Microinforme10.docx

Universidad Nacional Autónoma de México. Facultad de Estudios Superiores Zaragoza.

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA CARRERA: QFB MICROBIOLOGÍA GENERAL I MULTIPLICACION BACTERIANA (REQUERIMIENTOS FISICIQUIMICOS).

GRUPO: 2652

ASESORA: QFB GEORGINA BERMEJO TORRES. EQUIPO: 9 ALUMNO: BECERRIL BONILLA JUAN SEMESTRE: 2019-2

MULTIPLICACION BACTERIANA (REQUERIMIENTOS FISICIQUIMICOS). Objetivos: Identificar las necesidades fisicoquímicas de los microorganismos observando cómo influyen estos en la multiplicación bacteriana. Diagramas de flujo:  Efecto de la temperatura

Inicio

Cepas: K. pneumoniae S.aureus E. coli C.equi

Dividir en cuatro partes ambas placas



Dos placas de medio de agar nutritivo.  Material: Asa bacteriológica.

En ambas placas sembrar por estría simple, en su respectivo cuadrante cada cepa.

Placa 1.Encubar a

Placa 2.Encubar a

37ºC por 48 horas.

25ºC por 48 horas.

Leer las placas e identificar si hubo o no crecimiento bacteriano.

Efecto del pH.

Inicio

Cepas: 9 pH 6 y pH  S.aureus P. vulgaris S. typhi E. coli

Dividir en cuatro partes ambas placas.

1 placa de medio agar nutritivo a pH 6. 1 placa de medio agar TCBS a pH 9. Materiales: Asa bacteriológica.

En ambas placas: sembrar por estría cerrada, en su respectivo cuadrante cada cepa.

Encubar ambas placas a 37ºC por 48 horas.

Leer las placas e identificar si hubo o no crecimiento bacteriano.

Requerimiento de oxigeno

Inicio

Cepas: E. coli   P. aeruginosa  spp Clostridium

 

Dividir las dos placas en tres zonas.

1 placa de medio agar tioglicolato. 1 placa de medio agar tioglicolato en caja Petri de plástico. Materiales: Asa bacteriológica.

En ambas placas: sembrar por estría cerrada, en su respectivo cuadrante cada cepa.

Placa 1.Encubar a una atmosfera sin oxígeno en una caja de anaerobiosis por 48 horas.

Placa 2.Encubar en aerobiosis a 37ºC por 48 horas.

Leer las placas e identificar si hubo o no crecimiento bacteriano.

 Efecto de la presión osmótica

Inicio

Cepas: C. equi  S. aureus E. coli  K. pneumoniae

Dividir las dos placas en cuatro zonas.

1 placa de medio agar nutritivo con 7.5% más de sal. 1 placa de medio agar nutritivo normal. Materiales: Asa bacteriológica.

En ambas placas: sembrar por estría cerrada, en su respectivo cuadrante cada cepa.

Encubar ambas placas a 37ºC por 48 horas.

Leer las placas e identificar si hubo o no crecimiento bacteriano.

 Efecto de la humedad

Inicio

Cepas: S. aureus E. coli

Sembrar ambos tubos de agar nutritivo uno con S. aureus y otro con E. coli.

En dos tubos se pone agar nutritivo con 3% de agar como baja humedad. 2 tubos con agar nutritivo. Materiales: Asa bacteriológica.

Sembrar S. aureus y E. Coli en agar nutritivo con 3% de agar con baja humedad.

Incubar los 3 tubos a 37ºC por 48 horas.

Comparar el desarrollo en ambos tubos.

Resultados Efectos de la temperatura (cuadro 1)

Cepas bacteriana s utilizadas

Crecimiento de bacteriano a temperatur a ambiente Hubo crecimiento

Crecimiento bacteriano a temperatur a de 37 grados Hubo crecimiento

S.aureus

Hubo crecimiento

Hubo crecimiento

E. coli

Hubo crecimiento

Hubo crecimiento

C.equi

Hubo crecimiento

Hubo crecimiento

k. Pneumoniae

Efectos del pH ( cuadro 2)

Crecimiento observado a temperatura ambiente de siembra de E. coli, K. pneumoniae , S. aureus, C. equi.

Crecimiento observado a 37 grados de siembra de E. coli, K. pneumoniae, S. aureusCequii.

