الخلايا البكتيرية

‫‪Traduit par Mlle Benarib R. : [email protected]‬‬ ‫الفصل ‪ :2‬البكتيريا النموذجية عبارة عن كائنات دقيقة أحادية الخلية‪ ،‬منعدمة النواة و حجم جينتها اقل من‬ ‫الخاليا الحية‪.‬‬ ‫تنقسم البكتيريا الى بكتيريا حقيقية "‪ "Eubactérie‬و بكتيريا عديمة النواة " ‪."Achaebactérie‬‬ ‫‪ 1.2‬تقنيات الترصد المصدري الخلية البكتيرية‬ ‫ترصد الخلية‪ :‬ترك االستخدام االول للمجهر من طرف أ‪ .‬فان لوين هوك أثرا على بداية علم االحياء و‬ ‫المكروبات‪ .‬منذ ذلك الحين‪ ،‬تم تطوير هذا الجهاز مع حجم يصل الى ‪ . x2500‬و قد تالحظ بنى الترتيب‬ ‫ذات ‪ 1‬ميكرومتر‪.‬‬ ‫نميز بذلك‪ :‬الترصد بين كال شريحتي العينتين المستعملتين في الترصد المجهري شكل و حركة ( ‪à l'état‬‬ ‫‪ )frais‬البكتيريا في الوسط السائل و تنوعه‪ ،‬تلوين بالحبر الصيني‪ ،‬من اجل الكشف عن الكبسولة‪.‬‬ ‫تتعلق الكبسوالت بوهج واضح محيطا االجسام البكتيرية باللون االسود‪.‬‬

‫التلوين بالحبر الصيني‬

‫ترصد‬

‫الحركة و الشكل‬

‫رصد اللطخات الجافة و الثابتة و الملونة‬ ‫يسمح تلوين الغرام و زياهيل نيلسن بمعرفة البكتيريا المسببة للمرض‪ ،‬و اخرى تظهر االهداب و السياط‬ ‫و االبواغ‪...‬‬ ‫يتم رصد اللطخات في االنغمار قطرات الزيت الخاص بين الهدف و التحضير مما يساعد على الحصول‬ ‫على صورة واضحة و صافية‪.‬‬ ‫تعتبر هذه المناهج جزءا من المجهر الضوئي (استخدام االشعة الضوئية)‪.‬‬ ‫لرصد بنى الترتيب ذو ‪ 5‬نم الى ‪10‬نم نستعمل المجهر االلكتروني‪.‬‬ ‫بامكان بعض البنى ان تحتجز او تسمح للبكتيريا بالعبور‪ .‬تحتاج هذه المقاربة او غير ذلك الى تثبيت‬ ‫العينة‪.‬‬

‫(ب)‬

‫(أ)‬

‫‪Traduit par Mlle Benarib R. : [email protected]‬‬ ‫أ‪ -‬الترصد بالمجهر االلكتروني للفيبرون الكوليا تواصال مع الزغابات المعوية‪.‬‬ ‫ب‪ -‬العنقوديات الذهبية تحت ال مجهر االلكتروني الماسح‪ ،‬الذي يسمح بالحصول على الصور "في‬ ‫الضوء" ثالثية االبعاد حول الخلية البكتيرية‪.‬‬ ‫في األخير‪ ،‬تسمح مناهج المناعة الخلوية الكيميائية بالتموضع في خلية الجزيئات البكتيرية‪ .‬يتم استعمال‬ ‫االجسام المضادة التي تتميز بها االنزيمات المؤكسدة‪ ،‬البيوتين او الجزيئات الفلورية مثل فليوريسين‪.‬‬ ‫يسمح التكوين المعقد المستقر لالجسام المضادة و المسببة للمرض بتحديد وجود الجزيء في الخلية‪.‬‬

‫(ب)‬

‫(أ)‬

‫أ‪ -‬منهج المناعة الخلوي الكيميائي المباشر و غير المباشر‬ ‫ب‪ -‬اجتياح الخلية الظهارية عن طريق الشيغيال فلينكسري‪.‬‬ ‫تتأثر الخاليا هيال بشيغيال المحللة بواسطة منهج المناعة الخلوي الكيميائي‪ ،‬أزرق‪ :‬ف‪-‬أكتان‪ ،‬أخضر‪:‬‬ ‫المتضمن في االجتياح‪.‬‬ ‫البكتيريا‪ ،‬األحمر‪ :‬البروتين البكتيري المختبئ و‬ ‫َ‬ ‫انفصال المكونات الخلوية‪:‬‬ ‫يتم استعمال جهاز الطرد المركزي على مكون الكثافة (مكون السكر القصب) من اجل الفصل مختلف‬ ‫العُضيات الخلوية‪.‬‬ ‫و ينبغي فتح االغلفة الغشائية المختلفة‪ ،‬الجدار‪ ...‬الخ من اجل اتمام هذه العملية‪.‬‬ ‫وهناك عدة مناهج لذلك‪:‬‬ ‫ الموجات ما فوق الصوتية‬‫ االنزيمات‪ :‬الليزوزيم الذي يهدم الجدار البكتيري‬‫ الضغط التناضحي‪ :‬بعد المعالجة بالليزوزيم توضع البكتيريا في وسط منقوص الضغط فتنتفخ و تنفجر‪.‬‬‫الضغط اآللي أو طاحونة الكرات زجاجية من اجل هدم الجدار و الغشاء‪.‬‬ ‫التبريد بدوائر التبريد المتعددة و اذابة الجليد المتعاقبة‪.‬‬ ‫التكوين الكيميائي للبكتيريا‪ :‬يمكن الحصول على الغلوكسيد و الدهون و البروتينات و االحماض النووية‪.‬‬ ‫نستعمل االنزيمات مثل البيبتيد الداخلي و البيبتيد الداخلي و الغلوسيد ‪ ،‬النوكلياز الداخلي و الخاري و‬ ‫المحلل المرتبط بتقنيات االستشراب و التسلسل البروتيني او االحماض النووية‪ ,‬و يمكن‬ ‫االنزيم ليباز‬ ‫ِّ‬ ‫تحديد التكوين الكيميائي الشامل لالشريكية القولونية‪.‬‬ ‫العنصر‬ ‫الكربون‬ ‫االزوت‬

‫تكوين عناصر االشريكية القولونية‬ ‫‪ %‬الوزن الجاف‬ ‫‪5-/+50‬‬ ‫‪ 10‬الى ‪15‬‬

‫‪Traduit par Mlle Benarib R. : [email protected]‬‬ ‫الفوسفور‬ ‫الكبريت‬ ‫النوع‬ ‫الملح الثابت‬ ‫الملح الحر‬

‫‪3.2‬‬ ‫‪1.1‬‬ ‫‪12.5‬‬ ‫‪7.25‬‬ ‫‪5.5‬‬

‫الجزيئات الكبيرة‬ ‫‪%50‬‬ ‫البروتينات‬ ‫‪ 3‬الى ‪%4‬‬ ‫الحمض النووي‬ ‫‪ADN‬‬ ‫‪%10‬‬ ‫الحمض النووي‬ ‫‪ARN‬‬ ‫‪ 4‬الى ‪%5‬‬ ‫متعدد السكريات‬ ‫‪ 10‬الى ‪%15‬‬ ‫الدهون‬ ‫مكونات نواتج عملية التمثيل الغذائي‬ ‫األحماض اآل منية‪ ،‬القفيصة النووية الحرة‪ ،‬سكريات االحماض العضوية‪ ،‬االستار‪ ،‬البيبتيد‪ ،‬ثالثي‬ ‫الفوسفات االدينوسين‪ ،‬الفيتامينات ‪ ،‬معاون االنزيم المرافق‪.‬‬ ‫‪ 2.2‬اشكال الخلية‬ ‫‪ 1.2.2‬اشكال الخاليا البكتيرية‬ ‫ان البكتيريا عبارة عن كائنات عضوية حية احادية الخلية ذات اشكال متنوعة‪.‬‬ ‫ بكتيريا ذات شكل دائري منعزل متسلسلة و متكتلة (عدد متغير من الخلية)‪ :‬العنقوديات ‪ ،‬العقديات ‪...‬‬‫ بكتيريا ذات شكل متمدد او على شكل عصية ‪ ،‬منعزلة‪ ،‬متسلسلة او متكتلة‪ ،‬طولها و قطرها متغيرين‪:‬‬‫االشريكية القولونية‪ ،‬سالمينيال‪ ،‬العصيات ‪ ...‬الخ‬ ‫ بكتيريا ذات شكل حلزوني‪ ،‬الملتوية‪.‬‬‫مجموعة من البكتيريا خيطية الشكل تقترب من التعفن الفطري‪ :‬الفطريات الشعاعية‬ ‫(‪.)Actinomycètes‬‬ ‫‪ 2.2.2‬الحجم‪ :‬يبلغ حجم البكتيريا االصغر حوالي ‪ 0,2‬ميكرومتر (كالميديا) و االكبر حجما مثل‬ ‫الفطريات الشعاعية قد تبلغ ‪ 250‬ميكرومتر طوال‪ .‬و الحجم المتوسط يكمن بين ‪ 1‬و ‪ 10‬ميكرومتر‪.‬‬ ‫‪ 3.2.2‬الترابط الخلوي‪ :‬قد يظهر النوع البكتيري على شكل خاليا منعزلة منفصلة او في تجمعات متميزة‬ ‫متغيرة حسب االنواع‪ :‬الترابط بين االزواج‪ ،‬في تكتالت منتظمة‪ ،‬في سالسل‪ ،‬في اربعة (الترتاد) ‪.‬‬

