium pada saat penggunaan dengan air sadah. Chelator agent yang biasanya digunakan adalah EDTA (Ghaim, 2001 dalam Christiani, 2015). d. Pengawet merupakan bahan yang digunakan untuk menjaga

sediaan

tahan

terhadap

mikroba

khususnya jamur, sehingga memperpanjang waktu paruh produk (Kristiyana, 2013). e. Pengharum digunakan

merupakan untuk

suatu

bahan

meningkatkan

yang

penerimaan

konsumen. Pengawet yang digunakan harus tidak mempengaruhi terhadap viskositas dan stabilitas sediaan, sehingga harus benar-benar diperhatikan kelarutan

dan

kompatibilitasnya

(Rieger,

2000dalam Kartika, 2010). f. Pewarna merupakan zat yang digunakan untuk memberikan warna yang menarik (Apgar, 2010). g. Antioksidan merupakan zat yang digunakan untuk mencegah bau tengik, contoh butil hidroksi anisol

57

(BHA) dan butil hidroksi toluen (BHT), vitamin E (Apgar, 2010). II.7.6

Sifat Fisik Sabun Cair a.

Organoleptis Kenampakan atau organoleptis suatu produk sangat penting, karena dapat mempengaruhi minat konsumen (Wijana, 2009). Organoleptis meliputi bentuk, warna, dan bau sediaan Menurut SNI, standar sabun cair yang ideal memiliki bentuk cair, serta bau dan warna yang khas (Irmayanti dkk, 2014).

b.

pH Nilai pH merupakan nilai yang menunjukan derajat keasaman suatu bahan (Nurhadi, 2012). pH dapat mempengaruhi daya adsorpsi kulit yang dapat berakibat pada iritasi kulit, dengan demikian produk sabun cair yang dibuat harus menyesuaikan pH kulit. Menurut Wasitaadmadja (1997) pH sabun cair yang dipersyaratkan oleh SNI adalah rentang 6-8 (Fadillah, 2014). Berdasarkan keterangan Buchmann (2001) dijelaskan bahwa jika sediaan sabun terlalu asam efeknya adalah mengiritasi kulit, sedangkan jika

58

terlalu

basa

dapat

menyebabkan

kulit

kering

(Christiani, 2015). Nilai pH menentukan kelayakan sabun untuk digunakan sebagai sabun mandi (Wijana dkk, 2009). c.

Viskositas Viskositas merupakan tahanan dari suatu cairan untuk mengalir, dimana semakin besar viskositas maka akan semakin besar pula tahanannya (Sinko, 2011). Menurut Shmitt (1996) viskositas merupakan salah satu parameter penting yang menunjukkan

stabilitas

produk

maupun

untuk

penanganan suatu produk kosmetik dan toiletries selama distribusi produk (Nurhadi, 2012). Viskositas sabun

cair

ikut

berpengaruh

terhadap

daya

penerimaan produk terhadap konsumen. Menurut Suryani (2000), adanya viskositas sediaan yang tinggi akan mengurangi frekuensi tumbukan antar partikel sehingga sediaan menjadi lebih stabil (Fadillah, 2015). d.

Daya Bersih Daya bersih merupakan sebuah analisa untuk mengetahui kemampuan sabun dalam mengangkat kotoran, sebagaimana fungsi sabun sendiri yakni 59

membersihkan kulit dari kotoran, debu, ataupun minyak (Purnamawati, 2006). e.

Daya Busa Daya busa yang dimaksud dalam sabun cair adalah banyaknya busa yang dihasilkan saat sabun cair tersebut dipakai (Wijana dkk, 2009). Busa adalah suatu dispersi koloid dimana gas terdispersi dalam fase kontinyu yang berupa cairan (Setyoningrum, 2010). Akibat adanya densitas yang signifikan antara gelembung dan medium cairan, maka sistem akan memisah menjadi dua lapisan dengan cepat dimana gelembung akan naik ke atas (Kartika, 2010). Adanya surfaktan akan mengurangi tegangan antarmuka gas dengan cairan sehingga dispersi gas dalam cairan akan terjadi dengan mudah (Tadros, 2005 dalam Christiani, 2015). Ketika gas masuk ke dalam surfaktan, maka surfaktan akan terabsorpsi pada antarmuka gas/ cairan dan terbentuk gelembung gas yang terselubungi oleh lapisan film atau disebut dengan busa. Busa yang terbentuk tersebut akan cenderung naik karena berat jenis gas lebih kecil daripada air. Surfaktan juga terdapat pada permukaan cairan sebagai lapisan yang membatasi air dan udara, sehingga busa yang

60

terbentuk tetap tertahan pada batas permukaan cairan (Exerowa and Kruglyakov, 1998 dalam Christiani, 2015). Pada sabun cair yang dievaluasi adalah seberapa cepat sabun tersebut membentuk busa dan kualitas busa. Kualitas, kuantitas, dan kecepatan pembentukan

busa

dibuat

dalam

skala

angka

(Setyoningrum, 2010).

II.8

Uji Aktivitas Antioksidan Dengan Metode DPPH DPPH ( 2,2 – difenil – 1 – pikrilhidrazil ) merupakan radikal bebas yang stabil pada suhu kamar dan sering diggunakan untuk menilai aktivitas antioksidan berupa senyawa atau ekstrak bahan alam. Interaksi antioksidan dengan DPPH baik secara transfer elektron atau radikal hidrogen pada DPPH akan menetralkan karakter radikal bebas dari DPPH (Rahmatika, 2017). Radikal bebas DPPH yang memiliki elektron tidak berpasangan

memberikan

warna

ungu.

