Jurnal Tth.docx

LATAR BELAKANG DAN TUJUAN: Studi ini dirancang untuk memahami patofisiologi dari salah satu masalah kesehatan paling serius, sakit kepala tipe tegang kronis (CTTH). Dua situs polimorfik dalam gen protein transporter serotonin menarik banyak perhatian. Ini adalah: jumlah variabel pengulangan tandem (VNTR) dan daerah promotor 5'-mengapit (5-HTTLPR). MATERIAL DAN METODE: Polimorfisme VNTR dan 5-HTTLPR diselidiki pada 126 pasien CTTH dan 138 subjek kontrol yang sehat. Para pasien dirawat dengan amitripytyline atau citalopram atau sertraline (SSRI). Metode Polymerase Chain Reaction (PCR) digunakan untuk menyelidiki polimorfisme pada gen protein transporter serotonin. HASIL: Tidak ada hasil yang signifikan secara statistik berdasarkan alel gen 5-HTTLPR, namun, genotipe STin 2.12 / 12 dan alel STin 2.12 terlihat mendominasi kelompok kontrol. Untuk menyelidiki efek gabungan dari dua lokus polimorfik pada ekspresi gen 5-HTT, sampel dipisahkan menjadi sembilan kelompok. Genotipe (S / S-12/10) dan (L / S-12/10) menunjukkan frekuensi yang signifikan secara statistik pada kelompok CTTH dibandingkan pada kelompok kontrol. Tidak ada perbedaan signifikan yang terlihat antara kelompok haplotipe 5-HTTLPR dan VNTR dan keberhasilan dalam pengobatan. KESIMPULAN: Dimungkinkan untuk membuat perbandingan dan hipotesis yang andal tentang keberadaan alel S dan STin 12/10 yang homozigot dan / atau heterozigot yang mungkin berinteraksi dengan CTTH. Di sisi lain, keberadaan alel L dan STin12 homozigot dapat memainkan peran protektif terhadap CTTH. Mungkin juga bahwa heterogenitas di antara penyakit yang menunjukkan penelitian klinis yang sama akan membutuhkan banyak upaya untuk identifikasi individu.

Sakit kepala primer merupakan masalah kesehatan utama dan inilah mengapa ada peningkatan minat pada asosiasi genetik dari kelainan yang tersebar luas ini dalam beberapa tahun terakhir. Sakit kepala tipe tegang kronis (CTTH) terjadi setidaknya 15 hari dalam sebulan hingga tiga bulan dan memerlukan kunjungan ke praktisi keluarga, ahli saraf dan dokter lainnya. [1] Sebuah penelitian terbaru menunjukkan bahwa CTTH adalah salah satu alasan paling serius hilangnya usaha produktif. [2] Sebuah penelitian di Denmark menunjukkan bahwa 12% subjek yang dipekerjakan dengan CTTH telah kehilangan satu atau lebih hari kerja pada tahun tertentu karena sakit kepala. Kehilangan total hari kerja per tahun karena sakit kepala tipe tegang pada populasi umum diperkirakan 820 hari pada 1000 orang. [3] Studi di Turki menunjukkan bahwa CTTH memiliki dampak yang lebih tinggi pada hilangnya produktivitas dan biaya obat, sehingga memiliki dampak ekonomi yang lebih besar.