‫‪Traduit par Mlle Benarib R. : [email protected]‬‬ ‫االشكال المختلفة و الترابط البكتيري‬ ‫‪ 4.2.2‬العناصر الثابتة و غير الثابتة للبنية البكتيرية‬ ‫توجد بعض البنى عند جميع البكتيريا و هي عناصر ثابتة‪ ،‬و اخرى توجد فقط عند بعض البكتيريا و هي‬ ‫عناصر غير ثابتة او اختيارية‪.‬‬ ‫العناصر الثابتة‬ ‫للبكتيريا‬

‫الجدار – الغشاء البالزمي –‬ ‫بيريبالزم – السيتوبالزم –‬ ‫الكروموزوم – الريبوزوم ‪ -‬متعدد‬ ‫الريبوزوم‬

‫الكبسولة – بيلي و فيبريا –‬ ‫السياط – موزوزوم –بالسميد –‬ ‫الفجوات العصارية الغازية –‬ ‫تضمين الحفظ – البوغ‬

‫العناصر‬ ‫االختيارية‬ ‫للبكتيريا‬ ‫‪ 3.2‬الحاجز‪ :‬غالف متين يضمن سالمة البكتيريا‪ .‬و هو المسؤول عن شكل الخاليا‪.‬‬ ‫اذ يحمي من تنوعات الضغط التناضحي‪ .‬و هو منعدم عند البكتيريا االصغر حجما ‪Mollicutes‬‬ ‫(ميكوبالزما) ‪.‬‬ ‫ان الجزء المشترك في جميع الحواجز البكتيرية هو البيبتيدغليكان‪ ،‬حيث يقوم بتغليف داخل البكتيريا أليفة‬ ‫الملوحة او اليفة الحرارة و بكتيريا الموليكيت منعدمة الجدار‪.‬‬

‫‪ 1.3.2‬التكون الكيميائي‪:‬‬ ‫موجبة الغرام‬ ‫القليل من الدهون (‪ 1‬الى ‪)%2‬‬ ‫االحماض التيكوئيكية و الدهنية‪-‬التيكوئيكية‬ ‫اربعة احماض آمنية غالبة‪ :‬آال (‪ D‬و ‪D- ،)L‬‬ ‫‪( Glu‬د‪-‬غلوكوز)‪(L-Lys ،‬ل‪ -‬لسين)‪ ،‬حمض‬ ‫ديامينوبوليميلي ‪ADP‬‬

‫سالبة الغرام‬ ‫كمية كبيرة من الدهون (‪ 10‬الى ‪ ، %20‬غشاء‬ ‫خارجي)‬ ‫انعدام االحماض التيكوئيكية او الدهنية‪-‬التيكوئيكية‬ ‫نفس االحماض اآلمنية‬ ‫اقل بكثير من ‪ DAP‬و ل‪-‬ليسين‬

‫السكريات اآلمنية‬ ‫ن‪-‬أسيتفل سكر الغلوكوز ‪ NAG‬و حمض ن‪-‬أسيتفل البيبتغليكان ‪.ANAM‬‬ ‫المكونات الكيميائية االساسية للجدار‬

‫‪Traduit par Mlle Benarib R. : [email protected]‬‬

‫رسم تخطيطي البيبتدغليكان‬

‫تكون الوحدات الفرعية للبيبتيدغليكان‬

‫السلسلة متعددة السكريات ‪ :‬تمت بواسطة تناوب جزيئات ‪ NAG‬و حمض ‪.NAM‬‬ ‫السالسل الجانبية البيبتيدية المحددة‪ ،‬مكونة من اربعة احماض آمنية (التيترابيبتيد)‪ ،‬مرتبطة بـ ‪.NAM‬‬ ‫عند موجبات الغرام‪ ،‬مجموعة جسور داخلية البيبتيد (بونتابيبتيد) تجزئ الحمض اآلمني البيبتيد الرابع‬ ‫نحو الحمض اآلمني البيبتيد الثالث للسلسلة الثانية متعددة السكريات و التابع‪.‬‬

‫تنظيم البيبتيد و البونتابيبتيد ‪ ،‬أ‪-‬سالب الغرام‬

‫ب‪ -‬موجب الغرام‬

‫‪Traduit par Mlle Benarib R. : [email protected]‬‬

‫حاجز البكتيريا موجب الغرام‬

‫حاجز البكتيريا سالب الغرام‬

‫أ‪ -‬الحاجز موجب الغرام‪:‬‬ ‫ البيبتيدغليكان المكون الغالب‬‫ الباقي يتعلق بتلبيد األحماض التيكوئيكية (‪)%10‬‬‫ البيبتيدغليكان صلب جدا‪ ،‬حيث ان الروابط المتقاطعة بين السالسل الغلوكوزية عديدة‪.‬‬‫‪ -‬وجود السياط‬

‫بنية الحمض التيكوئيكي‪ :‬الفوسفات ‪ +‬الغليسيكور ‪ +‬الغليسيرول ‪( R +‬أالنين‪ ،‬الغلوكوز)‬ ‫ب‪ -‬الحاجز سالب الغرام‪:‬‬ ‫األكثر تعقيدا‪ ،‬حيث يتكون من البيبتيدغليكان و غشاء خارجي‪ .‬و يتكون من عدة طبقات ‪:‬‬ ‫البيبتيدغليكان ذو طبقة رقيقة‬ ‫الفوسفات الدهني‬ ‫مكون الدهون‪-‬متعددة السكريات ‪ :LPS‬يتكون من ‪ 3‬اجزاء‪:‬‬ ‫الدهن (‪ )A‬المرتبط بسكر الغلوكوز و بترسبات الفوسفور مزدوج األلفة‪ ،‬له جزء نافر للمياه و أليف‬ ‫المياه‪.‬‬ ‫هناك تشابه بين التسميات "اندوتوكسين" و الدهن ‪ A‬و الغشاء الخارجي‪.‬‬ ‫متعدد السكريات المركزي‪ ،‬متكون من ‪ 10‬سكريات‪.‬‬ ‫السلسلة الجانبية ‪ O‬او المسبب للمرض ‪ ، O‬سلسلة قصيرة‪ ،‬تتنوع تركيبتها حسب السالالت البكتيرية‪.‬‬ ‫يلعب ‪ LPS‬وظائف منها الربط في السطوح و منع دخول المواد السامة‪ .‬مثل اندوتكسين (الدهن ‪ )A‬الذي‬ ‫يسبب امراضا جراء سالبات الغرام‪ .‬و نالحظ ايضا وجود البورين (بروتينات المرور ثالثي االبعاد)‪:‬‬ ‫بنى نقل المكونات اليفة المياه فقط‪ ،‬اهمها في حياة البكتيريا مثل احادية السكر‪ ،‬و في فعالية بعض‬ ‫المضادات الحيوية‪ .‬تعمل بعض البروتينات في التقاط االيرونات (الحديد) او الفيتامينات (عوامل النمو)‪.‬‬ ‫تلوين الغرام‪ :‬يسمح اختالف المكونات و البنية الكيميائية للحواجز موجبة و سالبة الغرام باعداد اساس‬ ‫التلوين الذي قام به كريستيان غرام (‪.)1884‬‬