Pengurangan

intesitas warna yang terjadi berhubungan dengan jumlah elaktron DPPH yang menangkap atom hidrogen. Sehingga pengurangan intensitas warna mengindikasikan peningkatan kemampuan antioksidan untuk menangkap radikal bebas.

61

Senyawa DPPH memberikan serapan kuat pada panjang gelombang 517 nm dengan warna ungu (Rahmatika, 2017).

Gambar II.11 Mekanisme Penghambatan Radikal DPPH Parameter

yang

dipakai

untuk

menunjukkan

aktivitas antioksidan adalah harga konsentrasi efisien atau efficient

concentration

(

EC50

)

atau

inhibitory

concentration ( IC50 ) yaitu konsentrasi suatu zat antioksidan

yang

dapat

menyebabkan

50%

DPPH

kehilangan karakter radikal atau konsentrasi suatu zat antioksidan yang memberikan persen peredaman sebesar 50%. Zat yang mempunyai antioksidan tinggi, akan mempunyai harga EC50 atau IC50 yang rendah. Suatu senyawa dikatakan memiliki aktivitas antioksidan yang sangat kuat jika nilai IC50 kurang dari 50 µL/mL, kuat jika nilai IC50 antara 50 – 100 µL/mL, sedang jika nilai IC50 antara 100 – 150 µL/mL, dan lemah jika nilai IC50 antara

62

151 – 200 µL/mL. Semakin kecil nilai IC50 semakin tinggi aktivitas antioksidan (Rahmatika, 2017). II.9

Spektrofotometer UV - Vis Spektrofotometer fotometer.

terdiri

Spektrofotometer

atas

spetrometer

menghasilkan

sinar

dan dari

spektrum dengan panjang gelombang tertentu dan fotometer adalah alat pengukur intensitas cahaya yang ditranmisikan atau yang diabsorpsi (Rahmatika, 2017). Spektrofotometri UV – Vis merupakan salah satu teknik analisis spektroskopi yang memakai sumber radiasi elektromagnetik ultraviolet dekat ( 190 – 380 ) dan sinar tampak ( 380 – 780 ) dengan memakai instrumen spektrofotometer. Spektrofotometri UV – Vis melibatkan energi elektronik yang cukup besar pada molekul yang dianalisis, sehingga spektrofotometri UV – Vis lebih banyak dipakai untuk analisis kuantitatif ketimbang kualitatif (Rahmatika, 2017). Prinsip kerja spektrofotometer berdasarkan hukum Lambert Beer, menyatakan hubungan linearitas antara konsentrasi sampel dengan energi absorbsi. Jika radiasi monokromatis melewati larutan mengandung zat yang dapat

63

menyerap, radiasi ini akan dipantulkan, diabsorbsi oleh zatnya, dan sisanya ditransmisikan (Rahmatika, 2017). Untuk

mendapatkan

hasil

pengukuran

yang

optimum, setiap komponen dari instrumen yang dipakai harus berfungsi dengan baik. Komponen – komponen spektrofotometri UV – Vis meliputi sumber sinar, monokromator, dan sistem optik (Rahmatika, 2017). a.

Sumber – Sumber Lampu Lampu deuterium digunakan untuk daerah UV pada

panjang gelombang dari 190 – 350 nm, sementara lampu halogenkuarsa atau lampu tungsten untuk daerah visible ( pada panjang gelombang antara 350 – 900 nm ). b.

Monokromator Digunakan untuk mendispersikan sinar ke dalam

komponen – komponen panjang gelombangnya yang selanjutnya akan dipilih oleh celah ( slit ). Monokromator berputar sedemikian rupa sehingga kisaran

panjang

gelombang dilewatkan pada sampel sebagai scan instrumen melewati spektrum. c.

Optik – Optik Dapat didesain untuk memecah sumber sinar

sehingga sumber sinar melewati 2 kompartemen dan sebagaimana dalam spektrofotometer berkas ganda ( double 64

beam ), suatu larutan blanko dapat digunakan dalam satu kompartemen untuk mengoreksi pembacaan atau spektrum sampel. Yang paling sering digunakan sebagai blanko dalam

spektrofotometri

adalah

semua

pelarut

yang

digunakan untuk melerutkan sampel atau pereaksi ( Gandjar dan Rohman, 2012 ).

II.10 1.

Deskripsi Bahan Vitamin C ( FI III, 1979 Hal. 47 ) Nama Resmi

: Acidum Ascorbicum

Nama Lain

: Asam Askorbat

Rumus Molekul

: C6H8O6

Berat Molekul

: 176,13

Pemerian

: serbuk atau hablur; putih atau agak kuning; tidak berbau; rasa asam. Oleh pengaruh cahaya lambat laun menjadi gelap. Dalam keadaan kering, mantap di

udara,

dalam

larutan

cepat

teroksidasi. Kelarutan

: mudah larut dalam air; agak sukar larut dalam etanol ( 95%) P; praktis tidak larut dalam kloroform P, dalam eter P dan dalam benzen P.

65

Penyimpanan

:

Dalam

wadah

tertutup

rapat,

terlindung dari cahaya. Khasiat 2.

: Antiskorbut

Minyak Zaitun ( FI III, 1979 Hal. 458 ) Minyak zaitun adalah minyak lemak yang diperoleh dengan pemerasan dingin biji masak Olea europoea L. Nama lain

: Oleum Olivae

Nama resmi

: Minyak Zaitun

Pemerian

: Cairan kuning pucat atau kuning kehijauan; bau lemah; tidak tengik; rasa khas. Pada suhu rendah sebagian atau seluruhnya membeku.

