Microscopio
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- Words: 1,298
- Pages: 8
9/13/2009
1. 2.
CIBI 3031L Samuel Prieto [email protected]
3.
Diferenciar entre microscopio de luz y microscopio electrónico. Conocer las distintas partes del microscopio y sus funciones. funciones Entender los conceptos de resolución, parafocal, profundidad de campo, magnificación y campo visual
Microscopio simple de Leeuwenhoek
Antoni
van Leeuwenhoek:
• Microscopio simple • Descubrimiento de los microorganismos
(“animálculos” 1675) (“ i ál l ” en gota t de d estanque, t • Describe bacterias (1683) • Describe protozoos (Giardia)
1
9/13/2009
Robert Hooke: • Microscopio compuesto • Describe hongos filamentosos (1667)
Primeros dibujos de bacterias (Leeuwenhoek, 1683) Microscopio compuesto de Robert Hooke
Los especímenes biológicos pueden ser muy pequeños. Por esa razón, frecuentemente usamos un instrumento óptico que amplía la imagen, llamado microscopio. Existen muchos tipos de microscopios: de luz, electrónico, de contraste de fase, de luz ultravioleta, de fluorescencia. Los de uso más común son: el microscopio de luz y el microscopio electrónico.
Este instrumento magnifica y enfoca los rayos de luz por medio de lentes. Los rayos de luz pueden ser naturales o artificiales. El microscopio de disección o estereoscopio se usa para estudiar especímenes en tres dimensiones y a baja magnificación. La fuente de luz está sobre el especimen. El microscopio compuesto se usa para estudiar porciones pequeñas y finas de especímenes en cortes longitudinales o transversales. Tiene diferentes magnificaciones y se puede apreciar más detalles. La fuente de luz está debajo del espécimen.
2
9/13/2009
Ocular - La función del ocular es aumentar la imagen formada por el objetivo. Algunos oculares presentan un punto que sobresale en el campo microscópico. Este es un indicador que se usa para facilitar la posición de algún punto específico en su observación. Este indicador se mueve haciendo girar el lente ocular.
La magnificación total del microscopio se puede determinar multiplicando la magnificación del objetivo por el ocular. j Objetivo
Magnificación objetivo
Magnificación ocular
Magnificación total
Rastreo
4X
10X
40X
Baja potencia
10X
10X
100X
Alta potencia
40X
10X
400X
y
y
y
y
Objetivo de rastreo (4X): Se observa el especimen completo. Se usa para encontrar imagen. Objetivo de baja potencia (10x): Se usa para enfocar la imagen Objetivo de alta potencia (40x): Se usa para ver la imagen, con mayores detalles. Objetivo de inmersión de aceite (100x): Se usa con aceite, el mismo se añade antes de cambiar de objetivo.
Lámpara: El microscopio está provisto de una fuente de luz eléctrica. Condensador: Es un lente colocado debajo de la platina, cuya función es convertir los rayos divergentes de luz en una corriente paralela de rayos que atraviesan el objetivo estudiado.
3
9/13/2009
Diafragma: Instrumento mecánico colocado debajo del condensador, regula la cantidad de luz que pasa a través del objeto a observarse.
Tornillo Macrométrico: Es el tornillo de mayor tamaño. tamaño Está ubicado en la parte superior del microscopio. Se usa con los objetivos de 4x y 10x. Tornillo Micrométrico:Este se utiliza para movilizar la platina a distancias muy pequeñas, por lo tanto se utiliza principalmente para afinar el enfoque. Unico a usarse cuando observamos objetos con el objetivo de magnificación alta. Da un enfoque preciso de la imagen, se usa con los objetivos de 40x y 100x.
un microscopio parafocal todo lo que hay que hacer es girar el revólver hasta que el objetivo de alta potencia esté en posición y ya la imagen estará enfocada.
Platina: Está colocada debajo de los objetivos y se utiliza para colocar las laminillas. Ajustadores de platina: Dan movimiento al carro mecánico. Ganchos o carro mecánico: Colocados sobre la platina para sujetar la laminilla en la posición correcta. Brazo: Apoya la parte superior y provee para su manejo. Base: Parte inferior por donde se sujeta para su cargado.