‫‪Traduit par Mlle Benarib R. : [email protected]‬‬ ‫عملية تلوين الغرام‪ :‬يتم التلوين ببنفسج الجنطيانا بعد تثبيت اللطخات‪ .‬ثم يتم الشطف بالماء و اضافة مثبت‬ ‫الليغول‪ .‬ثم يتم الشطف بالماء المقطر‪ .‬ثم ننتثل الى مرحلة تغيير اللون بمزج الكحول و االسيتون‪ .‬يتخلل‬ ‫هذا األخير البكتيريا سالبة الغرام و ليس البكتيريا موجبة الغرام التي تنغلق ابواغها عن طريق التجفيف‬ ‫بواسطة الكحول‪ .‬نقوم بالشطف و نقوم بتلوين معاكس للسفرانين‪ .‬تظهر موجبات الغرام بنفسجية اللون و‬ ‫السالبات الغرام زهرية اللون‪.‬‬ ‫‪ 3.3.2‬وظائف الحاجز‪:‬‬ ‫بغية دراسة دور الحاجز نستعمل االنزيم الليزوزيم‪.‬‬ ‫يقو م الليزوزيم بفك الروابط ‪ β 1-4‬غلوكوز بين ‪ NAG‬و ‪ .ANAM‬و ينتج عن ذلك هدم كلي‬ ‫للبيبتيدغليكان عند البكتيريا موجبة الغرام‪ ،‬و تجزأ البيبتيدغليكان عند سالبات الغرام ألن البيبتيدغليكان‬ ‫صعب النفوذ اليه بسبب الغشاء الخارجي‪.‬‬ ‫التجربة‪:‬‬ ‫‪ -1‬نضع ساللة العصيات الرقيقة (عصية موجبة الغرام) في وسط منقوص الضغط الذي تتعامل معه‬ ‫البكتيريا‪.‬‬ ‫‪ -2‬اذا أضفنا الليزوزيم لهذا التعليق تنتفخ البكتيريا و تنفجر‬ ‫‪ -3‬تطبق التجربة نفسها على الوسط متساوي الضغط و هنا ال تنفجر البكتيريا بوجود الليزوزيم‪ ،‬بل تأخذ‬ ‫شكل بيضوي يدعى بـ‪ :‬بروتوبالست‪ .‬ليس للبروتوبالستات خصائص متضادة للبكتيريا‪ ،‬و ال تنقسم و ال‬ ‫تثبت الجراثيم العاثية و هي عديمة الحركة‪.‬‬ ‫‪ -4‬تطبق كذلك التجربة على االشريكية القولونية (عصية سالبة الغرام) في وسط متساوي الضغط ‪+‬‬ ‫الليزوزيم‪ .‬فتأخذ البكتيريا شكل بيضوي يدعى‪ :‬سفيروبالست ‪ .spheroplaste‬و هي تحفظ جمع‬ ‫الخصائص األولية للبكتيريا‪.‬‬ ‫الدور األول للحاجز‪ :‬ضمان صيانة شكل البكتيريا‬ ‫الدور الثاني للحاجز‪ :‬ضمان الحماية ضد الضغط التناضحي داخل الخاليا (بسبب التركيز القوي على‬ ‫المكونات الناتجة عن عملية األيض داخل الخاليا" رجوع الماء)‬ ‫ال تمتلك البروتوبالست خصائص مستضادة للبكتيريا األصلية‪ .‬و بهذا نجد المولد المضاد الجداري‪.‬‬ ‫عند موجب الغرام‪ :‬بيبتيدغليكان ‪ +‬حمض التيكوئيك و الليبوتيكوئيك ‪ +‬بوليوسيد ‪ C‬عند العقديات‬ ‫عند سالب الغرام‪ :‬المولد المضاد ‪ O‬الخاص بـ ‪LPS‬‬ ‫الدور الثالث‪ :‬خصائص مستضادة‪ :‬تكشف دراسة البروتوبالست عن أدوار أخرى‪:‬‬ ‫الدور الرابع‪ :‬السماح بتثبيت الجراثيم العاثية ‪ .‬تعرف بمتلقي متوطن في البيبتيدغليكان موجب الغرام او‬ ‫ذات غشاء خارجي سالب الغرام‪ .‬تستعمل هذه الخاصية في تحديد بعض البكتيريا‪Lysotypie :‬‬ ‫الدور الخامس‪ :‬المساهمة في الحركة‪ .‬يتم استنبات السياط في الغشاء السيتوبالزمي‪ .‬لكن ال يمكنها القيام‬ ‫بوظيفتها بغياب البيبتيدغليكان (ثبات البروتوبالستات)‪.‬‬ ‫الدور السادس‪ :‬التسمم‪ :‬عند سالبات الغرام ‪ ، LPS‬و هو من المواد السامة (يستمد سمومه من الدهن ‪A‬‬ ‫الذي يسبب الحمى و الجروح)‪.‬‬ ‫الدور السابع‪ :‬النفاذية‪ .‬يسمح الحاجز بمرور الجزيئات الصغيرة مثل الماء او االمالح المعدنية او نواتج‬ ‫عملية األيض البسيطة‪ .‬و في المقابل يسمح لبعض المحاليل بالنفوذ مثل (الكحول ‪ ،‬الطرد المركزي‪ ،‬تلوين‬ ‫الغرام)‪.‬‬ ‫المجال بيربالزم‪ :‬يحتوي على االنزيمات التي تساهم في التغذية (الهيدروليز) و البروتينات المشتركة في‬ ‫نقل الجزيئات الى داخل الخاليا‪.‬‬ ‫تفرز موجبات الغرام االنزيمات خارج الخاليا‪ .‬و هذه هي االنزيمات الخارجة عن الخاليا‬ ‫(‪.)escoenzyme‬‬ ‫و تحتجز سالبات الغرام بين األغشية الخارجية و الداخلية‪.‬‬ ‫‪ 4.2‬الغشاء البالزمي‪:‬‬

‫‪Traduit par Mlle Benarib R. : [email protected]‬‬ ‫‪ 1.4.2‬التركيبة الكيميائية‪ :‬تحمل نفس بنية الخلية حقيقية النوى‪( .‬ثنائية الطبقة من الفوسفات الدهني) لكن‬ ‫بأقل بكثير من الغلوسيد و الستيرول (ماعدا عند الميكوبالزم)‬ ‫مكون من ‪ 60‬الى ‪ %70‬من البروتينات و ‪ 30‬الى ‪ %40‬من الدهون‪.‬‬ ‫يحتوي الغشاء البالزمي على انزيمات الجهاز التنفسي‪ ،‬انزيمات نازعة للهيدروجين‪ ،‬و معاونات مرافقة‬ ‫لالنزيم‪ :‬ثنائي النوكليوتيد‪-‬األدنين و أميد النيكوتين ‪( FAD ، NAP‬ثنائي نيوكليتيد الفالفين و األدينين‪،‬‬ ‫السيتوكروم‪ ،‬سيتوكروم المؤكسد‪.‬‬ ‫المتضمنة في تركيبة السوائل و في تنسخ ‪.ADN‬‬ ‫يتم تموضع بعض االنزيمات االخرى‬ ‫َ‬ ‫‪ 2.4.2‬بنية الغشاء البالزمي‪ :‬تكون السوائل في قاعدة بنية الغشاء‪ .‬كل جزيء من الماء يكون تارة أليفة‬ ‫المياه و تارة نافرة المياه‪ .‬تتكون من جزء نافر للحرارة قابل لالنحالل في زيت و غير قابل لالنحالل في‬ ‫الماء و جزء أليف المياه ذو خصائص متناقضة و تتضمن تجمعا للفوسفات ذو شحنات السالبة‪ .‬تتسبب‬ ‫طبقتي هذين الجزئين بتنظيم مزدوج االنطواء‪.‬‬ ‫ان هذا التنظيم ليس ثابتا‪ ،‬فهو يستجيب لنموذج ذو تدفق فسيفسائي (قد تنتقل الجزيئات جانبيا بتغيير‬ ‫أماكنها) ‪.‬‬ ‫و من هنا‪ ،‬نميز بين فئتين من البروتين‪ :‬البروتينات المحيطية و البروتينات المتكاملة التي تمر عبر‬ ‫المطوية المزدوجة‪.‬‬

‫بنية الغشاء السيتوبالزمي البكتيري‬ ‫‪ 3.4.2‬وظائف الغشاء البالزمي‬ ‫أ‪ -‬دور الحاجز شبه قابل للنفوذ (شبه اختياري)‪ ،‬حيث يسمح بمرور الجزيئات أليفة الدهون و تمنع مرور‬ ‫الجزئيات أليفة المياه‪.‬‬ ‫نميز بين نوعين من النقل‪:‬‬ ‫ النقل السلبي‪ :‬يحدث في تدرج التركيز و ال يحتاج للطاقة‬‫ النقل النشط‪ :‬يحدث عكس تدرج تركيز الجزئيات مما يحتاج الى الطاقة (يتم التزويد عموما على شكل‬‫ثالثي الفوسفات أدينوسين ‪.ATP‬‬ ‫ب‪ -‬موقع تثبيت السياط (أنظر "السياط")‬ ‫ج‪ -‬البروتينات الغشائية من اجل االدوار‪:‬‬ ‫ االنزيمات المسؤولة عن التركيبة الحيوية و االفراز في المجال البالزمي الخاص بالجزيئات الضرورية‬‫في تكون الحاجز‪.‬‬ ‫ انزيمات الجهاز التنفسي التي تسمح بتكون ثالثي الفوسفات أدينوسين و االنزيمات الخاصة بالتركيب‬‫الضوئي‬ ‫ ناقالت لجزيئات مختلفة (أيون‪ ،‬سكريات‪ )...‬في شكلين‪.‬‬‫اضافة الى ذلك‪ ،‬يلعب الغشاء دورا هاما في كشف العالمات و المكونات الموجودة في وسط بيئي بفضل‬ ‫وجود البروتينات الناقلة الغشائية لالنجذاب الكيميائي‪ ،‬مما يسمح للبكتيريا ذات سياط (سابحة) نحو‬