Kelarutan

: Sukar larut dalam etanol (95%) P; mudah larut dalam kloroform P, dalam eter P dan dalam eter minyak tanah P.

Penyimpanan

: Dalam wadah tertutup baik, terisi penuh.

Khasiat 3.

: Zat tambahan

HPMC (Hidroksipropil Metilselulosa) HPMC secara luas digunakan sebagai suatu eksipien di dalam formulasi pada sediaan topikal dan oral. Nama lain

: Hidroksipropil Metilselulosa

66

Rumus Kimia

: CH3CH(OH)CH2

Pemerian

:Serbuk berwarna putih krem, tidak berbau dan tidak berasa, serbuk yang stabil, meskipun bersifat higroskopis setelah pengeringan.

Kelarutan

: Larutan hidroksipropil metilselulosa larut dalam air dingin memiliki pH sebesar 5,5, praktis larut dalam air dingin, praktis tidak larut dalam kloroform, etanol, dan, eter, tetapi larut

dalam

diklormetan,

campuran

etanol-

metanil-diklormetan,

dan air-alkohol, campuran diklometan dan propanol.

5.

Penyimpanan

: Dalam wadah tertutup baik.

Khasiat

: Emulgator

KOH ( FI III, 1979 Hal. 689 ) Kalium

hidroksida

adalah

higroskopis

dan

diequwscent, pada paparan udara, dengan cepat menyerap karbon dioksida dengan air dengan pembentukan kalium karbonat. Nama Lain

: potassium hidrovida

Nama Kimia

: Kalium hidroksida

Struktur Kimia

:K–OH

67

Rumus Molekul

: KOH

Berat Molekul

: 56,11

Pemerian

: Massa berbentuk batang, pelet atau bongkahan,

putih,

sangat

mudah

meleleh basah. Kelarutan

: Larut dalam 1 bagian air, dalam 3 bagian etanol ( 95 % ) P, sangat mudah larut dalam etanol mutlak P mendidih.

pH

: 13,5

Penyimpanan

: Harus disimpan di kedap udara, wadah non logam ditempat sejuk dan kering.

6.

Gliserin ( FI III, 1979 Hal. 271 ) Nama Lain

: Glycerolum

Nama resmi

: Gliserol

Rumus Kimia

: C3H8O3

Berat Molekul

: 92,10

Pemerian

: Cairan seperti sirop; jernih tidak berwarna;

tidak

berbau;

manis

diikuti rasa hangat. Higroskopik. Jika disimpan beberapa lama pada suhu

68

rendah

dapat

memadat

membentuk

massa

hablur

tidak

berwarna yang tidak melebur hingga suhu mencapai lebih kurang 20O. Kelarutan

: Dapat campur dengan air, dan dengan etanol ( 95% ) P; praktis tidak larut dalam kloroform P. Dalam eter P dan dalam minyak lemak.

7.

Penyimpanan

: Dalam wadah tertutup baik.

Khasiat

: Zat tambahan.

BHT ( Butil hidroksi toluen) FI IV Hal.157 Pemerian

:Hablur padat, putih; bau khas lemah.

Kelarutan

:Praktis

tidak

larut

dalam

air,

gliserin, propilen glikol, asam – asam mineral dan larutan alkali; mudah larut dalam etanol, aseton, benzen dan paraffin liquid; lebih mudah larut dalam minyak – minyak makanan dan lemak. Penyimpanan

: Dalam wadah tertutup baik.

Khasiat

: Antioksidan untuk minyak – minyak dan lemak.

8.

Carbopol (Carbomer)

69

Nama Lain

:Carbopol

Nama Resmi

: Carbomer

Pemerian

: Cairan kental, tidak berwarna hingga kuning pucat, bau lemah mirip amoniak, higroskopik.

Kelarutan

: Mudah larut dalam air, dalam etanol ( 95% ) P, larut dalam kloroform P.

9.

Penyimpanan

: Dalam wadah tertutup rapat.

Khasiat

: Pengental

Purified Water Nama lain

: Purified Water

Nama resmi

: Air Murni

Pemerian

: Cairan jernih; tidak berwarna; tidak berbau.

Penyimpanan

: Dalam wadah tertutup baik.

Khasiat

: Pelarut

70

II.11

Kerangka Konsep

Variabel Independen

Variabel Dependen

Variasi konsentrasi ekstrak Buah Strawberry ( Fragaria x ananassa )

Evaluasi fisik krim meliputi :      

F1 konsentrasi 0,5 %

Uji Organoleptis Uji Tinggi Busa Uji Nilai pH Uji Bobot Jenis Uji Viskositas Uji Jumlah Asam Lemak Bebas

F2 konsentrasi 1 % F3 konsentrasi 2 %

II.12

Penelitian Relevan Terdapat beberapa penelitian relevan tentang buah strawberry diantaranya pembuatan sediaan krim buah strawberry sebagai antioksidan. Seluruh sediaan memiliki aktivitas antioksidan dengan nilai IC50 52.29 ppm dan 66.96 ppm serta tidak menyebabkan iritasi (Rival Ferdiansyah, Revika Rachmaniar, Haruman Kartamihardja, Elisabeth Meliana, 2016). Berdasarkan jurnal yang berjudul “Formulasi Dan Evaluasi Sabun Mandi Cair Dengan Ekstrak Tomat (Solanum

Lycopersicum

L.)

