Manejo Y Mediciones Con Micropipetas.docx

MANEJO Y MEDICIONES CON MICROPIPETAS Sulbey Karina Fernandez1. Wendy Dayana Garcia2. Mayerly Johanna Moncada3. Julian Alejandro Bayona.4 Universidad Francisco de Paula Santander. Facultad Ciencias Agrarias y del Ambiente. Ingeniería Biotecnológica.

Resumen En esta práctica se realizó el reconocimiento de micropipetas digitales. Se dispuso de micropipetas que manejas diferentes volúmenes, como: p1000 (vol. 100 -1000 µl), p100 (vol. 10 – 100 µl) y p10 (vol. 0.5 - 10 µl) cada una con sus respectiva punta segun el volumen a trabajar, con el fin de comprender sus partes, su función y su manejo dentro del laboratorio, para lo cual se realizaron ejercicios empleando detergente de diferentes colores, en los cuales consistía en añadir volúmenes de 1000µl y 10 µl a tubos de 1,5 ml, para conseguir tener una mejor precisión a la hora de tomar volúmenes con estas. palabras claves: micropipetas, volúmenes, punta

Introducción

para diferentes volúmenes, tales como: p1000

En el presente trabajo daremos a conocer las

(vol. 100 -1000 µl), p100 (vol. 10 – 100 µl) y

partes, la función y el manejo adecuado de las

p10 (vol. 0.5 – 10 µl), las cuales se

micropipetas digitales dentro del área de

diferencian según

trabajo del laboratorio de genética molecular

volúmenes

1. Estudiante ingeniería biotecnológica. Código: 1611378. 2. Estudiante ingeniería biotecnológica. Código: 1611287. 3. Estudiante ingeniería biotecnológica. Código: 1611223. 4. Estudiante ingeniería biotecnológica. Código: 1611402.

su color, azules para

grandes,

amarillas

para

volúmenes

medianos

y

blancas

para

que podemos medir volúmenes en microlitros

volúmenes pequeños, sim embargo, el color

(µl). Es conveniente recordar que 1 mililitro

de las micropipetas puede variar según el

equivale a 1000 microlitros.

fabricante o casa comercial de las mismas; estas necesitan de puntas de diferentes tamaños según la micropipeta usada, que manejan los mismos patrones de colores que estas, sim embargo, sucede los mismo que con las micropipetas, el color de estas difiere según el fabricante o casa comercial.

Una micropipeta es un instrumento empleado para

absorber

y

transferir

pequeños

volúmenes de líquidos y permitir su manejo en las distintas técnicas científicas. Las micropipetas son dispositivos que permiten medir volúmenes pequeños que desde 1µl hasta 1ml o más.

Fundamento El uso de micropipetas permite emplear En esta práctica se harán ejercicios de distintos líquidos sin tener que lavar el medición

con

micropipetas

digitales aparato: para ello se emplean puntas

adiestrándose

en

el

correcto

uso

y desechables (plástico) que habitualmente son

manipulación de las mismas, el cual es estériles. fundamental para el éxito de las siguientes prácticas programadas en este curso.

Hay diferentes tipos de micropipetas de las cuales se utilizan en la práctica las de tipo

La gran mayoría de las técnicas en biología p1000 (vol. 100 -1000 µl), p100 (vol. 10 – molecular se basan en procedimientos de “microquimica”, en los que se emplean

100 µl) y p10 (vol. 0.5 - 10 µl), con sus respectivas puntas: azules, amarillas y puntas

cantidades muy pequeñas de soluciones y amarillas o blancas. reactivos para este fin, se usan micropipetas de volumen fijo y volumen variable, con las 1. Estudiante ingeniería biotecnológica. Código: 1611378. 2. Estudiante ingeniería biotecnológica. Código: 1611287. 3. Estudiante ingeniería biotecnológica. Código: 1611223. 4. Estudiante ingeniería biotecnológica. Código: 1611402.

En la siguiente figura se muestra el esquema general de las partes de las micropipetas.

MATERIALES REACTIVOS Micropipeta de 100 A Detergente 1000 µl. liquido de colores Micropipeta de 10 A 100 µl. Micropipeta de 0.5 A 10 µl. Puntas blancas, azules y amarillas.  Toma del liquido

Materiales y reactivos Los materiales y reactivos utilizados para esta práctica esta depositados en la siguiente tabla:

Procedimiento Manejo de micropipetas 

Ejercicios de medición



1. Estudiante ingeniería biotecnológica. Código: 1611378. 2. Estudiante ingeniería biotecnológica. Código: 1611287. 3. Estudiante ingeniería biotecnológica. Código: 1611223. 4. Estudiante ingeniería biotecnológica. Código: 1611402.

Dosificacion de la muestra



Volumenes pequeños Discusiones Como sabemos la micropipeta es un instrumento de laboratorio empleado para absorber y transferir pequeños volúmenes de líquidos y permitir su manejo en las distintas técnicas científicas, las cuales me permitiran la manipulación de microlitros de soluciones



Volumenes grandes

que contienen productos biológicos. Los volumenes aceptables por estos instrumentos varian segun el modelo, los más habituales y empleado por el laboratorio son denominados p20, p200 y p1000 y admiten un máximo de

1. Estudiante ingeniería biotecnológica. Código: 1611378. 2. Estudiante ingeniería biotecnológica. Código: 1611287. 3. Estudiante ingeniería biotecnológica. Código: 1611223. 4. Estudiante ingeniería biotecnológica. Código: 1611402.