En
Si
el microscopio no es parafocal, se debe aumentar la distancia entre el objetivo y la laminilla antes de girar el revólver para que el objetivo no vaya a chocar con la laminilla. Entonces se coloca en el objetivo en posición y se vuelve a enfocar la imagen.
Este instrumento utiliza rayos de electrones que se magnifican y se enfocan en una placa fotográfica por medio de lentes electromagnéticos (imanes). Tipos de microscopios electrónicos • Transmisión: usado para
observar detalles internos.
• Rastreo o “scanning”: usado
para estudiar la superficie de la muestra.
4
9/13/2009
Microscopio de luz
Microscopio electrónico
Los lentes del microscopio se deben limpiar siempre antes y después de usarse con pape e te papel de lente. La laminilla a examinarse debe colocarse encima de la platina, centralizando el área del cubreobjetos en la abertura de la misma.
1.
Fuente de iluminación: luz
2.
Lentes: de cristal
3.
Resolución*: 0.1 µm
1. Fuente: rayo de electrones 2. Lentes: electromagnéticos 3. Resolución: 10Å (1Å = 0.1nm) 4. Magnificación hasta 1,000,000x
4.
Magnificación hasta 2,000x
5.
La muestra puede estar viva o muerta
6.
Muestra: se observa directamente 7. Costo: $20,000.00 a $250,000.00
7.
Costo: $50.00 hasta varios miles
5. Debe estar muerta y deshidratada 6. Muestra : se observa mediante pantalla
Se enciende el microscopio, se coloca el objetivo de baja potencia en posición y se mira p por el ocular intentando localizar la imagen en el área observada la cual llamamos el campo visual.
*Resolución: capacidad de distinguir dos objetos que están muy cerca.
Coloque
la laminilla en la plataforma en la misma posición que la observó.
Enfoque
con el objetivo 4X. (Para enfocar coloque el lente 4X. Utilice el macrómetro mediante girarlo suavemente mientras observa la imagen. Cuando obtenga una imagen nítida no mueva más el tornillo).
Mientras
observa a través del microscopio, mueva la laminilla hacia la izquierda. q
¿Hacia
dónde se mueve la imagen?
5
9/13/2009
Luego Mueva
la laminilla hacia abajo.
¿Hacia
dónde se mueve la imagen?
de enfocar la laminilla de la letra “e” utilizando el lente 4X, cambie el lente al 10X girando el revólver.
La
imagen debe permanecer enfocada. Si necesita aclarar más la imagen utilice solamente el tornillo de ajuste micrómetro.
Dibuje
la imagen que observa en el campo visual.
Cambie La
ahora del objetivo 10X al 40X.
imagen debe permanecer en foco.
Si
necesita aclarar más la imagen g utilice solamente el tornillo de ajuste micrómetro.
Dibuje la imagen que observa en el campo visual.
Al
examinar un espécimen en el microscopio no siempre se puede enfocar todo de una vez debido a su espesor y profundidad.
Por tanto, se hace necesario enfocar ciertas secciones en distintas alturas.
6
9/13/2009
Obtenga
colores.
una laminilla fija con hilos de Según
Usando
el objetivo de menor aumento (10X) localice el punto donde los tres hilos se cruzan. cruzan
Determine
el orden de los hilos en su laminilla de arriba hacia abajo enfocando con el tornillo macrométrico.
Los lentes del microscopio se deben limpiar siempre antes y después de usarse con papel de lente. La laminilla a examinarse debe colocarse encima de la platina, centralizando el área del cubreobjetos en la abertura de la misma.
vaya enfocando, usted verá que los diferentes hilos enfocan a diferente nivel.
U Un
hilo o o pa parte te de u un hilo o está e en foco oco mientras que los otros se verán empañados.
Enfocando
hacia arriba y hacia abajo los hilos, usted puede percibir la profundidad de foco que no es evidente cuando el foco se deja en un mismo punto.
Se enciende el microscopio, se coloca el objetivo de baja potencia en posición y se mira i por ell ocular l intentando localizar la imagen en el área observada la cual llamamos el campo visual.