Sebagai

Antioksidan”.

Berdasarkan uji evaluasi yang telah dilakukan terhadap

71

sabun cair maka dapat disimpulkan bahwa formula dengan konsentrasi carbopol 6% adalah yang terbaik.(Agustina et al., 2017) Berdasarkan jurnal yang berjudul “Effects Of Temperature

On

The

Chemical

Composition

And

Antioxidant Activity Of Three Strawberry Cultivars”. Data yang diperoleh menunjukkan bahwa penyimpanan dingin adalah cara yang efektif untuk menjaga kualitas stroberi (Cordenunsi et al., 2005). Berdasarkan jurnal yang berjudul “Antioxidant Capacity And Antioxidants Of Strawberry, Blackberry, And Raspberry Leaves”. Kapasitas antioksidan infus daun stroberi (ditentukan dengan metode DPPH) lebih rendah daripada anggur merah dan infus teh, tetapi sebanding dengan kapasitas antioksidan dari anggur putih dan minuman buah (Buřičová, Andjelkovic dan Čermáková, 2011). II.16

Hipotesis Dari didapatkan mengandung

rumusan

masalah

hipotesis

yaitu

metabolit

dan

ekstrak

sekunder

yang

tinjauan buah

pustaka

strawberry

meliputi

tanin,

flavonoid, mono-seskuiterpena dan kuinon seluruh sediaan

72

memiliki aktivitas antioksidan dengan nilai IC50 52.29 ppm dan 66.96 ppm dan berdasarkan uji evaluasi yang telah dilakukan terhadap sabun cair maka dapat disimpulkan bahwa formula dengan konsentrasi carbopol 6% adalah yang terbaik.

73

BAB III METODOLOGI PENELITIAN III.1.

Rancangan Penelitian III.1.1

Jenis Penelitian Jenis penelitian ini adalah penelitian eksperimental Laboratorium yaitu dengan metode DPPH, menggunakan alat spektrofotometer UV – Vis untuk membuat formulasi antioksidan dari ekstrak etanol 96% buah strawberry ( Fragaria x ananassa ).

III.1.2

Objek Penelitian Objek penelitian ini adalah ekstrak etanol 96% buah strawberry (Fragaria x ananassa) yang akan diformulasikan menjadi 3 formulasi krim ekstrak buah strawberry dengan berbeda konsentrasi yaitu : 0,5%, 1%, dan 2%. Lalu dilakukan uji organoleptis, uji nilai pH, uji tinggi busa, uji viskositas, uji bobot jenis, dan uji jumlah asam lemak bebas.

III.1.3

Tempat Penelitian Pada Laboratorium

penelitian kosmetik,

ini

akan

Sekolah

dilaksanakan Tinggi

di

Farmasi

Muhammadiyah Tangerang yang beralamat Jl. Syech

74

Nawawi km 4 No. 13. Martagara, Kabupaten Tangerang, Banten. III.1.4

Waktu Penelitian Penelitian ini akan dilakukan pada bulan Februari 2019 hingga bulan April 2019.

III.2 Alat dan bahan penelitian III.2.1 Alat Penelitian Alat yang digunakan dalam penelitian ini antara lain : salah satu set alat destilasi, satu set alat freeze dryer, maserator, labu ukur, pipet ukur, pipet volume, lemari pendingin, piknometer, timbangan digital, beaker glass 100 ml (Iwaki Pyrex), pH meter (Hanna@), gelas ukur, erlenmeyer, pipet tetes, cawan penguap, kaca arloji, lumpang dan stanper, spatel, spektrofotometer UV – Vis (Hitachi), wadah sabun cair. III.2.2 Bahan Penelitian Bahan yang digunakan dalam penelitian ini yaitu buah strawberry segar, etanol 96%, vitamin C, minyak zaitun, KOH, HPMC, Carbopol, Gliserin, BHT, Purified Water, serbuk DPPH. Semua bahan kimia berderajat pro – analisis.

75

III.3 Variabel Penelitian III.3.1 Variabel Bebas Variabel yang menjadi sebab timbulnya atau berubahnya variabel terikat. Pada penelitian ini yang akan menjadi variabel bebas adalah variasi konsentrasi ekstrak etanol 96% buah strawberry ( Fragaria x ananassa ). III.3.2 Variabel Terikat Variabel terikat adalah variabel yang dipengaruhi atau menjadi akibat karena adanya variabel bebas. Variabel terikat dalam penelitian ini adalah sifat fisik ( uji organoleptis, tinggi busa, bobot jenis, viskositas, uji nilai pH, dan jumlah asam lemak bebas. III.3.3Variabel terkendali Yang menjadi variabel terkendali yaitu buah strawberry yang sudah matang, ditandai dengan warna merah buah yang sudah merata tetapi konsistensi buah tidak lunak atau lembek. Serta cara pembuatan sediaan sabun mandi cair. III.4 Prosedur Penelitian III.4.1 Pengajuan Judul

76

Langkah pertama yang akan dilakukan dalam penelitian ini

yaitu dengan melakukan permohonan

pengajuan judul penelitian kepada institusi pendidikan di Sekolah

Tinggi

Farmasi

Muhammadiyah

Tangerang.