‫‪Traduit par Mlle Benarib R. : [email protected]‬‬ ‫الجهات االكثر ثراء من المغذيات على سبيل المثال‪ ،‬و االبتعاد عن الجهات غير المالئمة مثل تلك التي‬ ‫تحتوي على مواد سامة‪ .‬تندرج هذه البروتينات ضمن دوران السياط‪.‬‬ ‫‪ 5.2‬السيتوبالزم‪:‬‬ ‫يحدده الغشاء السيتوبالزمي ‪.‬‬ ‫من نوع الجال ذو األس الهيدروجيني يحتوي على الماء و‪:‬‬ ‫ ‪ 1.5.2‬الريبوزوم‪ :‬الذي يندرج ضمن التركيبة البروتينية‪ ،‬يرتبط بالسالسل على مرسال الحمض النووي‬‫الريبوزومي على شكل متعدد الريبوزوم‬ ‫‪ 2.5.2‬المواد الحافظة‪ :‬محتويات سيتوبالزمية‪ :‬على العموم تتركب كل مجموعة من صنف واحد من‬ ‫المواد الحافظة ‪ .‬التي تشكل البثايا ذات حجم كبير في بعض األحيان‪ .‬و قد تتكون من غلوكسيد (أميدون‪،‬‬ ‫غليكوجين) و دهون (بولي‪-‬هيدروكسيد بيترات)‪ ،‬و متعدد الفوسفات‪ ،‬و احيانا منة المعادن (الحديد‪،‬‬ ‫الكبريت)‪.‬‬ ‫‪ 2.5.3‬العُضية المختصة ‪ :‬الصبغيات (العضيات المختصة في التركيب الضوئي) ‪ ،‬الفجوات العصارية‬ ‫الغازية‪( .‬تسمح للبكتيريا المائية بالطفو فوق سطح الماء)‪.‬‬

‫الفجوات العصارية الغازية الخاصة بالبكتيريا الزرقاء عديمة النواة بالمجهر االلكتروني‬ ‫‪ 6|.2‬الكروموزوم‪:‬‬ ‫‪ 1.6.8‬الشكل و البنية‬ ‫تحمل أغلب البكتيريا كروموزوم واحد و فريد و دائري‪ .‬ضمة الكوليرا ‪ .Vibrio cholerae‬تتكون من‬ ‫جزء كبير من ‪ 2,9‬مليون قاعدة و جزء صغير من ‪ 1‬مليون قاعدة‪.‬‬ ‫بالنسبة لالشريكية القولونية تكون محشوة و توجد في منطقة تدعى بالقضية النوويسة او الجسم النووي‪ .‬و‬ ‫قياسها ‪ 1400‬ميكرومتر و ‪ 1300‬في السمك‪.‬‬ ‫تتنوع اشكال االجسام المترصدة حسب مرحلة النمو و انقسام البكتيريا‪.‬‬ ‫بالنسبة للمكورات‪ :‬نالحظ كتلة صغيرة كروية اوبيضوية الشكل؛ في اغلبها تكون مركزية‪.‬‬ ‫و بالنسبة للعصيات‪ ،‬هناك قضيب متطابق واقع بشكل عرضي في الخلية‪ .‬و عموما أحادي النويات بالنسبة‬ ‫للمكورات و متعدد النويات عند العصيات‪.‬‬ ‫هذا العنصر مرئي عند البكتيريا الفتية في مرحلة النمو اآلسي ‪ .‬يتناسخ الجهاز النووي عدة مرات قبل ان‬ ‫تنقسم الخلية‪.‬‬ ‫يرتبط حمض ‪ ADN‬ببروتينات انزيمات المراقبة للبنية المكانية التي تندرج ضمن التفاف جزيء ‪.ADN‬‬ ‫و في المقابل ال نجد الهيستون مثلما هو الحال في حقيقيات النوى‪ .‬و نجد متعدد اآلمين مع الهيستون مثل‬ ‫البروتين ‪ II‬الغني في اآلرجينين‪.‬‬ ‫‪ 2.6.2‬التكون‪:‬‬ ‫ان ‪ ADN‬عبارة عن مركب بوليمير بـ ‪ PM‬المرتفع‪ ،‬و مكون من وحدات تدعى قفيصات نووية‪.‬‬

‫‪Traduit par Mlle Benarib R. : [email protected]‬‬ ‫القفيصة النووية‪" :‬تجمع الفوسفور ‪ +‬سكر ذو ‪ 5‬ذرات ‪ +‬قاعدة البيرين او بيريميديك‬ ‫قاعدة البيرين‪ :‬أدينين ‪ ،A‬غانين ‪.G‬‬ ‫قاعدة بيريميديك‪ :‬سيتوسين ‪ C‬و ثيمين ‪T‬‬ ‫السكر‪ :‬الريبوزي منقوص االكسجين‬ ‫تجمع الفوسفور‪ :‬فوسفات دياستر بـ ‪ ’3‬و ‪ ’5‬ريبوزي منقوص االكسجين‪.‬‬ ‫بقدر ما هو الحال في ‪ A‬هو كذلك في ‪ ،T‬و بالقدر الذي في ‪ C‬هو في ‪ G‬على عكس العالقة ‪، A + T‬‬ ‫‪ C+G‬المعروفة تحت اسم المعامل شارغاف الذي يتنوع حسب االصناف‪.‬‬ ‫و نعبر عنه بـ ‪ %50 ،GC% :‬عند االشريكية القولونية ‪ %60 ،‬الزوائف‪ 25 ،‬الى ‪ %45‬كلوستيريديوم‪.‬‬ ‫تندرج االنزيمات لمراقبة للبنية المكانية لـ ‪ II ADN‬او غيراس و ‪ topoisonérase I‬ضمن االنتقال من‬ ‫شكل الى آخر‪.‬‬ ‫‪ 3.6.2‬التناسخ الكيميائي‪ :‬تناسخ ‪ ADN‬اي ينتج نفسه بنفسه‪ .‬يحدد تتابع السلسلة آليا تتابعا في سلسلة‬ ‫أخرى‪.‬‬ ‫التناسخ المحافظ الجزئي‪ :‬ان كل سلسلة أبوية مرتبطة سلسلة جديدة ترتبط بسلسلة أموية‪.‬‬ ‫تناسخ ثنائي االتجاه‪ :‬تم رصد كروموزوم في كامل االشريكية القولونية خالل التناسخ‪ .‬و هذا يرتبط‬ ‫بتقنيات التأشير المتناظر و التصوير الذاتي التابع للرصد بالمجهر االلكتروني‪.‬‬ ‫بعد استنبات البكتيريا في الوسط المحتوي على الثيميدين المعالج بالتريتيوم بنشاط ضعيف و خالل وقت‬ ‫يتجاوز مدة الدورة‪ ،‬ثم يتم تسليط الضوء على تحلل الخلية‪ ،‬سامحا بتحرر ‪ ADN‬مباشرة على شبكة‬ ‫المجهر االلكتروني مخفظا بذلك اخطار االنكسارات اآللية للجزيء‪.‬‬

‫يغطى التحضير بمستحلب التصوير باالشعة و بعد العرض و التطوير‪ ،‬يكشف الفحص عن طول جزيء‬ ‫‪.ADN‬‬ ‫أظهرت االرصاد االولية دوران الكروموزوم الخاص باالشريكية القولونية‪ .‬و في المرحلة الثانية‪ ،‬و يقوم‬ ‫‪ Grains‬بعالمات قصيرة جدا و اقتطاع الصور التي تظهر ان التناسخ يبدأ من الكروموزوم البكتيري؛‬ ‫أصل التناسخ‪ ،‬و يدور حوله‪.‬‬ ‫تقنية الجزيئي للتناسخ‪:‬‬ ‫تدخل في ذلك العديد من االنزيمات‪:‬‬ ‫حيث يحفز ‪ ADN‬بوليميراس ‪ ، III ،II ،I‬اضافة الى قفيصة نووية ريبوزية منقوصة االكسجين في نهاية‬ ‫سلسلة ‪ ، ADN‬و هو نشاط نووي خارجي‪ ،‬اما الثالث فهو الفعال‪.‬‬ ‫ليغاز ‪ :ADN‬يقوم بتوحسيد نهايات كال سلسلتي ‪ ADN‬بتحفيز تركيبة الجسر الفوسفودياستر بين ‪OH3‬‬ ‫و ‪.P5‬‬ ‫كما يصلح انقطاعات ‪ ADN‬و ينشط ‪ ADN‬البكتيري‪.‬‬ ‫انزيم الهيليكاز‪ :‬يفتح سالسل ‪ ADN‬قبل التناسخ‪.‬‬

