Mikroenkapsulasi Ekstrak Ganoderma lucidum Serta Analisis Kadar Polisakarida, Terpenoid dan Aktivitas Antioksidan dengan Metode ABTS dan FRAP Disusun oleh : Erlin Dwi Astuti (16307141023) Nur Isna Melati Putri (16307141025)
PROGRAM STUDI KIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS NEGERI YOGYAKARTA 2018
TUJUAN 1.
• Menganalisis fisikokimia dari ekstrak Ganoderma lucidum
2.
• Menganalisis kandungan polisakarida dan terpenoid dalam ekstrak Ganoderma lucidum
3.
• Menganalisis aktivitas antioksidan dalam ekstrak Ganoderma lucidum
Ganoderma lucidum
– mengandung 26-28% karbohidrat, – 3-5% lemak kasar, – 59% serat kasar, dan 7-8% protein kasar.
– Triterpen dan polisakarida adalah komponen utama yang aktif secara fisiologis (Boh et al., 2007; Zhou et al., 2007).
Keuntungan: • Produk akan menjadi kering tanpa menyentuh permukaan logam yang panas, • Temperatur produk akhir rendah walaupun temperatur pengering relatif tinggi, • Waktu pengeringan singkat • Produk akhir berupa bubuk stabil.
Radikal bebas merupakan molekul atau senyawa yang dapat berdiri sendiri yang mempunyai elektron tidak berpasangan, oleh karena itu bersifat sangat reaktif dan tidak stabil (Sayuti dan Yenrina, 2015)
Antioksidan adalah senyawa pemberi elektron (electron donors). Antioksidan mampu menangkal atau meredam dampak negatif oksidan dalam tubuh (Sayuti dan Yenrina, 2015).
.
Ekstraksi
Polisakarida & Terpenoid
Analisis fisikokimia
Aktivitas antioksidan
Uji kandungan polisakarida Inkubasi air mendidih
Sampel 1 ml
Phenol 5%
Inkubasi air mendidih
H2SO4 2,5 ml
Inkubasi suhu ruang
Ukur Absorbansi pada 490 nm
Uji kandungan terpenoid 0,2 ml sampel
0,4 ml vanillin asetat
0,5 ml asam asetat glasial
Inkubasi suhu ruang
Ukur absorbansi pada 548 nm
1 ml perchloric acid
Inkubasi dalam waterbath
Analisis Fiskokimia
Kadar air
pH
SEM
Uji aktivitas antioksidan dengan metode FRAP Prinsip uji FRAP adanya reduksi ion ferri (Fe3+) menjadi ion ferro (Fe2+) oleh senyawa antioksidan dengan reaksi sebagai berikut (Jayanthy, 2011): K3Fe(CN)6 + A-OH→K4Fe(CN)6 + H+ + A=O
Kelebihan - metodenya yang murah - cepat
- reagen yang digunakkan cukup sederhana serta tidak menggunakan alat khusus untuk menghitung total antioksidan.