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1. 2.
CIBI 3031L Samuel Prieto [email protected]
3.
Diferenciar entre microscopio de luz y microscopio electrónico. Conocer las distintas partes del microscopio y sus funciones. funciones Entender los conceptos de resolución, parafocal, profundidad de campo, magnificación y campo visual
Microscopio simple de Leeuwenhoek
Antoni
van Leeuwenhoek:
• Microscopio simple • Descubrimiento de los microorganismos
(“animálculos” 1675) (“ i ál l ” en gota t de d estanque, t • Describe bacterias (1683) • Describe protozoos (Giardia)
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9/13/2009
Robert Hooke: • Microscopio compuesto • Describe hongos filamentosos (1667)
Primeros dibujos de bacterias (Leeuwenhoek, 1683) Microscopio compuesto de Robert Hooke
Los especímenes biológicos pueden ser muy pequeños. Por esa razón, frecuentemente usamos un instrumento óptico que amplía la imagen, llamado microscopio. Existen muchos tipos de microscopios: de luz, electrónico, de contraste de fase, de luz ultravioleta, de fluorescencia. Los de uso más común son: el microscopio de luz y el microscopio electrónico.
Este instrumento magnifica y enfoca los rayos de luz por medio de lentes. Los rayos de luz pueden ser naturales o artificiales. El microscopio de disección o estereoscopio se usa para estudiar especímenes en tres dimensiones y a baja magnificación. La fuente de luz está sobre el especimen. El microscopio compuesto se usa para estudiar porciones pequeñas y finas de especímenes en cortes longitudinales o transversales. Tiene diferentes magnificaciones y se puede apreciar más detalles. La fuente de luz está debajo del espécimen.
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9/13/2009
Ocular - La función del ocular es aumentar la imagen formada por el objetivo. Algunos oculares presentan un punto que sobresale en el campo microscópico. Este es un indicador que se usa para facilitar la posición de algún punto específico en su observación. Este indicador se mueve haciendo girar el lente ocular.
La magnificación total del microscopio se puede determinar multiplicando la magnificación del objetivo por el ocular. j Objetivo
Magnificación objetivo
Magnificación ocular
Magnificación total
Rastreo
4X
10X
40X
Baja potencia
10X
10X
100X
Alta potencia
40X
10X
400X
y
y
y
y
Objetivo de rastreo (4X): Se observa el especimen completo. Se usa para encontrar imagen. Objetivo de baja potencia (10x): Se usa para enfocar la imagen Objetivo de alta potencia (40x): Se usa para ver la imagen, con mayores detalles. Objetivo de inmersión de aceite (100x): Se usa con aceite, el mismo se añade antes de cambiar de objetivo.
Lámpara: El microscopio está provisto de una fuente de luz eléctrica. Condensador: Es un lente colocado debajo de la platina, cuya función es convertir los rayos divergentes de luz en una corriente paralela de rayos que atraviesan el objetivo estudiado.
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9/13/2009
Diafragma: Instrumento mecánico colocado debajo del condensador, regula la cantidad de luz que pasa a través del objeto a observarse.
Tornillo Macrométrico: Es el tornillo de mayor tamaño. tamaño Está ubicado en la parte superior del microscopio. Se usa con los objetivos de 4x y 10x. Tornillo Micrométrico:Este se utiliza para movilizar la platina a distancias muy pequeñas, por lo tanto se utiliza principalmente para afinar el enfoque. Unico a usarse cuando observamos objetos con el objetivo de magnificación alta. Da un enfoque preciso de la imagen, se usa con los objetivos de 40x y 100x.
un microscopio parafocal todo lo que hay que hacer es girar el revólver hasta que el objetivo de alta potencia esté en posición y ya la imagen estará enfocada.
Platina: Está colocada debajo de los objetivos y se utiliza para colocar las laminillas. Ajustadores de platina: Dan movimiento al carro mecánico. Ganchos o carro mecánico: Colocados sobre la platina para sujetar la laminilla en la posición correcta. Brazo: Apoya la parte superior y provee para su manejo. Base: Parte inferior por donde se sujeta para su cargado.
