Laporan_squash_akar_bawang.docx

LAPORAN PRAKTIKUM MIKROTEKNIK PREPARAT SQUASH AKAR BAWANG MERAH DAN BAWANG PUTIH Disusun guna memenuhi tugas mata kuliah Praktikum Mikroteknik Dosen pengampu Dra. Ely Rudyatmi,M.Si

Disusun oleh Elita Anggraini Setyobudi 4401412054 Rombel 1 Pendidikan Biologi

JURUSAN BIOLOGI FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS NEGERI SEMARANG 2015

Pembuatan Preparat Squash Akar Bawang Merah dan Bawang Putih A. Tujuan 1.

Membuat preparat akar bawang merah dan bawang putih menggunakan metode squash dengan pewarnaan acetocarmin.

2.

Menganalisis hasil pembuatan akar bawang merah dan bawang putih menggunakan metode squash dengan pewarnaan acetocarmin.

B. Landasan Teori Preparat pejetan atau yang disebut dengan squash preparation merupakan preparat yang dibuat dengan cara memejet sebuah objek diatas gelas objek atau kaca preparat dengan menggunakan ibu jari. Preparat pejetan biasanya digunakan untuk melihat proses mitosis pada akar Allium cepa (Budipramana,1992). Langkah pertama dalam menyiapkan materi segar untuk pengamatan mikroskopis adalah fiksasi. Fiksasi juga merupakan langkah awal yang penting dalam membuat sediaan utuh maupun sediaan sayatan. Tujuan fiksasi adalah menghentikan proses metabolisme secara cepat, mencegah kerusakan jaringan, mengawetkan komponen-komponen sitologis dan histologis, mengawetkan keadaan sebenarnya, mengeraskan materi-materi yang lembek sehingga akan terjadi koagulasi protoplasma maupun elemen-elemen di dalam protoplasma, jaringan dapat diwarnai sehingga bagian-bagian dari jaringan dapat mudah dikenali. Secara ringkas fiksasi terdiri dari dua proses yang jelas, yaitu mematikan dan menetapkan (Gunarso 1986). Suatu fiksatif dikatakan baik jika mempunyai kemampuan untuk mengendapkan kromatin, mempunyai kemampuan untuk mematikan dengan segera, mempunyai kemampuan untuk mangautolisis protein, mencegah terjadinya dekomposisi yang dilakukan oleh bakteri, dan dapat menciptakan keadaan pH yang sesuai untuk jaringan yang telah difiksasi (Arisworo, 2000). Secara konvensional mitosis dibagi menjadi lima tahap: profase (prophase), prometafase (prometaphase), metaphase (metaphase), anaphase (anaphase), dan

telofase (telophase). Sitokinesis yang bertumpang tindih dengan tahap akhir mitosis, menyelesaikan fase mitotic (Campbell, 2010) 1.

Profase. Kromatin berkondensasi dan nucleolus mulai lenyap. Walaupun belum terlihat pada mikrograf, gelendong mitotic mulai terbentuk.

2.

Prometafase. Kromosom diskert kini terlihat; masing-masing terdiri atas dua kromatid saudara yang identik dan berjejer. Nantinya dalam prometafase, selaput nucleus akan terfragmentasi.

3.

Metafase. Gelendong telah lengkap, dan semua kromosom, yang melekat di bagian mikrotubulus di bagian kinetokornya, berada pada lempeng metaphase.

4.

Anafase. Kromatid dari masing-masing kromosom telah terpisah, dan kromosom anakan bergerak ke ujung-ujung sel saat mikrotubulus kinetokor memendek.

5.

Telofase. Nukleus anakan terbentuk. Sementara itu sitokinesis mulai: Lempeng sel , yang akan membelah sitoplasma menjadi dua, tumbuh ke arah tepi sel induk (Campbell, 2010).