Uji aktivitas antioksidan dengan metode FRAP 1,25 ml sampel
0,25 ml buffer fosfat
1,25 ml potassium ferricyanide
Sentrifuge 3000 rpm
1,25 ml TCA
Inkubasi dalam incubator shaker
1,25 ml supernatant + 1,25 ml aquades + 0,25 ml FeCl3
Inkubasi suhu ruang
Ukur absorbansi pada 700 nm
Uji aktivitas antioksidan dengan metode ABTS
Pengenceran sampel pada 5 titik konsentrasi
Sampel 150 μl
Inkubasi suhu ruang
2850 μl ABTS
Ukur absorbansi pada 734 nm
Hasil dan Pembahasan
Uji Polisakarida Sampel
Ekstrak LZ A1 Ekstrak LZ A2 Ekstrak LZ A3 Ekstrak LZ B1 Ekstrak LZ B2 Ekstrak LZ B3 Ekstrak LZ C1 Ekstrak LZ C2 Ekstrak LZ C1 Spraydrying LZ A1 Spraydrying LZ A2 Spraydrying LZ A3 Spraydrying LZ B1 Spraydrying LZ B2 Spraydrying LZ B3 Spraydrying LZ C1 Spraydrying LZ C2 Spraydrying LZ C3 Laktosa 1 Laktosa 2 Laktosa 3
Abs
0.561 0.558 0.560 0.490 0.476 0.484 0.580 0.596 0.566
0.597 0.63 0.635 0.584 0.509 0.522 0.562 0.591 0.53 0.24 0.223 0.276
Kadar polisakarid a (dalam satuan gram per 100 gram -> % b/b) 10.4127018 10.3550669 10.3934901 9.04867626 8.77971348 8.9334065 10.7777227 11.0851087 10.5087599 206.59297 218.38807 220.175206 201.946415 175.139369 179.785923 194.083015 204.448406 182.645342 78.9914296 72.9151658 91.8588118
10.38709
8.920599
10.79053
215.0521
185.6239
193.7256
81.25514
Uji Terpenoid
Cstok (ppm) Sampel Ekstrak LZ A1 Ekstrak LZ A2 Ekstrak LZ B1 Ekstrak LZ B2 Ekstrak LZ C1 Ekstrak LZ C2 Serbuk LZ A1 Serbuk LZ A2 Serbuk LZ B1 Serbuk LZ B2 Serbuk LZ C1 Serbuk LZ C2
Abs 0.493 0.498 0.523 0.58 0.562 0.551
0.347 0.388 0.364 0.353 0.345 0.335
7000 7000 7000 7000 7000 7000 10000 10000 10000 10000 10000 10000
C (gram per C rerata (% 100 gram -b/b) > %b/b) 0.48871542 0.49343457 0.51703034 0.57082867 0.55383972 0.54345759 0.18484423 0.20522781 0.19329596 0.18782719 0.18384991 0.17887831
0.4911 0.5439 0.5486 0.1950 0.1906 0.1814
Hasil uji ABTS Ekstrak Lingzhi Sampel
Konsentrasi (ppm)
Rata-rata Abs
% Inhibisi
Tabung 1
5000 4000 3000 2000 1000 5000 4000 3000 2000 1000 5000 4000 3000 2000 1000
0.280 0.353 0.467 0.638 0.870 0.329 0.330 0.483 0.669 0.861 0.297 0.249 0.406 0.624 0.830
73.968 67.111 56.531 40.645 19.051 69.376 69.314 55.073 37.760 19.888 72.386 76.823 62.209 41.917 22.743
Tabung 2
Tabung 3
Axis Title
% Inhibisi 90.000 80.000 70.000 60.000 50.000 40.000 30.000 20.000 10.000 0.000
y = 0.0136x + 10.571 R² = 0.9554
% Inhibisi Linear (% Inhibisi)
0
% Inhibisi
1000 2000 3000 4000 5000 6000
Axis Title
Axis Title
% Inhibisi
y = 0.0131x + 11.123 R² = 0.9309
% Inhibisi Linear (% Inhibisi)
0
100.000
y = 0.0134x + 14.958 R² = 0.8819
80.000
Axis Title
90.000 80.000 70.000 60.000 50.000 40.000 30.000 20.000 10.000 0.000
60.000 40.000
% Inhibisi
20.000
Linear (% Inhibisi)
0.000 0
2000
4000
Axis Title