‫‪Traduit par Mlle Benarib R. : [email protected]‬‬ ‫غيراز‪ :‬كروموزوم االشريكية القولونية ‪ 1360‬ميكرومتر (‪ 4.106‬زوج ‪ ،Nt‬و ‪ 4.105‬دورة حلزونية)‪،‬‬ ‫فإذا تم التناسخ في ‪ 30‬دقيقة‪ ،‬يقوم التناسخ بـ ‪ 10000‬دورة‪/‬د و هذا بفضل اكتشاف غيراز الذي استطاع‬ ‫تفسير هذه الظاهرة‪.‬‬ ‫يقوم غيراز بقطع على مستوى احدى الضفائر مما يسبب تغير الشكل الحلزوني لـ ‪ ADN‬الملفوف في‬ ‫جزيء دائري‪.‬‬ ‫يبدأ التناسخ من نقطة األصل او نقطة البداية‪.‬‬ ‫تتركب على مستوى تشعب التناسخ احدى الضفيرتين من خالل التنقل (‪ 3 ’OH‬حر) الذي يثير ه ‪ADN‬‬ ‫بوليميراس ‪ III‬و هو ما يسمى الضفيرة المتقدمة‪ .‬يتركب الموقد في اعلى درجة ‪ ’5‬بواسطة تجزأ‬ ‫اوغاساكي و يدعى بالضفيرة المتخلفة‪.‬‬ ‫يتطلب التجزأ من ‪ 1000‬الى ‪ 2000‬المترسبة فتيلة ‪ ARN‬يركبها ‪ ARN‬بوليميراس ‪ ADN‬المستقل‪ ،‬و‬ ‫يدعى انزيم بريميز ثم يستأصل ‪ ADN‬بوليميراس ‪ I‬فتائل ‪ ARN‬هذه (ن شاط نووي خارجي) و تستبدل‬ ‫المحذوفات بـ ‪ ADN‬بواسطة هذا االنزيم نفسه‪.‬‬ ‫و في األخير يربط ‪ ADN‬ليغاز مختلف السالسل على مستوى درجتها العليا من ‪ 3’ OH‬و ‪ 5’OH‬حر‪.‬‬ ‫يلتف و يستقر ‪ ADN‬األم خالل جميع هذه المراحل بواسطة البروتينات المسماة بـ‪ :‬بروتينات ‪ADN‬‬ ‫االجبارية‪.‬‬

‫تشعب تنسخ ‪ ADN‬عند االشريكية القولونية (ماريانا رويرفيالاير‪ ،‬هامبورغ ألمانيا)‬ ‫‪ 7.2‬بالسيميد‪ :‬قد تحتوي الخلية البكتيرية على عناصر وراثية داخل الكروموزوم ‪ ،‬قادرة على التناسخ‬ ‫الذاتي‪ ،‬و تدعى بـ "بالسيميد" (ليدربورغ ‪.)1952‬‬ ‫لبعض البكتيريا العديد من البالسيميد المختلفة‪ .‬حيث يسمح هذا االخير للبكتيريا بالتأقلم مع بيئتها‪.‬‬ ‫‪ 1.7.2‬بنية البالسيميد‪ :‬و هي جزيئات ‪ ADN‬ثنائي الضفيرة‪ ،‬دائرية عموما ‪ ،‬لكن هناك منها الخطية‪.‬‬ ‫أحيانا يتضمنه الكروموزوم و يسمى بـ ايبيزوم ‪ .Episome‬و هو متحول خالل الوالدة لكن ليس بطريقة‬ ‫متساوية مثل قملة الكروموزوم‪ .‬و فقدان البالسيميد ندعوه بـ "التنظيف"‪.‬‬

‫‪Traduit par Mlle Benarib R. : [email protected]‬‬

‫رسم تخطيطي حول البالسيميد المتحول‬ ‫البالسيميد تحت المجهر االلكتروني‬ ‫ان البالسيميد ذو حجم صغير في العادة (‪ 1Kb‬الى ‪ 1/100 )100Kb‬من الكروموزوم البكتيري و يحمل‬ ‫جينات قليلة (اقل من ‪ 30‬جينة)‪.‬‬ ‫يتم تصنيف لبالسيميد حسب وظيفتها و تناسلها و ووجودها‪.‬‬ ‫و نميز أيضا بالسيميد االقتران الذي يحمل الجينة المسؤولة عن تركيب الشعيرات الجنسية و التي تحتاج‬ ‫الى االقتران‪.‬‬ ‫بالسيميد ‪( :R‬عوامل المقاومة)‪،‬يسمح للبكتيريا بمقاومة المضادات الحيوية‬‫بالسيميد ‪ :COP‬التي ترمز لل بروتينات المسماة البروتينات البكتيرية‪ ،‬مثل كوليسين االشريكية القولونية‪.‬‬ ‫تنفع البروتينات البكتيرية البكتيريا بالقضاء على السالالت االقرب الى االشريكية القولونية‪.‬‬ ‫بالسيميد الفيروسي‪ :‬يرمز للسموم المسؤولة عن اعراض االمراض البكتيرية‪.‬‬‫بالسيميد التمثيل الغذائي‪ :‬يرمز لالنزيمات القادرة على اثارة الجزيئات المعقدة ‪ ،‬المعطرة التي تلوث‬‫بيئتنا (مبيدات اآلفات) او المغذيات مثل الالكتوز‪ ،‬سيترات ‪ ،NA‬يوريا و اخيرا تثبت اآلزوت عند‬ ‫الريبوزوم‪.‬‬ ‫‪ 2.7.2‬التناسخ‪ :‬يتناسخ البالسيميد وفقا لنموذجين‪:‬‬ ‫التناسخ ‪ :Theta Ø‬احادي او ثنائي االتجاه‪ ،‬يتم استعمال جهاز انزيمي للبكتيريا الثوية بدءا من اصل‬ ‫التناسخ‪.‬‬

‫تناسخ ‪Theta Ø‬‬ ‫تناسخ تدوير الدائرة ‪ :Rolling cercle‬يتم قطع الضفيرة بواسطة االنزيم نوكلياز‪ .‬و تلتف هذه الضفيرة‬ ‫حول ضفيرة اخرى في درجة ‪ P’5‬و تركب البكتيريا ضفيرة تكميلية فورية للضفيرتين الوالدتين‪.‬‬

‫‪Traduit par Mlle Benarib R. : [email protected]‬‬

‫‪ 3.7.2‬خصائص‪( :‬اطلع ايضا على انواع البالسيميد المختلفة اعاله)‬ ‫أ‪ -‬مقاومة المضادات الحيوية‪ %90 :‬بالسيميد) و ‪ %10‬الباقية (كروموزوم)‬ ‫ب‪ -‬مقاومة المعادن الثقيلة‪( :‬الزئبق‪ ،‬أمالح الكادميوم‪ ،‬بزموت‪ ،‬الرصاص‪ ،‬االثميد‪ ،‬االرنيسيت)‬ ‫ج‪ -‬انتاج المواد المسببة للمرض‪ :‬المثال االكثر دراسة حول االشريكية القولونية‪ ،‬المسؤولة عن االسهال‪.‬‬ ‫د‪ -‬القدرة على التسبب في المرض‪ :‬في ثالث حاالت تتحكم فيها المعلومة الوراثية التي يحملها البالسيميد‪،‬‬ ‫ترمز الى التسمم المعوي و عوامل القولون التي تسمح بربط البكتيريا بسطح االمعاء (النسيج المعوي)‪.‬‬ ‫و‪ -‬البروتينات البكتيرية‬ ‫ي‪ -‬خصائص التمثيل الغذائي (األيض)‪ :‬عدد كبير من الخصائص الكيميائية الحيوية للبكتيريا و هي من‬ ‫اصل بالسيميد‪.‬‬ ‫‪ .8‬الشعيرات (‪)Pili‬‬ ‫‪ 1.8‬البنية‪ :‬نميز اليوم بين اربعة انواع من الشعيرات (‪)IV ،III ،II ،I‬‬ ‫تدعى االنواع‪IV ، III ، I‬بالخيط و النوع ‪ II‬الشعيرات الجنسية‪.‬‬ ‫‪ :Fimbriae‬كلمة التينية تعني "الخيط"‪ ،‬عبارة عن زائدة قصيرة (ذات ترتيب ‪ 1‬مكرومتر)‪ ،‬مجوفة‪،‬‬ ‫صلبة مكونة من البروتينات الموضوعة في المروحة‪ .‬و توجد بكثرة و بأعداد كبيرة حول االجسام‬ ‫البكتيرية (‪ )1000‬عند سالبات الغرام و و استثناء عند موجبات الغرام‪.‬‬ ‫ان النوع ‪ II‬او الشعيرات الجنسية‪ Pili( :‬كلمة التينية تعني شعر)‪ ،‬طويلة و سمكها اكبر من الخيط‬ ‫(‪10‬مكرومتر‪ 9 ،‬نم على التوالي) و عددها قليل (‪ 1‬الى ‪ 4‬للخلية)‪.‬‬ ‫ان بالسيميد االقتران هو الذي يحمل جينة الشعيرات ‪.Pili‬‬ ‫‪ 2.8‬الوظيفة‪:‬‬ ‫خيوط النوع ‪ I‬و ‪ III‬تلعب دورا في اندماج البكتيريا بمختلف الدعامات الحية او الميتة‪ .‬كما تفضل تكوين‬ ‫الغشاء الحيوي الرقيق‪.‬‬ ‫خيوط النوع ‪ : IV‬توجد عند الزنجارية المزيفة‪ ،‬باالضافة الى الربط‪ .‬تندرج ضمن طريقة اخرى للحركة‬ ‫تسمى "المتشنجة"‪ .‬و توجد على مستوى اقطاب الخاليا البكتيرية‪.‬‬ ‫تتعاقد الخيوط ‪ IV‬و تتراجع مثل النابض للسماح بحركة البكتيريا‪.‬‬ ‫الشعيرات الجنسية او النوع ‪ :II‬تقوم باالقتران البكتيري (احدى طرق تحويل المادة الوراثية الثالثة من‬ ‫بكتيريا الى اخرى)‪ .‬تسمح الشعيرات الجنسية المانحة بالتعرف على البكتيريا المتلقية (الرابط) و تنشئ‬ ‫جسرا سيتوبالزمي بين النوعين من البكتيريا‪ ،‬مسهلة بذلك مرور جزيء البالسيميد‪.‬‬