C. Cara Kerja Bawang merah dan bawang putih ditumbuhkan akarnya selama 7 hari . Akar bawang yang sudah tumbuh dipotong sepanjang 5 mm dari ujung akar, diambil pada pukul 04.00 WIB, selanjutnya irisan-irisan ujung akar difiksasi dalam botol flakon berisi larutan asam asetat glasial 45% pada suhu 40C selama 15 menit, kemudian dicuci dengan cara larutan fiksatif diganti dengan aquadest sebanyak dua kali dengan bantuan spuit. Proses selanjutnya akar bawang dihidrolisis menggunakan HCL 1 N suhu 60oC dalam pemanas selama 5 menit atau sampai akar menjadi transparan. Selanjurnya akar bawang dicuci dengan cara mengganti larutan HCL 1 N dengan aquadest sebanyak dua kali menggunakan bantuan spuit. Tahap selanjutnya akar bawang diwarnai menggunakan acetocarmin selama 2 jam di dalam botol flakon. Afixing, sediaan akar bawang diambil dari botol flakon dengan kuas, selanjutnya diletakkan diatas gelas benda dan dipotong menggunakan silet tajam sepanjang 2 mm dari pangkal akar untuk dibuang (yang

warnanya lebih terang). Mounting yaitu akar bawang diberi sedikit gliserin selanjutnya memencetnya ditutup deck glass lalu disquash caranya adalah mendorong deckglass dengan jari telunjuk, kemudian deskglass disegel dengan kutek transparan lalu diamati dibawah mikroskop dan dianalisis hasilnya.

D. Hasil Pengamatan

1

2

3

4

Preparat squash akar bawang putih (Allium sativum)

3

2 1

4

Preparat squash akar bawang merah (Allium cepa) Keterangan : 1. Nukleus (terdapat kromosom) 2. Sitoplasma 3. Dinding sel 4. Sel interfase Perbesaran 40x10=400 kali Berdasarkan pengamatan yang dilakukan dalam membuat preparat pejetan untuk mengamati proses pembelahan mitosis pada akar bawang merah (Alium cepa) dan bawang putih (Allium sativum) pada preparat jam 04.00 tidak terjadi fase pembelahan. Sel masih dalam keadaan interfase.

E. Pembahasan Akar bawang merah dipotong sepanjang 3 mm, akar bawang tersebut dimasukan kedalam botol flacon yang berisi larutan asam asetat 45 %, hal ini

dilakukan untuk menfiksasi akar bawang merah (mematikan sel atau jaringan tanpa merusak sel atau jaringan tersebut ). Setelah itu, mengambil larutan asam asetat lalu mencuci akar bawang merah (Alium cepa) dengan air selama 3 kali. Hal ini dilakukan untuk membersihkan akar bawang merah (Alium cepa) dari larutan asam asetat. Fungsi bahan-bahan yang digunakan : 1.

Acetocarmin fungsinya untuk memberi warna pada spesimen yang diamati

2.

HCl fungsinya untuk menghidrolisis dan menghilangkan sisa-sisa zat kimia yang sebelumnya.

3.

Asam asetat glacial digunakan sebagai fiksatif yang mengeraskan kromosom dan mencegah pengerasan jaringan. Daya penetrasinya cepat sehingga dapat mengakibatkan pembengkakan jaringan. Preparat pejetan atau yang disebut dengan squash preparation merupakan

preparat yang dibuat dengan cara memejet sebuah objek diatas gelas objek atau kaca preparat dengan menggunakan ibu jari. Preparat pejetan biasanya digunakan untuk melihat proses mitosis pada akar alium cepa. Ketika ingin mempelajari bentuk kromosom suatu sel, maka saat yang tepat adalah pada waktu sel sedang membelah baik secara mitosis maupun meiosis. Pembelahan mitosis terjadi pada sel tubuh yang menghasilkan sel yang sama dengan sel sebelumnya dan bersifat diploid, sementara pembelahan meiosis terjadi pada sel gamet yang menghasilkan sel yang bersifat haploid. Prinsip mitosis terletak pada tingkah laku kromosom selama berkembang biak. Kromosom adalah benda-benda dalam inti sel yang hanya dapat terlihat pada waktu sel membelah diri karena dapat mengikuti zat warna tertentu. Kromosom ini mempunyai kemampuan menduplikasikan diri yaitu membentuk kromosomkromosom baru yang serupa dengan kromosom semula, selanjutnya kromosomkromosom ini akan di berikan kepada sel anak. Jaringan yang mudah untuk ditelah mitosis ialah mensistem pada titik tumbuhan akar bawang mewarnainya dengan zat pewarna yang sesuai akan tampak kromosom-kromosom dalam sel-sel yang membelah dari.Semua mahluk hidup di susun oleh sel akan tetapi jumlah dan ukuran sel yang dimiliki oleh setiap jenis mahluk hidup sudah tentu memiliki