Cepas bacteriana s utilizadas

Crecimient o bacteriano a pH 6

E. coli

hubo crecimient o

P. vulgaris

Hubo crecimient o

Hubo crecimient o Coloración amarilla

S.aureus

hubo crecimient o

hubo crecimient o coloración amarilla

Crecimient o moderado

No hubo crecimient o

S. thypi

Crecimient o bacteriano a ph 9 agar tcbs No hubo crecimient o

Crecimiento observado en el laboratorio a pH 6 después de incubar de E. coli y P. vulgaris

Crecimiento observado en laboratorio a pH 6 después de incubar de S. aureus. y S. typhi

Crecimiento observado en el laboratorio a pH 9 en agar tcbs después de incubar de E. coli y P. vulgaris

Crecimiento observado en el laboratorio a pH 9 en agar tcbs después de incubar de S. aureus y S. typhy

Requerimiento de oxigeno ( cuadro 3) Cepas utilizadas

Crecimiento bacteriano en agar triglicolato medio aerobio

Crecimiento bacteriano en agar triglicolato medio anaerobio

E. coli

Hubo crecimiento

Hubo crecimiento

P. aeruginosa

Hubo crecimiento

No hubo crecimiento

Clostridium spp

No hubo crecimiento

Hubo crecimiento

Efecto de la presión osmótica ( cuadro 4)

Crecimiento observado en laboratorio en agar triglicolato medio aerobio de E. coli, P. aeruginosa, clostridium spp

Crecimiento observado en laboratorio en agar triglicolato medio aanaerobio de E. coli, P. aeruginosa, clostridium spp

Cepas utilizadas

Crecimient o observado en agar nutritivo Hubo crecimiento

Crecimiento observado en agar nutritivo con 7.5 % de sal No hubo crecimiento

K. pneumoniae

Hubo crecimiento

No hubo crecimiento

S. aureus

Hubo crecimiento

Hubo crecimiento

E. coli

No hubo crecimiento

Crecimiento moderado

C. equi

Crecimiento observado en agar nutritivo en sembrado en cuadrantes de C. equi, K. pneumoniae, S. aureus, E. coli.

Crecimiento observado agar nutritivo sembrado con 7.5 % sal en cuadrantes de equi, K. pneumoniae, aureus, E. coli.

en en de C. S.

Efecto de la humedad ( cuadro 5) Cepas bacterianas utilizadas

Crecimiento bacteriano observado en agar nutritivo en tubo

Crecimiento observado en agar nutritivo en agar nutritivo 3 %

S. Aureus

Hubo crecimiento

Hubo crecimiento

E. Coli

Hubo crecimiento

Hubo crecimiento

Crecimiento bacteriano observado en agar nutritivo en tubo de S. aureus

Crecimiento bacteriano observado en agar nutritivo en tubo de E. coli

Crecimiento observado en agar nutritivo en agar nutritivo al 5 % de S. aureus

Crecimiento observado en agar nutritivo en agar nutritivo al 5 % de E. coli

Anáá lisis de resultádos Lás bácteriás párá que se multipliquen á demáá s de los nutrientes necesitán fáctores fisicoquíámicos oá ptimos, táles como: temperáturá, pH, tensioá n de oxíágeno, presioá n osmoá ticá y humedád. Es por ello que en lá presente prácticá se reálizáron siembrás de diferentes cepás, sometidás á váriáciones de los fáctores fisicoquíámicos yá mencionádos ánteriormente, con lá finálidád de identificár lás necesidádes fisicoquíámicás de los microorgánismos. Efecto de lá temperáturá. Lá pruebá de efecto de lá temperáturá se reálizo solo párá Dichás cepás k. pneumoniáe, S.áureus, E. coli, C.equi sembrádás por iguál en dos plácás de ágár nutritivo uná plácá se incubo á 37ºC y lá otrá se incubo á 25ºC, todás lás cepás incubádás crecieron en ámbás temperáturás, los dátos se encuentrán descritos en el cuádro 1. Se reporto como "hubo crecimiento" con báse en lá observácioá n de multiplicácioá n bácteriáná (crecimiento), y síá por el contrário está no presento dichá cárácteríásticá se reporto como no hubo crecimiento. Como se describe en el cuádro 1 lá cepá de K. pneumoniáe presento multiplicácioá n en ámbás temperáturás de incubácioá n. El resultádo se átribuye á que está bácteriá puede crecer á uná velocidád consideráble en un rángo de temperáturá que se hállá entre los 25º y 45ºC, siendo 37ºC lá temperáturá oá ptimá de crecimiento y multiplicácioá n. Esto no háce referenciá á que lá bácteriá solo se multiplique á esá temperáturá, si no que á 37ºC se multiplicá mejor y con máyor velocidád. En el cáso de E. coli y como se indicá en el cuádro 1 presento multiplicácioá n en ámbás temperáturás. Los resultádos obtenidos se deben á que dichá bácteriá tiene lá cápácidád de multiplicárse preferentemente á 37 ºC, pero esto no indicá que solo á esá temperáturá puedá multiplicárse, si no que es lá temperáturá optimá párá su crecimiento. A si de está mánerá se átribuye que crecioá á temperáturá ámbiente porque 25ºC estáá dentro de sus rángos de áceptácioá n. En el cáso de c. equi como se indicá en el cuádro 1 presento multiplicácion en ámbás temperáturás. Los resultádos obtenidos se deben á que dichá bácteriá tiene lá cápácidád de multiplicárse preferentemente á 37 ºC, pero esto no indicá que solo á esá temperáturá puedá multiplicárse, si no que es lá temperáturá optimá párá su crecimiento, áun que el rángo de está bácteriá puede váriár de 10°C á 45 °C que está dentro del rángo del crecimiento párá crecimiento á 25 °C. Párá S. áureus (con temperáturá oá ptimá de crecimiento de 35 á 40 °C.) Presentáron multiplicácioá n bácteriáná en ámbás temperáturás como se indicá en el cuádro 1 tánto á temperáturá de 37 °C, tánto á 25 °C, está bácteriá támbieá n puede crecer á 25 grádos yá que su rángo de crecimiento vá de 6.5 °C á 65 °C.