‫‪Traduit par Mlle Benarib R. : [email protected]‬‬

‫خيوط النوع ‪ I‬لالشريكية القولونية‬

‫الشعيرات الجنسية من نوع ‪II‬‬ ‫‪ 9.2‬الكبسولة‪:‬‬ ‫‪ 1.9.2‬الشكل‬ ‫لبعض البكتيريا بنى تلف الجدار‪ .‬و نميز ‪ 3‬انواع من الطبقات ‪ ،‬الكبسولة و الطبقات المبوبة و الطبقة ‪S‬‬ ‫حسب البكتيريا‪.‬‬ ‫الكبسولة منتظمة و معرفة و صعبة االنفصال عن البكتيريا‪.‬‬ ‫الطبقة المبوبة‪ :‬توجد عند البكتيريا المائية و هي منتظمة‪ ،‬منتشرة‪ ،‬سهلة االنفصال عن البكتيريا‪.‬‬ ‫الطبقة ‪ ،S‬رقيقة‪ ،‬متناسقة‪ .‬و هي طبقة سطحية ال تظهر اال بواسطة المجهر االلكتروني‪ .‬تتكون من‬ ‫وحدات فرعية بروتينية منظمة‪.‬‬ ‫الكشف عن الكبسولة‪:‬‬ ‫ رصد الشكل و الحركة بالحبر الصيني‪ :‬تظهر البكتيريا في عمق مظلم مع وميض واضح حول االجسام‬‫البكتيرية المرتبطة بالكبسولة‪.‬‬ ‫ المجهر االلكتروني‬‫ التقنية الكيميائية المناعية‪ :‬تتثبت مضادات الكبسوالت على ‪ Ag‬الكبسولية‪ .‬ترفع الرابطة ‪ Ac-Ag‬من‬‫سمك الكبسولة التي تصبح مرئية بالمجهر‪ .‬يدعى هذا التفاعل بـ‪ :‬تفاعل انتفاخ الكبسولة ‪.NEUFELD‬‬

‫المجهر االلكتروني‬

‫تقنيات كيميائية مناعية‬ ‫بالحبر الصيني‬

‫تلوين‬

‫‪ 2.9.2‬التركيبة الكيميائية‪:‬‬ ‫تجتمع الكبسولة و الطبقات المبوبة لتحمل اسم غليكوكاليكس‪ .‬ان هذا االخير شبكة متعددة السكريات‪.‬‬ ‫للعصية الجمرية المساعدة على مرض الفحم كبسولة ذات طبيعة بروتينية‪.‬‬ ‫ان الطبقة المبوبة متراوحة عند البكتيريا المائية و خاصة انها مهمة عند البكتيريا من نوع زوغليا‬ ‫‪ Zooglea‬التي تنتج كتال لزجة‪ .‬و بعض من البوليوسيد التي تنتجها البكتيريا عبارة عن منفعة صناعية و‬ ‫هي مواد مثل التبلور خاصة في صناعة االغذية‪ leuconostoc mesenteroides :‬مواد دكستران‪des ،‬‬ ‫‪... xanthomonas xanthanes‬‬ ‫تتكون طبقة ‪ S‬من البروتينات و الغلوكوز البروتيني‪ ،‬منظمة في شكل رصيف‪.‬‬ ‫‪ 3.9.2‬وظائف الكبسولة‪:‬‬ ‫يمكن للبكتيريا العيش دون الكبسولة لكن هذه االخيرة تمدها بايجابيات بفضل دورها‪:‬‬ ‫الحماية‪ :‬ضد االشعة ما فوق البنفسجية‪ ،‬الجفاف‪ ،‬المفاعالت الفيزيائية و الكيميائية‪.‬‬

‫‪Traduit par Mlle Benarib R. : [email protected]‬‬ ‫فيروسية (مسببة للمرض)‪ :‬تتعارض مع البلعمة بتخفيض اندماج البكتيريا مع البالعات‪ .‬و تمارس‬ ‫االنجذاب الكيميائي السلبي على الكريات البيضاء‪.‬‬ ‫المستضد‪ Ag :‬الكبسولية هي المسؤولة عن الخاصية المصلية (‪ .)Ag K‬و من هذه الخاصية‪ ،‬يتم اعداد‬ ‫التصنيف (مثال‪ 70 :‬نوع من االمصال المختلفة عند العقدية الرئوية)‪.‬‬ ‫الطبقة ‪ :S‬توجد عند البكتيريا البدائية (ميثانوكوكوس) و عند البكتيريا (كالمينديا‪ ،‬تيربونيما‪،‬‬ ‫المغزلية‪ .)...‬تلعب الطبقة ‪ S‬دور البنية الجدارية اكثر من دور الحاجز‪ .‬و هي تدخل‬ ‫هيلوكوباكتر‪ ،‬عصية ِّ‬ ‫ضمن عملية االندراج و في مقاومة االنزيمات البروتينية للبالعات و في حماية البكتيريا العاثية‪ .‬و تعمل‬ ‫هذه الطبقة على التصفية حيث تمنع دخول و خروج الجزيئات الضخمة‪.‬‬ ‫‪ 10.2‬السياط‪:‬‬ ‫عبارة عن اعضاء حركية مختصة و هي نادرة عند البكتيريا الكروية‪.‬‬ ‫‪ 1.10.2‬الكشف‬ ‫طريقة غير مباشرة‪ :‬رصد الشكل و الحركة (حركة البكتيريا) او في وسط شبه جيلوزي‪ .‬تؤثر العديد من‬ ‫العوامل على الحركة مثل عمر االستنبات و درجة الحرارة (يارزينيا ثابتة في ‪ °37‬و متحركة في ‪.)°22‬‬ ‫الطريقة المباشرة‪ :‬باستخدام المجهر الضوئي بعد تسميك السياط عن طريق عملية التلوين الخاصة (رود‪،‬‬ ‫ليفسون‪ :‬الصبغ ارجواني قاعدي) او بالمجهر االلكتروني‪.‬‬ ‫تلوين رود‪ :‬هنا تكون السياط ضعيفة و التحضير دقيقا‪.‬‬ ‫التقنية‪ :‬تحضير اللطخات (استخدام شريحة جديدة) على شريحة تميل الى ‪ °45‬اعلى حوض التلوين‬ ‫(نضع الماء المبيض في الحوض) ‪ : ،‬نترك قطرتين من استنبات الساللة الجاري دراستها بعد الغليان‬ ‫تطفو (استنبات فتي‪ 6 :‬الى ‪ 12‬ساعة) ‪ .‬ثم يتم التجفيف‬ ‫ثم يتم تغطية عن التحضير بمثبت لون رود في غضون ‪ 3‬دقائق (يستعمل بعد تحضيره فورا)‪.‬‬ ‫يغسل جيدا في ماء مقطر‪ ،‬و يغطى بنترات الفضة أمونية (يتم االستعمال بعد تحضيره فورا)‪ .‬و يتم‬ ‫التسخين حتى يقترب من الغليان و يترك ‪ 3‬الى ‪ 5‬دقائق‪ .‬يشطف بماء مقكطر ‪ .‬و يجفف و يتم رصد‬ ‫باالحتجاب‪.‬‬