6000
2000
4000
Axis Title
6000
Hasil Uji ABTS Spray drying Ekstrak Lingzhi Sampel Tabung 1
Tabung 2
Tabung 3
Konsentrasi (ppm) 5000 4000 3000 2000 1000 5000 4000 3000 2000 1000 5000 4000 3000 2000 1000
Rata-rata 0.362 0.450 0.583 0.717 0.893 0.334 0.438 0.559 0.715 0.881 0.347 0.415 0.515 0.712 0.915
% Inhibisi 66.179 57.996 45.551 33.043 16.646 68.855 59.147 47.791 33.261 17.735 67.642 61.232 51.929 33.572 14.592
Axis Title
% Inhibisi 90.000 80.000 70.000 60.000 50.000 40.000 30.000 20.000 10.000 0.000
y = 0.0136x + 10.571 R² = 0.9554
% Inhibisi Linear (% Inhibisi)
% Inhibisi 0
1000
2000
3000
4000
5000
6000
Axis Title
Axis Title
Axis Title
% Inhibisi
90.000 80.000 70.000 60.000 50.000 40.000 30.000 20.000 10.000 0.000
y = 0.0131x + 11.123 R² = 0.9309
% Inhibisi Linear (% Inhibisi)
0
2000
4000
Axis Title
90.000 80.000 70.000 60.000 50.000 40.000 30.000 20.000 10.000 0.000
y = 0.0134x + 14.958 R² = 0.8819
% Inhibisi Linear (% Inhibisi)
0
2000
4000
Axis Title
6000
6000
Hasil Uji FRAP Ekstrak Lingzhi
Cstok (ppm) Sampel Ekstrak LZ A1 Ekstrak LZ A2 Ekstrak LZ B1 Ekstrak LZ B2 Ekstrak LZ C1 Ekstrak LZ C2
C (gram per 100 C rerata (% gram --> b/b) %b/b)
Abs
0.742 0.785 0.613 0.61 0.555 0.597
5000 5000 5000 5000 5000 5000
2.727164 2.884952 2.2538 2.242792 2.04097 2.195088
2.8061 2.2483 2.1180
Hasil Uji FRAP Spray drying Ekstrak Lingzhi
Cstok (ppm) Sampel Serbuk LZ A1 Serbuk LZ A2 Serbuk LZ B1 Serbuk LZ B2 Serbuk LZ C1 Serbuk LZ C2
C (gram per 100 C rerata gram --> (% b/b) %b/b)
Abs
0.728 0.741 0.646 0.698 0.671 0.668
5000 5000 5000 5000 5000 5000
2.876462 2.927743 2.552998 2.758122 2.651616 2.639781
2.9021 2.6556 2.6457
Hasil % Kadar Air dari Ekstrak Lingzhi Massa Serbuk Ekstrak Lingzhi Pengulangan % Kadar Air Temperatur (⁰C) Waktu (menit) 1 gram 1 gram 1 gram
1 2 3
Rata-rata kadar air
19.45% 15.53% 15.67%
105 105 105
12 13.1 16.5
Kecepatan Pengeringan (%/menit) 0.02 0.02 0.05
16.88%
Hasil % Kadar Air dari Serbuk Kering Ekstrak Lingzhi Massa Serbuk Ekstrak Lingzhi Pengulangan % Kadar Air Temperatur (⁰C) Waktu (menit) 0.505 gram 0.502 gram 0.503 gram Rata-rata kadar air
1 2 3
11.71% 10.00% 10.24% 10.65%
105 105 105
5.4 4.7 5.4
Kecepatan Pengeringan (%/menit) 0.02 0.02 0.05
Uji pH
No 1 2 3
Hasil Pengamatan Pengukuran pH Sampel pH Sampel Padat Ekstrak Lingzhi 4.74 Sampel Serbuk Ekstrak Lingzhi 4.69 Laktosa 3.64
Hasil SEM Spray Drying Ekstrak Lingzhi
Spray drying dengan pembesaran 5.000
• Membentuk partikel berbentuk bulat dengan ukuran yang berbedabeda. • Permukaan partikel halus dan tidak rata. • Terdapat retakan pada partikel tersebut.
Hasil Uji SEM Laktosa
Laktosa dengan pembesaran 5.000
• Partikel berbentuk pipihan dan memiliki ukuran berbeda. • Permukaan partikel kasar dan tidak rata.