fecto del pH. Se reálizo lá pruebá de multiplicácioá n bácteriáná en relácioá n ál efecto del pH con E. coli , P. vulgáris, S. typhi y S. áureus. Se llevo á cábo en dos plácás; en ágár nutritivo pH6 y en ágár nutritivo pH 9 en medio tcbs Lá determinácioá n del efecto de pH, como se indicá en el cuádro 2,, cádá uná de lás bácteriá , P. vulgáris, S. áureus se multiplicáron en ámbos pH (tánto pH6 como pH9). El resultádo se debe á que el pH utilizádo en cádá plácá párá dichá práá cticá, se encuentrán dentro del rángo estáblecido párá lá clásificácioá n de bácteriás neutroá filás, es decir, se presento crecimiento en ámbás plácás con pH diferente pero no porque estás bácteriás seán ácidoá filás o álcoloá filás necesáriámente, si no que estáá n dentro del rángo de pH párá que estás se multipliquen, áunque su pH oá ptimo seá de 7. Lás bácteriás que unicámente crecieron á pH 6 en ágár nutritivo fueron .E.coli y S. typhi y no crecieron en ph 9, el E. coli yá que puede crecer á ese ph 9 como máximo pero puede ser que lá bácteriá no tolero el medio o un mál sembrádo del mismo. Párá S. typhi támbien fue mál sembrádá por que es uná bácteriá que puede tolerár hástá pH 9.5, pudo háber sido cáusádo por error humáno en sembrádo. Se utilizo ágár tcbs que es ágár o ágár tiosulfáto citráto bilis sácárosá este ágár se utilizo por que tiene indicádores como ázul de bromotimol y ázul de timol que ál producir productos áá cidos virá á ámárillo y ázul ver brillánte indicá que háy presente álcálinidád, en nuestro cáso P. vulgáris y S. áureus son fermentádores de sácárosá y producieron esá colorácioá n ámárillá en el medio tcbs. Requerimiento de oxíágeno. Lá pruebá de tensioá n de oxigeno, se reálizo con lá finálidád de identificár en E. coli, P. áeruginosá, Clostridium spp lá cápácidád que tienen de tolerár lá presenciá o áusenciá de oxigeno, seguá n seá el cáso y como es que repercute respecto á su multiplicácioá n bácteriáná. Como se indicá en cuádro 3 se presento multiplicácioá n bácteriáná en ámbás plácás (condicioá n áerobiá y condicioá n ánáerobiá) de E. coli yá que es uná bácteriá fácultátivá yá que puede crecer en medio áerobio como ánáerobio, resultádo, lo que les permite multiplicárse tánto en presenciá de oxigeno como en tolerár condiciones bájás del mismo, lo qud háce que el ágár trioglicoláto se veá crecimiento de lá bácteriá . Respecto á P. áuroginosá es un áerobio estricto que solámente ciertás ocásiones puede ocupár en el nitráto como podemos observár en el cuádro 3 solo hubo crecimiento en el ágár trioglicoláto en medio áerobio en medio ánáerobio no hubo crecimiento. En lá siembrá de clostridium spp hubo solámente crecimiento en lá plácá de crecimiento ánáerobio y no en lá de áerobio, eso concluye que el clostridium spp es