‫تلوين على طريقة رود‬ ‫تقاس السياط بمعدل ‪ 16‬الى ‪ 20‬مكرومتر (اكثر بكثير من البكتيريا) و هي رقيقة جدا ‪ A 300‬سمكا)‬ ‫هناك عدة طرق الدخال السياط حسب عددها و وضعيتها‪:‬‬

‫‪Traduit par Mlle Benarib R. : [email protected]‬‬

‫احادية السوط‬

‫ادخال قطبي‬

‫لوفوتريش‬ ‫اومفيتريش‬

‫ادخال بريتريش‬ ‫بيريتريش‬

‫نوع السوط و طريقة االدخال‬ ‫ تثبت في البكتيريا بواسطة الدخول في الغشاء السيتوبالزمي‬‫ تتحرك بالدوران مثل المروحة بفضل الية مشابهة للدوار و تعمل بفضل الطاقة التي يزودها البروتون‪.‬‬‫ تحدث آلية الدوران بفضل الية معقدة المتضمنة للمتلقي و الكيناز تكمن في الغشاء البالزمي و المتضمن‬‫للحاجز‪.‬‬ ‫بنية الجزيء‪ :‬يتكون السوط البكتيري من ثالثة اجزاء‪ :‬خيط مروحي – معالق – جسيمات قاعدية‬

‫بنية السوط البكتيري سالب و موجب الغرام‬ ‫الخيط‪ :‬و هو اسطوانة مجوفة تتكون من بروتين واحد متعدد االبعاد‪ :‬فالجيلين‬ ‫الفالجيلين عبارة عن بروتين ليفي يتموضع في مروحة صلبة حيث يدور بالطريقة التي تدور بها مروحة‬ ‫السفينة‪.‬‬ ‫المعالق‪ :‬يربط الجسيمات القاعدية‬ ‫و له نفس تركيبة الخيط‪ ،‬و من هذا المنطلق نجد ان الفالجيلين ال تملك المروحة مما يسمح بتكوين‬ ‫االنبوب‪.‬‬

‫‪Traduit par Mlle Benarib R. : [email protected]‬‬ ‫ان المعالق اقصر من الخيط و لكنه اوسع منه‪ .‬مرن حيث يسمح بحركة البكتيريا‪.‬‬ ‫يتم ضمان الربط بين المعالق و الخيط بواسطة البروتينات المرتبطة بالمعالق‪.‬‬ ‫الجسيمات القاعدية‪:‬‬ ‫تدفن في الخلية‪ ،‬و تدخل السوط في الجسم الخلوي‪ .‬بنيته معقدة كفاية و مبسطة في ‪ 3‬اجزاء‪:‬‬ ‫جزء متحرك‪ :‬دوار‬ ‫جزء ثابت‪ :‬الساكن‬ ‫العاكس‪ :‬الذي يثير الحركة اما باتجاه عقارب الساعة او عكسها‪.‬‬ ‫تركيبته مختلفة عن البكتيريا موجبة و سالبة الغرام‪.‬‬ ‫ان ‪ 20‬الى ‪ 30‬جينة تندرج ضمن تركيبة السياط‪ .‬يتم بناء تركيبة السوط عن طريق تجمع متسلسل‬ ‫لمختلف المكونات‪ :‬من اقراص و اجسام قاعدية ثم معالق ‪ ،‬ثم خيط‪.‬‬ ‫هذه هي قوة البروتون الدافعة المسؤولة عن التدوير (آلية غير واضحة تماما)‪ .‬يعني ان تدرج البروتون‬ ‫يتشتت الى حلقتين تزود بالطاقة الضرورية للدوران‪.‬‬ ‫ال يبدو ان ثالثي الفوسفات األدينوسين مندرجا ضمن عملية دوران السوط‪.‬‬ ‫حسب اتجاه دوران السوط‪ ،‬ال تتطلب البكتيريا الطريقة نفسها‪:‬‬

‫‪ -1‬عكس عقارب الساعة ‪ ،CCW‬تتقدم البكتيريا ملتفة بشكل طفيف حول نفسها‪.‬‬ ‫‪ -2‬في اتجاه عقارب الساعة ‪ ، CW‬تقوم البكتيريا بحركة الشقلبة و تغير االتجاه لتبدأ مع السياط الملتفة‬ ‫‪.CCW‬‬ ‫مالحظة‪ :‬بالنسبة ألنظمة بيريتريش‪ :‬في الحركة‪ ،‬تتجمع السياط خلف االجسام البكتيرية (مثل مجس‬ ‫الحبار)‪ .‬و من اجل تغيير االتجاه‪ ،‬تتشتت السياط حول االجسام البكتيرية و تتشقلب البكتيريا‪.‬‬ ‫‪ 3.10.2‬وظائف السوط‪:‬‬ ‫التنقل‪:‬‬ ‫الكشف حول االوساط شبه جيلوسية (االنتشار في الجيلوس) او حول الوسط الصلب (اجتياح سطح‬ ‫صفيحة االستنبات مثل‪ :‬بروتو)‪.‬‬ ‫دور االستضداد ‪ :‬تحدد المستضدات السوطية (‪ )Ag H‬أمصال مختلفة (مثل‪ :‬مصل سالمونيال)‪ .‬تلتصق‬ ‫البكتيريا و تشل عن الحركة بوجود االجسام المضادة الموافقة لمستضدتها السوطية ‪.Ag H‬‬ ‫تكمن الخاصية المستضدة في عدد و تسلسل االحماض اآلمنية للسوط‪.‬‬ ‫تثبيت الجراثيم العاثية‪ :‬ذ‬ ‫ان السياط هي مكان تثبيت بعض الجراثيم العاثية‪.‬‬ ‫االنجذاب الكيميائي‪:‬‬ ‫تجذب بعض المواد بكتيريا متحركة ‪ ،‬و تطرد البكتيريا األخرى‪.‬‬ ‫نميز حسب تركيبة المستنبت مسارين‪:‬‬

‫‪Traduit par Mlle Benarib R. : [email protected]‬‬

‫المسافات طويلة‪ ،‬و تشقلب قليل‪ .‬اتجاه‬ ‫واضح وفقا لتدرج المواد الجاذبة او‬ ‫الطاردة‪.‬‬

‫الحركات خطية‪ .‬هناك العديد من التشقلبات‪ .‬و‬ ‫ال يوجد اتجاه واضح ال ينسحب‪ ،‬بانعدام‬ ‫التدرج‪ .‬و هنا المستنبت محايد‪.‬‬

‫‪ 11.2‬البوغ‪:‬‬ ‫عبارة عن بنى المقاومة تتشكل بواسطة بعض البكتير يا في الظروف غير المالئمة‪ .‬اذ تسمح للبكتيريا‬ ‫البوغية بالعيش في ظروف صعبة و قاسية‪.‬‬ ‫تدعى البكتيريا المعروفة بتشكيل االبواغ الداخلية بالعصيات‪ ،‬و كلوستريدبوم‪ ،‬سبوروساركينا‪ .‬و هي‬ ‫بكتيريا موجبة الغرام‪ .‬اما النوع االخر فهي قادرة على التبوغ‪.‬‬ ‫الكشف‪ :‬تصبح االبواغ مرئية عند تلوين الغرام‪ ،‬حيث تبدو مثل مجاالت فارغة داخل البكتيريا‪ .‬و فقط‬ ‫خطوط البوغ العريضة تبدو ملونة‪ .‬و برصد الشكل و الحركة‪ ،‬تبدو االبواغ كتال صغيرة متكسرة داخل‬ ‫البكتيريا او حرة داخل الوسط‪.‬‬ ‫هناك عمليات تلوين خاصة تقوم على خاصية الحمض الكحولي المقاوم الخاص باالبواغ‪.‬‬ ‫مثل ‪ :‬تلوين بأخضر الملكيت‪ ،‬تلوين بينتيو‪ .‬بعد تلوين عكسي بواسطة اللون االرجواني‪ ،‬تبدو االبواغ‬ ‫خضراء في بكتيريا زهرية اللون‪.‬‬

‫تلوين الغرام‬ ‫كلوستريديوم البوغ‬

‫تلوين الغرام‬

‫تلوين بأخضر الملكيت‬ ‫عصية البوغ‬

‫‪ 2.11.2‬الشكل‪:‬‬ ‫ان االبواغ عبارة عن وحد ات بيضوية او كروية الشكل‪ .‬يمكن ان تغير شكل االجسام البكتيرية‪ .‬وضعيتها‬ ‫في الخلية متغيرة‪ ،‬مركزية او طرفية او شبه طرفية‪ .‬و هي تساهم في تحديد البكتيريا‪.‬‬ ‫قد يكون البوغ حرا او مقيدا‪ .‬و قد تمت االبحاث حول هذه الخصائص في مجال تصنيفي‪.‬‬