Penelitian ini akan dilakukan pada bulan Desember 2018 hingga bulan Maret 2019. III.4.2 Studi Literatur Sebelum dilakukan pembuatan proposal penelitian harus melakukan studi literature terlebih dahulu yang berguna untuk mendukung penelitian ini. Studi literature yang dilakukan peneliti mencari literature dan buku – buku serta jurnal – jurnal yang mendukung penelitian. III.4.3 Pembuatan Proposal Pembuatan proposal dilakukan dengan melakukan bimbingan kepada dosen pembimbing dan melakukan pencarian literature – literatur yang mendukung penelitian ini. Penyusunan proposal dimulai dengan menyusun latar belakang, rumusan masalah dijadikan sebagai landasan dalam pembuatan kerangka konsep, selanjutnya dibuat sebuah hipotesis mengenai penelitian yang akan dilakukan. Tahap selanjutnya menyusun tinjauan pustaka yang diambil dari berbagai sumber yang akurat.

77

Tahap berikutnya menyusun metodelogi penelitian yang meliputi rancangan penelitian, alat dan bahan, prosedur kerja, teknik pengumpulan data, teknik analisis data dan jadwal penelitian. Rancangan penelitian meliputi jenis penelitian yang akan dilakukan, tepat dari jadwal penelitian. Alat dan bahan meliputi semua alat dan bahan yang akan digunakan pada penelitian yang akan dilakukan, prosedur kerja meliputi semua proses yang dilakukan dari awal penelitian hingga selesai. Teknik pengumpulan data dan analisis data disusun sesuai dengan jenis penelitian yang akan dilakukan. Semua referensi yang digunakan dalam penyusunan proposal dicantumkan dalam daftar pustaka. Pembuatan proposal disusun dari tanggal 01 Oktober sampai tanggal 15 Desember 2018. III.4.4 Pengajuan Izin Penelitian Pengajuan peneliti

izin

melakukan

penelitian

penelitian.

dilakukan Sebelum

sebelum

melakukan

penelitian harus meminta izin kepada pihak kampus untuk melakukan penelitian di Kampus Sekolah Tinggi Farmasi Muhammadiyah Tangerang. III.5 Cara Kerja Penelitian III.5.1 Pengambilan Sampel

78

Sampel yang akan digunakan pada penelitian ini adalah buah strawberry yang akan diambil dari Puncak, Bogor. Jawa Barat. III.5.2 Determinasi Tumbuhan Deteminasi tumbuhan dilakukan di Herbarium Bogoriense,

Bidang

Botani

Pusat

Penelitian

dan

Pengembangan Biologi – Lipi Cibinong, Jl. Raya Jakarta – Bogor KM 46 Cibinong Bogor, 16911 – Jawa barat. Determinasi

dilakukan

untuk

memastikan

kebenaran

simplisia yang digunakan. III.5.3 Pengolahan Sampel Sampel buah strawberry dikumpulkan sebanyak 8 kg. Sampel buah strawberry diambil pada pagi hari. Lalu diambil dan dipisahkan dari tangkai kemudian sampel dibersihkan dari sisa – sisa kotoran ( sortasi basah ), dengan cara dicuci menggunakan air mengalir sampai bersih. Setelah itu sampel dikeringkan. Pengeringan bertujuan untuk menurunkan kadar air dalam bahan sehingga mikroorganisme penyebab kerusakan bahan tidak tumbuh.

79

III.5.4 Skrinning Fitokimia Penapisan fitokimia dilakukan untuk mengetahui kandungan metabolit sekunder yang terdapat pada tanaman strawberry.

Pengujian

penapisan

fitokimia

meliputi

flavonoid, monoterpen, seiskuiterpen, steroid, triterpenoid, kuinon, dan saponin ( Farnsworth,1996 ). a.

Identifikasi Flavonoid Sebanyak 0,5

gram

ekstrak buah strawberry

ditambahkan dengan 100 ml aquadest, didihkan selama 5 menit, kemudian disaring. Diambil 5 ml, kemudian ditambahkan 0,1 g serbuk Mg dan 1 ml HCI pekat dan 5 ml amil alkohol. Kemudian dikocok dan dibiarkan memisah. Bila terbentuk warna merah, kuning atau jingga pada lapisan amil alkohol menunjukkan adanya senyawa flavonoid ( Djamil dan Wijiastuti, 2015; Syamsul dkk., 2015 ). b.

Identifikasi Steroid Sebanyak 0,5

gram

ekstrak buah strawberry

dilarutkan dalam 2 ml etanol 70%, kemudian dihomogenkan, ditambahkan 2 ml kloroform dan diteteskan 2 ml H2SO4 pekat perlahan di sisi dinding tabung reaksi. Adanya steroid ditunjukkan dengan

80

terbentuknya

cincin

merah

(

Mandal

dan

Ghasal,2012 ). c.

Identifikasi Triterpenoid Sebanyak 0,5 gram buah strawberry dilarutkan dalam 2 ml etanol 70%, kemudian dihomogenkan, ditambahkan 1 ml kloroform dan 1 ml asetat anhidrat lalu didinginkan. Kemudian ditambahkan dengan

H2SO4

pekat.

Adanya

triterpenoid

ditunjukkan dengan warna kemerahan ( Mandal dan Ghasal,2012 ). d.

Identifikasi Saponin Diambil 10 ml filtrat larutan pada identifikasi flavonoid dimasukkan ke dalam tabung reaksi, kemudian dikocok kuat secara vertikal selama 10 menit. Diamati terbentuknya busa yang stabil 1- 10 cm dalam waktu 10 menit dan tidak hilang setelah ditambahkan 1 tetes HCI 1% menunjukkan adanya saponin ( Djamil dan Wijiastuti, 2015 ).

e.