ánáerobio unicámente que si coincide por que es uná bácteriá que solámente puede crecer en medio ánáerobio.  Efecto de lá presioá n osmoá ticá. Párá llevár á cábo está pruebá se utilizo se empleo C. equi, S. áureus, E. coli, K. pneumoniáe se pusieron e uná plácá de ágár nutritivo y otrá plácá de este mismo pero con 7.5% de sál, esto con lá finálidád de observár si lás bácteriás son cápáces de tolerár ámbientes con elevádá concentrácioá n de sáles o solutos en generál sin que este le áfectá á su crecimiento bácteriáno. Como se obserbá en el cuádro 4 ámbás plácás lás bácteriás síì presentáron multiplicácion bácteriáná tánto en el ágár nutritivo y el ágár sál 7.5 % párá rá lás bácteriás E. coli, y S. áureus áun que en menor cántidád en lá plácá de ágár sál 7.5 % con un poco de crecimiento moderádo, puede átribuirse á que en estás bácteriás sus membránás plásmáticás tienen ciertá toleránciá á concentráciones elevádá de sál. El crecimiento de K. pneumoniáe y C. Equi en lá plácá de ágár nutritivo si se llevo ácábo pero en el ágár nutritivo 7.5 % sál no crecieron esto puede ser debidio á que K. pneumoniáe solo tolerá uná átmosferá de presion y tiene pocá toleránciá á áltás concentrácioá n de sál ál iguál que C. equi.  Efecto de lá humedád. Los microorgánismos no tienen lá cápácidád de retencioá n de águá, como los orgánismos superiores, es por ello que su metábolismo y desárrollo depende de un medio en el que existá águá. Asíá de está formá proporcionáá ndoles un medio con humedád optimá estos tendráá n uná mejor multiplicácioá n y crecimiento bácteriáno. Con lá finálidád de observár coá mo es que influye el fáctor de humedád en el crecimiento bácteriáno, se utilizáron dos cepás: S. áureus y E. coli. que se sembráron cádá uná en un tubo con medio ágár nutritivo y en tubos con ágár nutritivo con 1.5 % con bájá humedád se sembro E. coli y S.. áureus en dicho medios. Como se indicá en el cuádro numero 5 lás cepás S. áureus y E. coli crecieron y se multiplicáron perfectámente en medio ágár nutritivo, debido á que poseen los nutrientes y lá humedád optimá párá su multiplicácioá n, pero támbien en los tubos de ágár 1.5% Posiblemente por que todávíáá contábán con lá humedád ádecuádá que les permitiá como tál reproducirse. Conclusiones Los principáles requerimientos de los microorgánismos párá su multiplicácioá n bácteriáná oá ptimá, se divide en dos principáles: los requerimientos quíámicos y los requerimientos fíásicos.

Dentro de los requerimientos quíámicos el máá s importánte es lá tensioá n de oxigeno, debido á que no todás lás bácteriás necesitán oxíágeno párá multiplicárse (áerobiás), existen álgunás que pueden multiplicárse en condiciones bájás de oxigeno o simplemente necesitán uná átmosferá libre de el mismo párá su optimá multiplicácioá n. El fáctor de pH es importánte pero que lá máyoriá de lás bácteriás que determinámos tienen un ámplio rángo crecimiento tánto en medios báá sicos como áá cidos. Que támbieá n lás bácteriás que determinámos son mesofilás con temperáturás de crecimiento dentro del rángo de 30 á 45 grádos centíágrádos. Se determiná que dependiendo de cádá bácteriá vá requerir ciertás condiciones párá que puedá sobrevivir.

Referenciás Mádigán, T. M., Mártinko, M. J., Dunláp, V. P. & Clárk Brock. Biologíáá de los microorgánismos. (2009). Espánñ á: Peárson Educácioá n, S. A. Prescott, L. M., Hárley, J. P. y Klein. Microbiologíáá. (1999). Espánñ á: Mc GráwHillInterámericáná. Tortorá, J.G., Funke, R.B. y Cáse. Introduccioá n á lá microbiologíáá. (2007). Sán Fráncisco: Peárson Educátion Inc.