‫‪Traduit par Mlle Benarib R. : [email protected]‬‬

‫‪ 3.11.2‬البنية‬

‫بنية البوغ الداخلي للعصية الجمرية (‪)× 150000‬‬

‫للبوغ جدار و غشاء بالزمي محدد للخلية النباتية‪ .‬و ان الغالف الخارجي رقيق جدا يدعى بالبوغ‬ ‫الخارجي‪ .‬نجد ايضا تحت البوغ الخارجي رداء مكونا من عدة مطويات بروتينية‪ ،‬حيث تكمن القشرة‬ ‫تحت الرداء تماما‪ .‬و في االخير البرتوبالست (السيتوبالست) او قلب البوغ يحتوي على الريبوزوم و‬ ‫قفيصة نووية و انزيمات غير نشطة‪.‬‬ ‫التركيبة الكيميائية‪ :‬يتكون البوغ الخارجي للعصية الجمرية مثال من البروتين و االوزامين و متععد‬ ‫السكريات المحايد‪.‬‬ ‫كما يحتوي على العديد من االنزيمات الضرورية لالنبات و التفاعل مع الخاليا الثوية مثل البالعم‪.‬‬ ‫ان الرداء من طبيعة بروتينية يتكون حسب النوع من‪ :‬البروتينات المترسبة في الكيراتين عند عصية‬ ‫سيروس او مادة الكوالجين عند عصية سيبتيليس‪ .‬كما يحتوي على االنزيمات الضرورية لالنبات‪.‬‬ ‫تتكون القشرة من البيبتيدغليكان و هي مختلفة عن قشرة الجدار مع جسور البيبتيد الداخلية ألن ‪ %50‬من‬ ‫‪( NAM‬مستبدلة ببقايا ‪.)MAL‬‬

‫‪Traduit par Mlle Benarib R. : [email protected]‬‬

‫يفتقر البروتوبالست للماء‪ ،‬و يحتوي على انزيمات داخلية و ديبيكولينات الكلسيوم التي تثبت ‪ADN‬‬ ‫الكروموزومي للبوغ‪ .‬و يحتوي ايضا على بروتينات حمضية تتثبت في التركيز العالي على ‪ADN‬‬ ‫لحمايته‪ .‬كما نجد ايضا انزيمات اصالح ‪ ADN‬اثناء االنبات‪.‬‬ ‫‪ 3.11.2‬ظاهرة تكوين و تحرير االبواغ‪:‬‬ ‫تسبب الظروف غير المواتية للنمو في عملية تكوين و تحرير االبواغ او غياب انباتها‪ ,‬فهي تمثل االنتقال‬ ‫من الشكل النباتي الى الشكل البوغي‪.‬‬ ‫تستغرق هذه الظاهرة ‪ 10,5‬ساعة تقريبا عند عصية ميغاتريوم‪.‬‬ ‫و تعزز بواسطة استنفاذ الوسط في المادة المغذية و قد تطلب شروطا خاصا‪ :‬وجود االكسجين من اجل‬ ‫الكلوستريديوم‪ ،‬وجود االكسجين من اجل العصيات الجمرية‪ .‬و تبدأ هذه العملية عند انتهاء مرحلة النمو‬ ‫اآلسي و هي تمر بستة مراحل‪:‬‬ ‫المرحلة ‪ :1‬تكوين الخيط المحوري‪ :‬ليس االنقسام النووي تابعا لالنقسام الخلوي‪ ،‬اذ تندمج الجينتين بانتاج‬ ‫خيط محوري ملون‪.‬‬ ‫المرحلة ‪ :2‬تنقسم كال الجينتين في نفس الوقت الذي تتعلق فيه الغشاء السيتوبالزمي لدى قطب الخلية‬ ‫ليشكل حاجزا عن عملية تكوين االبواغ الذي يقسم الخلية الى جزأين غير متساويين‪ .‬يغلف هذا الحاجز‬ ‫السيتوبالزم الجزء االصغر ليكون بوغا اوليا‪.‬‬ ‫المرحلة ‪ :3‬تبرعم البوغ االولي‬ ‫المرحلة ‪ :4‬بين كال الغشاءين بتحديد البوغ االولي ‪ ،‬يتشكل الحاجز البوغي ثم تظهر القشرة بسرعة‪.‬‬ ‫المرحلة ‪ :5‬ظهور الرداء و النضوج‬ ‫المرحلة ‪ :6‬تتحلل الخلية النباتية و تحرر البوغ‪.‬‬

‫‪Traduit par Mlle Benarib R. : [email protected]‬‬ ‫‪ 5.11.2‬الخصائص‪:‬‬ ‫للبوغ خصائص جديدة مقارنة بالخلية النباتية‪:‬‬ ‫يسمح البوغ في الطبيعة (ظروف طبيعية) بمقاومة نقص المياه و الغذاء‪.‬‬ ‫تم الكشف عن الخصائص التالية‪:‬‬ ‫ مقاومة الحرارة‪ :‬يقاوم البوغ درجات الحرارة ‪ °80-°70‬لمدة ‪ 10‬دقائق او اكثر‪ .‬تكون هذه‬‫الخاصية بوجود حمض الديبيكولين‪ ،‬جفاف البوغ و بوجود البروتينات ‪( SASP‬بروتينات‬ ‫صغيرة خاصة باالحماض و المحاليل القادرة على تثبيت ‪)ADN‬‬ ‫ مقاومة المفاعالت الفيزيائية و الكيميائية‪ :‬يقاوم البوغ االشعة ما فوق البنفسجية‪ ،‬و اشعة غاما‬‫(كلسيوم و ‪ .)SASP‬و مقاوم الجدار المضاد‪ ،‬المطهرات‪ ،‬المضادات الحيوية (الرداء)‪.‬‬ ‫ تركيبة المضادات الحيوية‪ :‬تركب بعض البكتيريا مضادات حيوية بداية مرحلة عملية تكوين‬‫البوغ‪ .‬مثال‪ :‬عصية ليشونيفورميس يركب باسيتراسين‪ ،‬عصية بوليميكسا 'البوليمكسين'‪ .‬مادة‬ ‫التوكسين السامة (سموم داخلية لكلوسترديوم المطثية) او المواد ذات المبيدات الحيوية للحشرات‬ ‫(السموم قاتلة الحشرات)‪ ،‬االجسام الشبه بوغية الخاصة بعصية ثيرينجينيس و عصية‬ ‫سفاريكوس‪ .‬و هو كرستال بروتيني‪ ،‬فعندما تبتلعه الحشرات‪ ،‬يمر الى المعي و يتلف االيبيثيليوم‪.‬‬ ‫‪ -‬يمر البيبتيد المتفسخ من البروتياس في الدم و يعزز من الشلل ثم موت الحشرة‪.‬‬

‫كرستال شبه بوغي خاص بمسبب لمرض الحشرات (عصية ثيرينجينيس)‬

‫‪ 5.11.2‬االنبات‬ ‫من اجل انبات البوغ‪ ،‬ينبغي وجوده في ظروف مالئمة‪ :‬الماء‪ ،‬االغذية‪ ،‬االس الهيدروجيني‪ ،‬القوة‬ ‫االيرونية‪ ،‬درجة الحرارة المالئمة‪ ،‬عدم وجود اي مضاد ميكروبي‪.‬‬ ‫و يوضع في ظروف مالئمة (ماء الغلوكوز و احماض امنية)‪ ،‬يلد البوغ خلية نباتية‪ .‬و منه نستنتج ثالثة‬ ‫مراحل في عملية االنبات‪.‬‬ ‫النشاط‪ :‬يرتبط بجرح الغالف البوغي عن طريق المفاعالت الفيزيائية (صدمة حرارية) او الفيزيائية‬ ‫(االحماض و الليزوزيم‪ )...‬او اآللية (التآكل‪ ،‬الصدمة)‪.‬‬ ‫مالحظة‪ :‬يتم النشاط الحراري في صالح عملية التعقيم التي تتمثل في تسخين الجسم االتي تعقيمه ثالث‬ ‫مرات‪ 30 :‬د على ‪( °60‬هدم االشكال النباتية و التسبب في انبات االبواغ)‪ ،‬التسخين الثاني على ‪ °60‬في‬ ‫‪ 30‬د يقتل االبواغ الناجمة عن االنبات و يتسبب في انبات ابواغ باقية‪ .‬اما التسخين الثالث في نفس‬ ‫الظروف يهدم االشكال النهائية للنباتات‪.‬‬ ‫ف البداية تكمن في وجود الظروف المالئمة للري و التمثيل الغذائي (أالنين مغنيزيوم ادينوسين‪ )..‬التي‬ ‫تخترق االغلفة المتأثرة‪ .‬تحلل االنزيمات المائية مكونات البوغ‪ ،‬فهناك تحرر للديبيكولين الكلسيوم‪ .‬و تتلف‬ ‫القشرة و يتشرب البوغ الماء و ينتفخ‪.‬‬

Traduit par Mlle Benarib R. : [email protected] .‫ بفضل تغيير االغلفة‬:‫نشوء خلية نباتية جديدة‬