Identifikasi Tanin Sebanyak 0,5

gram

ekstrak

buah strawberry

ditambahkan dengan 100 ml aquadest, didihkan selama 15 menit, kemudian didinginkan dan disaring menggunakan kertas saring. Filtrat yang diperoleh

81

diambil 30 ml, ditambahkan beberapa tetes besi ( III ) klorida 1% terbentuknya warna biru tua atau hijau kehitam – hitaman menununjukkan adanya senyawa tanin ( Djamil dan Wijiastuti, 2015 ). III.5.5 Pembuatan Ekstrak Buah Strawberry Dalam penelitian ini proses ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi atau perendaman. Tujuan dalam pemilihan metode maserasi yaitu karena cara pengerjaan dan peralatan yang digunakan sederhana dan tidak merusak senyawa yang tidak tahan panas. Sebanyak 800 gram buah segar strawberry yang telah dicuci bersih dihaluskan dengan menggunakan pelarut etanol 96% secukupnya. Buah yang talah dihaluskan, kemudian dimasukkan ke dalam maserator dan diekstraksi dengan cara maserasi menggunakan pelarut etanol 96% selama 24 jam pada suhu kamar. Setelah itu, bahan yang telah dimaserasi disaring, diperoleh maserat etanol. Proses ini dilakukan dengan tiga kali pengulangan. Maserat yang diperoleh disimpan dalam wadah yang kemudian dipekatkan dengan menggunakan freeze dryer hingga diperoleh ekstrak kental buah strawberry. Setelah itu ekstrak ditimbang dan disimpan dalam wadah tertutup sebelum digunakan untuk pengujian.

82

5.

Formulasi Sabun Cair Adapun formulasi sabun cair yang digunakan dalam penelitian diambil formula dari jurnal yang berjudul “Uji Efektifitas Antibakteri Sediaan Sabun Mandi Cair Minyak Atsiri Kulit Buah Jeruk Pontianak (2014). Tabel III.1 : Formulasi Sediaan Krim Ekstrak Buah Strawberry Yang Dibuat Berbagai Konsentrasi 0,5 %, 1 %, dan 2 %.

Bahan

Kegunaan

Formula krim antioksidan ( % ) FI

Ekstrak

F II

F III

F IV

FV

(+)

(-)

Zat aktif

0,5

1

2

-

-

Vitamin C

Pembanding

-

-

-

0,5

-

Carbopol

Pengental

4

5

6

-

-

Minyak

Zat Tambahan

28,8

28,8

28,8

28,8

28,8

Gliserin

Pelembab

15

15

15

15

15

KOH

Alkali

5,15

5,15

5,15

5,15

5,15

HPMC

Emulgator

3

3

3

3

3

BHT

Antioksidan

0,02

0,02

0,02

0,02

0,02

Purified

Pelarut

100

100

100

100

100

Buah Strawberry

Zaitun

Water

III.5.6 Cara Pembuatan Sabun Mandi Cair Alat dan bahan yang digunakan disiapkan terlebih dahulu. Masing – masing bahan ditimbang sesuai dengan 83

perhitungan. Masukkan minyak zaitun kedalam gelas kimia, kemudian tambahkan KOH sedikit demi sedikit sambil terus dipanaskan pada suhu 60-70OC hingga terbentuk pasta, lalu dimasukkan asam stearat yang telah dilelehkan diatas penangas air diaduk hingga homogen, kemudian masukkan BHT, masukkan HPMC yang telah dikembangkan dalam akuades panas, diaduk hingga homogen, tambahkan gliserin aduk hingga homogen, masukkan ekstrak buah strawberry dan aduk hingga homogen. Tambahkan akuades hingga 100 ml. Lalu diaduk hingga homogen dan masukkan kedalam wadah bersih yang telah diasiapkan. III.5.7 Uji Evaluasi Fisik Sabun Mandi Cair a.

Uji Organoleptisk Uji Organoleptik yang dilakukan merupakan uji fisik

dari sabun mandi cair meliputi warna, bau, dan bentuk. b.

Uji pH Uji pH dilakukan dengan menggunakan alat pH

meter. c.

Kadar asam lemak bebas Sampel

dimasukkan

ke

dalam

erlenmeyer.

Tambahkan alkohol netral, lalu didih, dan 10 tetes

84

phenolphtalein. Panaskan diatas penangas air memakai pendingin tegak selama 30 menit, kemudian dititar dengan larutan KOH 0,1 N dalam alkohol sampai timbul warna merah. d.

Uji Viskositas Sampel diukur dengan menggunakan viskometer

Brookfield menggunakan spindel nomor 3. e.

Tinggi Busa Sabun

dimasukkan

ke

dalam

tabung

reaksi,

kemudian masukkan akuades, dikocok dengan membolak – balikkantabung reaksi, lalu ukur tinggi busa yang dihasilkan dan diamkan 5 mneit, kemudian amati tinggi busa yang dihasilkan setelah 5 menit. Pengujian

iritasi

dilakukan

kepada

kelinci

percobaan, dengan mengoleskan krim ekstrak strawberry pada kulit punggung kelinci yang telah dicukur terlebih dahulu. Menurut metode Draize ( Hayes, 2001 ) pengamatan dilakukan dengan memperhatikan 2 parameter yaitu eritema ( kemerahan pada kulit ) dan udema ( adanya bengkak ).

85

f.

Bobot Jenis Pengujian bobot jenis menggunakan piknometer.

III.5.8 Pengujian sabun cair antioksidan a.