20, 200 y 1000 μl, respectivamente; en las

pipeta

practicas

utilizaremos

reconocmiento y manejo adecuado de las

micropipetas p10, p100 y p1000. Es de

micropipetas, es importante ya que me

destacar que el uso de micropipetas me

permitria un mejor desarrollo en las practicas

permite emplear distintos líquidos sin tener

tanto de genetica molecular como de biologia

que lavar el aparato; para ello, se emplean

molecular, asi como en el campo laboral al

puntas desechables, de plástico, que son

que

estériles.

biotecnologo.

de

laboratorio

Existen

varios

tipos

de

micropipetas, asi como puntas; por ejemplo,

donde

me

ajusto

enfrente

la

como

punta.

El

ingeniero

Cuestionario

las blancas para pipetear volumes pequeños (por ejemplo, 0.5 μl), amarillas para pipetear volúmenes medianos(por ejemplo, 10 μl), y

a.¿Cómo se mide el porcentaje de exactitud y el coeficiente de variación? Escriba un ejemplo.

las azules para pipetear volúmenes grandes (por ejemplo, 800 μl), pero es importante

El VIM, en su tercera edición (2007), define la exactitud de medida como la proximidad

comprender que estos colores no deben ser existente entre un valor medido y un valor tomados como una medida estandarizada, ya verdadero de un mensurando. Así pues, una que el color de estas varia segun el fabricante medición es más exacta cuanto más pequeño o casa comercial. Las micropipetas se es el error de medida. encuentran

costituidas

por

tres

partes El porcentaje de exactitud es calculado por

principales a mi criterio, el piston que me medio de la siguiente formula: pertime la absorcion del liquido, el control (Vr-Vm)/Vr = % de exactitud del volumen que me permite graduar el Donde: volumen que voy a medir y el cono de la 1. Estudiante ingeniería biotecnológica. Código: 1611378. 2. Estudiante ingeniería biotecnológica. Código: 1611287. 3. Estudiante ingeniería biotecnológica. Código: 1611223. 4. Estudiante ingeniería biotecnológica. Código: 1611402.

Vr= Valor real. Vm=Valor medido. Ejemplo: Necesito medir 300 µL de una solucion, a la hora de realizar la practica con un instrument obtuve 299,5 µL, ¿que tan inexacto fue la medida? 300 µL-299,5 µL/300 µL= 0,0016% El coeficiente de variacion segun Angel (2012) esta definido como la relacion entrela

b.¿Cómo se clasifican las micropipetas automáticas? Las micropipetas automaticas se clasifican segun el volumen que manejen:

desviacion estandar y la medida aritmetica de



p10: 0,5 µL-10 µL.

los datos.



p20: 0,5 µL-20 µL.

El coeficiente de variacion es calculado por



p100: 10 µL-100 µL.



p200: 20 µL-200µL.



p1000: 100 µL-1000 µL.

la siguiente formula: C= S/X Donde;

c.¿Qué otras aplicaciones o usos tienen las S= Desviacion estandar. micropipetas en biotecnología? X= Media aritmetica de los datos. Las micropipetas en la biotecnologia me Ejemplo: permite realizar procediemientos como: Se tomaron las siguientes medidas en una micropipeta 200, 500, 300 y 1000 µL respectivamente, calcular el coeficiente de



Cuantifiacion de proteinas.



Extraccion de ADN.



Preparacion de diferentes soluciones.

variacion. Conclusiones 1. Estudiante ingeniería biotecnológica. Código: 1611378. 2. Estudiante ingeniería biotecnológica. Código: 1611287. 3. Estudiante ingeniería biotecnológica. Código: 1611223. 4. Estudiante ingeniería biotecnológica. Código: 1611402.

La micropipeta es un instrumento necesario a

ISO (2007). International Vocabulary of

la hora de realizar diferentes trabajos en el

Metrology – Basic and General Concepts and

laboratio y en el campo laboral, para poder

Associated Terms. 3rd ed. (Geneva: ISO)

manipular concentraciones de pequeños

Disponible

volumenes que me permitiran diferentes

http://coello.ujaen.es/congresos/cicum/pone

tareas como extraccion de ADN, preparacion

ncias/Cicum2010.2.02_Ruiz_y_otros_Error_

de soluciones, etc, por ello es necesario

incertidumbre_precision.pdf

comprender su funcion y darle un adecuado

J. Angel (2012) La variacion y su significado.

manejo.

Revista Universidad Eafit, 101, 87-96.

Bibliografia

1. Estudiante ingeniería biotecnológica. Código: 1611378. 2. Estudiante ingeniería biotecnológica. Código: 1611287. 3. Estudiante ingeniería biotecnológica. Expulse Código: 1611223. la punta 4. Estudiante ingeniería biotecnológica. desechos Código: 1611402. con

a un recipiente de solución desinfectante.

en: