Metodo Johann Kjeldahl.docx

Método Kjeldahl. En ESTA técnica se digiere las proteínas y componentes orgánicos en una mezcla con H 2SO4 en presencia de catalizadores. El Nitrógeno se convierte en sulfato de amonio. La mezcla digerida se neutraliza con una base y se destila posteriormente. El destilado se recoge en una solución de Ácido Bórico. Los aniones del borato formados se titulan con HCL o H2SO4 estandarizado para determinar el Nitrógeno contenido en la muestra. Originalmente, se usó permanganato de potasio para la oxidación (digestión) pero se descartó. Luego se añadió sulfato de potasio para acelerar la reacción (catalizador) en la digestión con H2SO4, el K2SO4 eleva el punto de ebullición del H2SO4. En la actualidad se usa sulfato de cobre pentahidratado (CuSO 4.5H2O) como catalizador. 1. DIGESTIÓN n-C-NH2 + 2H2SO4 + CuSO4.5H2O → CO2 + (NH4)2SO4 + SO2 RESULTADO: líquido transparente nítido color azul claro, verde o amarillo dependiendo del

catalizador. 2. DILUCIÓN Añadir con cuidado 25mL de H2O y dejar enfriar. 3. NEUTRALIZACIÓN (NH4)2SO4 + 2NaOH → 2NH3 + Na2SO4 + 2H2O 4. DESTILACIÓN NH3 + H3BO3 → NH4+ + H2BO35. TITULACIÓN H2BO3- + H+ → H3BO3 6. VALORACIÓN Valorar con HCL (punto final pH=4.65) nNH3 = nHCL = nN en muestra 2nNH3 = n H2SO4 = 2nN en muestra

gNitrógeno = N x V x 14 ,donde N es la normalidad del ácido en la valoración. V es el volumen de ácido consumido. Y 14 es el peso atómico del Nitrógeno.