Pembuatan Larutan DPPH Ditimbang DPPH ( 2,2- Difenyl – 1- pycryhydrazil )

sebanyak 10 mg kemudian dilarutkan dalam etanol p.a dengan menggunakan labu ukur 100 ml, sebagai larutan stock. Untuk konsentrasi 5 ppm, dipipet larutan DPPH sebanyak 0,5 ml kemudian dicukupkan volumenya dengan etanol p.a hingga 10 ml dan diamati absorbansinya pada spektrofotometer. Hal yang sama dilakukan untuk masing – masing konsentrasi 10 ppm, 15 ppm, 20 ppm, dan 25 ppm. b.

Uji Larutan Kontrol Timbang 10 mg vitamin C, lalu dilarutkan etanol p.a

sampai 10 ml dan larutan stock 100 µg/ml dengan perbandingan konsentrasi 100 µl, 500 µl, 1000 µl, 1250 µl. Panjang maksimum yang digunakan untuk vitamin c adalah 516 nm. c.

Pengukuran

Panjang

Gelombang

Maksimum

Larutan DPPH Timbang 10 mg DPPH, larutkan dengan etanol p.a sampai 100 ml, kemudian larutan DPPH 100 ml diambil 3,5 ml

86

larutan DPPH, kemudian masukkan ke dalam labu ukur 10 ml etanol p.a. Larutan ini kemudian dipindahkan dalam wadah gelas coklat dan didiamkan selama 30 menit pada suhu 37OC dan amati absorbansinya pada panjang gelombang 400 – 800 nm. Panjang gelombang yang memberikan nilai absorbansi paling besar di tetapkan sebagai panjang gelombang maksimum DPPH. d.

Pengukuran Serapan Blanko DPPH Diambil 1 ml larutan hingga 5 ml etanol p.a dalam

labu ukur 5 ml kemudian didiamkan selama 30 menit dan diukur absorbansinya pada panjang gelombang 516 nm. e.

Uji Aktivitas Sabun Cair Ekstrak Buah Strawberry Terhadap DPPH Sampel sabun cair sebanyak 2,5 gram dimasukkan

dalam lumpang, kemudian ditambahkan etanol p.a 5 ml. Selanjutnya dilakukan pemusingan pada sentrifuge selama 10 menit, lalu disaring dengan kertas saring hingga jernih. Filtrat kemudian dimasukkan dalam labu ukur 10 ml, ditambahkan

2

ml

larutan

DPPH

dan

dicukupkan

volumenya dengan etanol p.a hingga 10 ml, diinkubasi pada suhu 37OC selama 30 menit, dimasukkan dalam kuvet, kemudian diukur serapannya pada UV – Vis panjang

87

gelombang 516 nm. Dihitung persen peredaman yang menggunakan rumus : % peredaman serapan kontrol – serapan sampel

x 100%

Serapan kontrol f.

Perhitungan Nilai IC50 Persentase

inhibisi

adalah

persentase

yang

menunjukkan aktivitas radikal tersebut.perhitungan nilai % inhibisi dapat menggunakan rumus sebagai berikut : ( Sahu dkk., 2013 ). % Inhibisi = Ac – As x 100% Ac Keterangan : Ac = Nilai absorbansi blanko As = Nilai absorbansi sampel Konsentrasi sampel dan % inhibisi diplotkan masing – masing pada sumbu x dan y untuk mendapatkan persamaan regresi linear. Persamaan tersebut digunakan untuk menentukan nilai IC50. Nilai IC50 merupakan konsentrasi efektif yang dibutuhkan untuk mereduksi 50% dari total DPPH. Dihitung dengan menggunakan persamaan

88

regresi linear, konsentrasi sampel sebagai sumbu x dan nilai 50 sebagai sumbu y ( Tristiantini dkk., 2013 ). III.7

Teknik Analisis Data Nilai

AAI

dapat

ditentukan

dengan

cara

konsentrasi DPPH yang digunakan dalam uji ( ppm ) dibagi dengan nilai IC50 yang diperoleh ( ppm ). Nilai AAI <0,5 menandakan aktivitas antioksidan lemah, AAI >0,5 – 1 menandakan aktivitas antioksidan sedang, AAI >1-2 menandakan aktivitas antioksidan kuat, dan AAI >2 menandakan aktivitas antioksidan sangat kuat ( Scherer dan Godoy, 2009 ). III. 8

Analisis Data Data dari suatu hipotesis jika nilai IC50 memiliki <50 ppm berarti termasuk kriteria sangat kuat. Dan hasil pengujian dilakukan dengan metode regresi linier.

89

III.9

Skema Rencana Kerja

Determinasi Buah Strawberry ( Fragaria x ananassa), di LIPPI – Biologi, Cibinong Bogor

Pembuatan Simplisia

Pembuatan Ekstrak dengan metode maserasi CoA ( certification of Analysis ) III. 11 Rencana Penelitian Ekstrak cair

Ekstrak kental buah strawberry

Ekstrak kering

Formulasi sediaan sabun cair

Formula I

Formula II

Formula III

0,5 %

1%

2%

Uji evaluasi sediaan sabun cair meliputi Organoleptik, pH, kadar asam lemak bebas, tinggi busa, viskositas, dan bobot jenis.