En
Si
el microscopio no es parafocal, se debe aumentar la distancia entre el objetivo y la laminilla antes de girar el revólver para que el objetivo no vaya a chocar con la laminilla. Entonces se coloca en el objetivo en posición y se vuelve a enfocar la imagen.
Este instrumento utiliza rayos de electrones que se magnifican y se enfocan en una placa fotográfica por medio de lentes electromagnéticos (imanes). Tipos de microscopios electrónicos • Transmisión: usado para
observar detalles internos.
• Rastreo o “scanning”: usado
para estudiar la superficie de la muestra.
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9/13/2009
Microscopio de luz
Microscopio electrónico
Los lentes del microscopio se deben limpiar siempre antes y después de usarse con pape e te papel de lente. La laminilla a examinarse debe colocarse encima de la platina, centralizando el área del cubreobjetos en la abertura de la misma.
1.
Fuente de iluminación: luz
2.
Lentes: de cristal
3.
Resolución*: 0.1 µm
1. Fuente: rayo de electrones 2. Lentes: electromagnéticos 3. Resolución: 10Å (1Å = 0.1nm) 4. Magnificación hasta 1,000,000x
4.
Magnificación hasta 2,000x
5.
La muestra puede estar viva o muerta
6.
Muestra: se observa directamente 7. Costo: $20,000.00 a $250,000.00
7.
Costo: $50.00 hasta varios miles
5. Debe estar muerta y deshidratada 6. Muestra : se observa mediante pantalla
Se enciende el microscopio, se coloca el objetivo de baja potencia en posición y se mira p por el ocular intentando localizar la imagen en el área observada la cual llamamos el campo visual.
*Resolución: capacidad de distinguir dos objetos que están muy cerca.
Coloque
la laminilla en la plataforma en la misma posición que la observó.
Enfoque
con el objetivo 4X. (Para enfocar coloque el lente 4X. Utilice el macrómetro mediante girarlo suavemente mientras observa la imagen. Cuando obtenga una imagen nítida no mueva más el tornillo).
Mientras
observa a través del microscopio, mueva la laminilla hacia la izquierda. q
¿Hacia
dónde se mueve la imagen?
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9/13/2009
Luego Mueva
la laminilla hacia abajo.
¿Hacia
dónde se mueve la imagen?
de enfocar la laminilla de la letra “e” utilizando el lente 4X, cambie el lente al 10X girando el revólver.
La
imagen debe permanecer enfocada. Si necesita aclarar más la imagen utilice solamente el tornillo de ajuste micrómetro.
Dibuje
la imagen que observa en el campo visual.
Cambie La
ahora del objetivo 10X al 40X.
imagen debe permanecer en foco.
Si
necesita aclarar más la imagen g utilice solamente el tornillo de ajuste micrómetro.
Dibuje la imagen que observa en el campo visual.
Al
examinar un espécimen en el microscopio no siempre se puede enfocar todo de una vez debido a su espesor y profundidad.
Por tanto, se hace necesario enfocar ciertas secciones en distintas alturas.
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9/13/2009
Obtenga
colores.
una laminilla fija con hilos de Según
Usando
el objetivo de menor aumento (10X) localice el punto donde los tres hilos se cruzan. cruzan
Determine
el orden de los hilos en su laminilla de arriba hacia abajo enfocando con el tornillo macrométrico.
Los lentes del microscopio se deben limpiar siempre antes y después de usarse con papel de lente. La laminilla a examinarse debe colocarse encima de la platina, centralizando el área del cubreobjetos en la abertura de la misma.
vaya enfocando, usted verá que los diferentes hilos enfocan a diferente nivel.
U Un
hilo o o pa parte te de u un hilo o está e en foco oco mientras que los otros se verán empañados.
Enfocando
hacia arriba y hacia abajo los hilos, usted puede percibir la profundidad de foco que no es evidente cuando el foco se deja en un mismo punto.
Se enciende el microscopio, se coloca el objetivo de baja potencia en posición y se mira i por ell ocular l intentando localizar la imagen en el área observada la cual llamamos el campo visual.
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