pebedaan-perbadaan adanya perbedaan ini kita dapatkan makluk hidup yang besar, kecil bahkan mikroskopis seperti jamur dan protozoa.Pertumbuhan dan perkembangan setiap organisme tergantung pada pertumbuhan dan perkembangan sel-sel yang di milikinya secara terus menerus dalam proses pembelahan sel biasanya kita melihat adanya benang-benang.Pada mitosis bahkan inti sal terbagi sedemikian rupa sehingga suatu sel dihasilkan dan dua buah sel anaknya yang masing-masing memiliki sifat genetik sama, mitosis berlangsung pada semua sel, kecuali pada sel-sel yang akan menjadi sel kelamin. Pembelahan mitosis dibedakan atas dua fase, yaitu kariokinesis dan sitokinesis, kariokinesis adalah proses pembagian materi inti yang terdiri dari beberapa fase, yaitu Profase, Metafase, dan Telofase. Sedangkan sitokinesis adalah proses pembagian sitoplasma kepada dua sel anak hasil pembelahan. a.

Kariokinesis Kariokinesis selama mitosis menunjukkan ciri yang berbeda – beda pada

tiap fasenya. Beberapa aspek yang dapat dipelajari selama proses pembagian materi inti berlangsung adalah berubah – ubah pada struktur kromosom, membran inti, mikro tubulus dan sentriol. Ciri dari tiap fase pada kariokinesis adalah: 1) Profase a)

Benang – benang kromatin berubah menjadi kromosom. Kemudian setiap kromosom membelah menjadi kromatid dengan satu sentromer.

b) Dinding inti (nucleus) dan anak inti (nucleolus) menghilang. c)

Pasangan sentriol yang terdapat dalam sentrosom berpisah dan bergerak menuju kutub yang berlawanan.

d) Serat – serat gelendong atau benang – benang spindle terbentuk diantara kedua kutub pembelahan. 2) Metafase Setiap kromosom yang terdiri dari sepasang kromatida menuju ketengah sel dan berkumpul pada bidang pembelahan (bidang ekuator), dan menggantung pada serat gelendong melalui sentromer atau kinetokor. 3) Anaphase

Sentromer dari setiap kromosom membelah menjadi dua dengan masing – masing satu kromatida. Kemudian setiap kromatida berpisah dengan pasangannya dan menuju kekutub yang berlawanan. Pada akhir nanfase, semua kroatida sampai pada kutub masing – masing. 4) Telofase Pada telofase terjadi peristiwa berikut: a)

Kromatida yang berada pada kutub berubah menjadi benang–benang kromatin kembali.

b) Terbentuk kembali dinding inti dan nucleolus membentuk dua inti baru. c)

Serat – serat gelendong menghilang.

d) Terjadi pembelahan sitoplasma (sitokenesis) menjadi dua bagian, dan terbentuk membrane sel pemisah ditengah bidang pembelahan. Akhirnya terbentuk dua sel anak yang mempunyai jumlah kromosom yang sama dengan kromosom induknya.

F. Kesimpulan 1.

Preparat akar bawang merah dan bawang putih dapat dibuat menggunakan metode squash dengan pewarnaan acetocarmin.

2.

Acetocarmine dapat mewarnai preparat akar bawang merah dan bawang putih dengan baik.

3.

Pada pukul 04.00 WIB tidak terjadi fase pembelahan.

G. Saran 1.

Dalam pembuatan preparat harus memperhatikan waktunya untuk hidrolisis dan pewarnaan.

2.

Sebaiknya hidrolisis dilakukan sampai akar bawang benar-benar transparan.

3.

Dalam squashing harus ditekan, agar sel-selnya terpisah-pisah dan dapat diamati fase-fasenya.

H. Daftar Pustaka Rudyatmi, Ely. 2014. Bahan Ajar Mikroteknik. Semarang: Jurusan Biologi FMIPA UNNES. Campbell, Neil A. & Jane B. Reece. 2010. Biologi Edisi 8, Jilid 1. Jakarta: Erlangga. Arisworo D. 2000. General Zoologi. Jakarta: PT grafindo media pratama Budipramana, Lukas. 1992. Mikroteknik dan Pembuatan Peraga Biologi. Surabaya : UNESA Press. Gunarso W. 1986. Pengaruh Dua Jenis Cairan Fiksatif yang Berbeda pada Pembuatan Preparat dari Jaringan Hewan Dalam Metoda Mikroteknik Parafin. Bogor: IPB Press