Uji DPPH

Analisis Data 90

Tabel III.12 Rencana Penelitian Januari Penyusunan proposal

√

Observasi + Orientasi

√

Februari April

Pengambilan data

√

Pengolahan data

√

Penyusunan pembahasan

√

Kseimpulan

√

Sidang tertutup ( pendadaran )

Mei

√

91

DAFTAR PUSTAKA Agustina, L. et al. (2017) “Formulasi dan Evaluasi Sabun Mandi Cair dengan Ekstrak Tomat ( Solanum Lycopersicum L .) sebagai Antioksidan Formulation and Evaluation of Herbal Liquid Soap Containing Tomatoes ( Solanum lycopersicum L .) as Antioxidants,” jurnal ilmiah farmasi, 4, hal. 1–7. Buřičová, L., Andjelkovic, M. dan Čermáková, A. (2011) “Antioxidant Capacity and Antioxidants of Strawberry , Blackberry , and Raspberry Leaves,” jurnal ilmiah farmasi, 29(2), hal. 181–189. Cordenunsi, B. R. et al. (2005) “Food Chemistry Effects of temperature on the chemical composition and antioxidant activity of three strawberry cultivars,” jurnal ilmiah farmasi, 91, hal. 113–121. doi: 10.1016/j.foodchem.2004.05.054. Deni Anggraini, Armon Fernando, N. E. (2017) “FORMULATION OF ANTIOXIDANT LOTION STRAWBERRY (Fragaria Ananassa) FRUIT EXTRACT,” jurnal ilmiah farmasi, 14(02), hal. 1–9. Hangga Damai Putra Gandasasmita (2009) “PEMANFAATAN KITOSAN DAN KARAGENAN PADA PRODUK SABUN CAIR,” jurnal ilmiah farmasi, hal. 36–38. Inggrid, M. (2015) “Disusun Oleh :,” AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DAN SENYAWA BIOAKTIF DALAM BUAH STROBERI. Parahyangan: Lembaga Penelitian dan Pengabdian kepada Masyarakat Universitas Katolik Parahyangan, hal. 1–62. Kasenda, jessica ch, Paulina, Y. V. Y. dan lolo astuty, W. (2016) “CAIR EKSTRAK ETANOL DAUN EKOR KUCING ( Acalypha hispida Burm . F ) TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI Staphylococcus aureus,” PHARMACONJurnal Ilmiah Farmasi, 5(3), hal. 40–47. Prianingrum, E. D. (2006) “EFEK ANTI INFLAMASI EKSTRAK ETANOL DAUN SENGGANI (Melastoma polyanthum Bl.) PADA MENCIT PUTIH BETINA,” jurnal ilmiah farmasi, hal. 1–143. Prof.Dr. Ir. Kesuma Sayuti, MS Dr. Ir. Rina Yenrina, Ms. (2015) ANTIOKSIDAN ALAMI dan SINTETIK. 1 ed. Diedit oleh D. F. S. Y. Padang: Tuty Anggraini, STP, MP, Ph D. Rahayu, P., Agustina, L. dan Tjandrawinata, R. R. (2017) “Tacorin , an extract from Ananas comosus stem , stimulates wound healing by modulating the expression of tumor necrosis factor a , transforming growth factor b and matrix metalloproteinase 2,” jurnal ilmiah farmasi, 7, hal. 1–9. doi: 10.1002/22115463.12241. Rahmatika, A. (2017) “FORMULASI DAN UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN SEDIAAN KRIM EKSTRAK ETANOL 70% DAUN ASHITABA (Angelica

88

keiskei Koidz) DENGAN SETIL ALKOHOL SEBAGAI STIFFENING AGENT.” jakarta: FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN PROGRAM STUDI FARMASI, hal. 1–105. Recsanti, D. (2009) “PENGARUH PEMBERIAN JUS STROBERI TERHADAP KERUSAKAN HISTOLOGIS HEPATOSIT MENCIT AKIBAT PEMBERIAN ASETAMINOFEN.” Surakarta: FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS SEBELAS MARET, hal. 1–57. RI, D. K. dan DIREKTORAT (2000) PARAMETER STANDAR UMUM EKSTRAK TUMBUHAN OBAT. 1 ed. Jakarta: DEPARTEMEN KESEHATAN RI DIREKTORAT JENDERA,L PENGAWASA.N OBAT DAN MAKANAN DIREKTORAT PENGAWASAN OBAT TRADISIONAL. Rika Yulianti, Damas Anjar Nugraha, L. N. (2015) “FORMULASI SEDIAAN SABUN MANDI CAIR EKSTRAK DAUN KUMIS KUCING (Orthosiphon aristatus (Bl) Miq.),” jurnal ilmiah farmasi, (2), hal. 1–11. Rival Ferdiansyah, Revika Rachmaniar, Haruman Kartamihardja, Elisabeth Meliana, N. N. S. (2016) “FORMULASI KRIM SARI BUAH STROBERI (Fragaria X ananassa D.) SEBAGAI ANTIOKSIDAN,” jurnal ilmiah farmasi, 5, hal. 1–13. Umar, I. (2014) “FORMULASI DAN UJI EFEKTIVITAS ANTIOKSIDAN KRIM EKSTRAK ETANOL DAUN BOTTO’-BOTTO’ (Chromolaena odorata L.) dengan METODE DPPH.” Makassar: FAKULTAS ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS ISLAM NEGERI ALAUDDIN MAKASSAR, hal. 1–78. Utama, R. F. (2017) “FORMULASI DAN UJI EFEK ANTI – AGING DARI KRIM MENGANDUNG EKSTRAK KULIT BUAH JERUK NIPIS (Citrus aurantifolia (Christm. & Panzer) Swingle).” Medan: PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN, hal. 1–115.

89