Primer Informe Laboratorio. Aas.docx

Universidad Católica del Norte Facultad de Ciencias Departamento de Ciencias Farmacéuticas Laboratorio de Toxicología

Cuantificación de AAS en orina por espectrofotometría Uv-visible Informe de Laboratorio Toxicología 2017 Nicolás Correa Bravo [email protected] Paulina Valderrama Araya [email protected]

Introducción La toxicología analítica es uno de los campos fundamentales de la toxicología, pues en cualquiera de las ramas de ésta, se deben utilizar los métodos de análisis químicos, entre otros. Se puede definir la Toxicología Analítica como la aplicación de los instrumentos de la Química Analítica a la estimación cualitativa o cuantitativa de sustancias químicas que pueden ejercer efectos adversos sobre organismos vivos. En general, la sustancia química que se determina (analito) es un xenobiótico que puede haber quedado alterado o transformado por acciones metabólicas del organismo. Para esto, se pueden utilizar muestras de diversos tipos: orina, sangre, cabello, contenido gástrico, etc. En este caso, la muestra a utilizar será orina, lo cual tiene una serie de ventajas, como por ejemplo: que no contiene proteínas (lo que se traduce en menores interesencias en el análisis), la cantidad de muestra que se puede obtener es alta y su conservación es sencilla[1]. Por otro lado, el analito para este práctico será el ácido acetil salicílico (véase Figura N°1), fármaco utilizado por sus efectos: antipirético, analgésico, antiinflamatorio y antiagregante plaquetario[2].

. Figura N°1. Estructura química del ácido 2acetoxibenzoico o ácido acetil salicílico[3].

Actualmente, a pesar del desarrollo de numerosos compuestos farmacológicos, el ácido acetil salicílico (o Aspirina) continúa siendo el AINES de mayor consumo a nivel mundial. Además, se encuentra en numerosas preparaciones de fácil acceso, por lo que su potencial abuso y toxicidad grave son altos y generalmente subestimados, ya que no suele ser reconocida oportunamente[4]. En el siguiente práctico se determinará la presencia de salicilatos en una muestra de orina a través del método de Trinder, una técnica de tipo cualitativa y rápida que suele ser utilizada en muestras de orina cuando existe la sospecha de intoxicación por salicilatos, ya que la asociación de éstos compuestos con iones férricos forman un complejo de color violeta de salicilato férrico, el cual puede ser medido y cuantificado por medio de análisis colorimétricos (como lo es la espectrofotometría de uv-visible) a 540 nm aproximadamente[5] Resultados y discusión Primeramente, se adicionó a una muestra de orina el reactivo de Trinder con la finalidad de identificar salicilatos en la muestra. El resultado de éste fue un viraje de la muestra a color violeta, traduciéndose en un resultado positivo para la presencia de salicilatos. Para la determinación de la concentración se realizó un análisis de la muestra (por duplicado) mediante espectrofotometría uv-

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visible. La determinación de las absorbancias por ésta técnica permitió interpolar la misma en la ecuación de la recta obtenida mediante la curva de calibración (véase anexo N°1) y así obtener la concentración de los salicilatos en la muestra. Los resultados se muestran a continuación en la tabla N°1. Muestra 1 Muestra 2 Absorbancia 0,597 0,732 Concentración 384,11 474,23 Tabla N° 1. Absorbancia y concentraciones (µg/mL) obtenidas de las muestras problema por duplicado. De lo anterior podemos decir que la muestra N°1 quedó dentro de la curva de calibrado, por lo que fue posible llevar a cabo el práctico y se logró determinar concentración de ésta. Sin embargo, al observar la absorbancia de la muestra 2, se nota un aumento de ésta, la cual está por sobre los valores utilizados para la curva de calibración y por tanto fue imposible interpolar la absorbancia de muestra 2 en la ecuación de la recta, dejándola fuera de todo análisis. Respecto a lo anterior se desprende que, a pesar de que el tratamiento y condiciones para el análisis de ambas muestras fue el mismo, la dilución y homogeneización de la muestra 2 no se llevó a cabo de forma correcta, ya que se fue adicionando agua destilada directamente a la cubeta (o celda de la muestra) para diluir y al no quedar bien homogeneizada, el haz de luz incidente pudo atravesar zonas de mayor concentración, dando como resultado una absorbancia elevada y por consiguiente, una concentración fuera de rango.

Por otro lado, se puede concluir que los niveles séricos de salicilatos están por sobre los valores normales (120 mg/dL) y por ende se infiere que el paciente se encontraba cursando una intoxicación Sin embargo, se siguiere repetir la experiencia con el fin de no incurrir en los errores ya mencionados y así obtener resultados más certeros. Referencias 1. Flanagan R, Taylor A, Watson I, Whelpton R. Fundamentals of Analytical Toxicology. John Wiley & Sons, editor. 2008. 544 p 2. Florez J. Farmacología humana. Sexta ed.

Armijo AJ, editor.: Elsevier. 3. Raimund R. Pohl P. ChemBioDraw Ultra 12. 2012 4. Chaverri R, Arce I, Valverde A. Intoxicación

aguda por AAS. Parte 1: farmacología y fisiopatología. Revista Clínica de la escuela de medicina UCR - HSJD. 2016; 1(1). 5. Gutierrez JL. Compuestos orgánicos fijos: evaluación de residuos [Documento].; 2011 [cited 2017 Abril 25. Available from: http://documents.mx/documents/tof557201 664979599169a17cc3.html.

Trabajando con la muestra 1 se obtuvo una concentración de 384,11 µg/mL. Estos corresponden a la concentración de la muestra diluida, por tanto, para obtener la concentración real se multiplicó por el factor de dilución (Fd = 4), dándonos un valor final de concentración sérica de salicilatos de 1536,44 µg/mL o 153,64 mg/dL. Conclusiones Se pudo concluir que, la utilización del reactivo de Trinder y espectrofotometría de UV visible (métodos cualitativos y cuantitativos respectivamente) es eficaz para la determinación de estados de intoxicación por salicilatos.

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