Untuk mengatasi peran sistem serotonergik pada mekanisme patofisiologis CTTH, beberapa penelitian telah diterbitkan tentang salah satu modulator utama: protein transporter serotonin. Serotonin diambil dari ruang sinaptik secara teratur dengan transporter 5-hydroxytryptamine (5-HTT) dan dikembalikan ke kutub neurotransmitter untuk digunakan lagi berturut-turut. [8], [9] protein transporter serotonin (5-HTT) dikodekan oleh gen tunggal SLC6A4 pada Kromosom 17q12. [10] Dua situs polimorfik pada gen 5-HTT menarik minat: sejumlah variabel pengulangan tandem (VNRT) dari 17-bp berulang dalam intron dua karena memiliki beberapa alel seperti STin 2.7, STin 2.9, STin 2.10, STin 2.11, STin 2.12 dan penyisipan / penghapusan di daerah promotor 5 ¢ mengapit (5-HTT daerah polimorfik terkait-5-HTTLPR) menciptakan alel pendek (S) dan panjang (L). Polimorfisme 5-HTTLPR terletak di wilayah kaya-GC yang terdiri dari unit berulang 20-23 bp. Alel S dan L masing-masing memiliki 14 dan 16 elemen berulang. [11], [12] Bentuk singkat dari varian ini, "S" dikaitkan dengan efisiensi transkripsional basal dan terinduksi dari promotor gen 5-HTT, menghasilkan aktivitas serotonin serapan yang lebih rendah, jika dibandingkan dengan bentuk panjang "L" . [10] Penelitian lebih lanjut mengungkapkan konsekuensi fungsional analog dari 5-HTTLPR pada ekspresi 5-HTT dalam sel dan jaringan otak. [13], [14] Beberapa penelitian menunjukkan bahwa alel 12-ulang dikaitkan dengan sifat seperti penambah yang lebih tinggi untuk transkripsi gen 5-HTT daripada alel 10-ulang sementara penelitian lain tidak menemukan hubungan. [14], [15], [16], [17], [18] Ada beberapa bukti yang menunjukkan bahwa gen 5-HTT mungkin terlibat dalam patogenesis migrain dengan aura dan CTTH dan kedua daerah polimorfik telah menjadi objek. untuk studi. Hasil ini mendukung hipotesis bahwa obat yang terutama bekerja melalui penghambatan 5-HTT, seperti SSRI dan agonis serotonin mungkin efektif dalam farmakoterapi terapi sakit kepala. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menyelidiki kemungkinan peran polimorfisme 5HTTLPR dan VNTR secara individual dan dalam kombinasi pada pasien CTTH. Selain itu, kami bertujuan untuk mengevaluasi hubungan antara respon klinis obat-obatan dan serotonin transporter (5-HTT) gen polimorfisme. Seratus dua puluh enam pasien CTTH (109 perempuan dan 17 laki-laki, usia rata-rata 38 ± 18,24 tahun) dan 138 subyek kontrol (117 perempuan dan 21 laki-laki, usia rata-rata 23,29 ± 6,67 tahun) dilibatkan dalam penelitian prospektif ini. Kriteria diagnostik operasional International Headache Society (IHS) digunakan untuk mengevaluasi pasien dengan CTTH. [1] Sakit kepala tipe tegang kronis biasanya bilateral, menekan atau mengetat dalam kualitas dan terjadi pada ≥15 hari / bulan rata-rata ≥3 bulan, berjam-jam atau terus menerus. Pasien dan kelompok kontrol dengan migrain episodik atau gejala mual, muntah, fotofobia, atau fonofobia selama setidaknya tiga bulan dikeluarkan dari penelitian. Semua peserta diwawancarai di klinik rawat jalan dan diperiksa secara neurologis oleh ahli saraf sebelum diikuti selama delapan minggu. Kelompok kontrol terdiri dari orang sehat yang tidak memiliki jenis sakit kepala atau gangguan lainnya. Tidak ada perbedaan signifikan dalam demografi dasar antara penelitian dan kelompok kontrol. Semua subjek penelitian menandatangani informed consent sebelum berpartisipasi

dalam penelitian. Subjek CTTH dan kelompok kontrol adalah dari etnis yang sama, tetapi tidak ada yang dari keluarga yang sama. Pasien CTTH tidak menggunakan SSRI (serotonin reuptake inhibitor) atau amitripytyline dan bukan penyalahguna narkoba. Pengobatan terdiri dari amitriptytyline acak 10 mg / hari atau SSRI (citalopram 20 mg / hari atau sertraline 50 mg / hari) tetapi tidak ada yang mendapat plasebo. Perbandingan antara kelompok dinilai dengan skala analog visual (VAS) untuk hasil. Kunjungan kontrol dilakukan sebulan sekali dan dalam setiap kunjungan skor VAS diminta. Responden didefinisikan sebagai mereka yang mengalami penurunan VAS sebesar 50% sejak awal.

Ekstraksi dan analisis DNA Dengan persetujuan tertulis, sampel darah diambil dari masing-masing individu. DNA diekstraksi dari seluruh darah menggunakan kit pemurnian DNA genom (MBI Fermentas, Cat: 12200, USA). Polimorfisme penyisipan / penghapusan (5-HTTLPR) di daerah promotor gen transporter serotonin diketik dengan PCR menggunakan Lesh et al. , metode. [11] Sejumlah variabel polimorfisme pengulangan tandem (VNTR) dalam intron 2 dari gen 5HTT diketik oleh PCR menggunakan Cook et al. , metode. [19] Genotipe didasarkan pada penilaian independen atas hasil oleh dua pengulas yang tidak mengetahui status kasus / kontrol.

Analisis statistik Dalam analisis kombinasi genotipe 5-HTTLPR, tingkat alel panjang (L) dan pendek (S) dan 5-HTT gen VNTR genotipe 12 dan 10 alel dibandingkan antara CTTH dan kelompok kontrol. [20] Genotipe dibandingkan dengan kemanjuran obat sesuai dengan hasil VAS. χ2 tes, uji eksak Fischer dan uji Kolmogrow Smirnow dimasukkan jika berlaku. ANOVA digunakan untuk mengevaluasi perbedaan dalam VAS. Perangkat lunak standar SPSS (versi 11.0) digunakan dalam semua analisis dan P <0,05 dianggap signifikan. Hasil Jumlah genotipe yang diamati tidak menyimpang secara signifikan dari yang diharapkan menurut Hardy Weinberg Equilibrium (P> 0,05) [Tabel 1]. Polimorfisme fungsional gen 5HTTLPR dan VNTR dianalisis untuk semua subjek penelitian [Tabel 1]. Salah satu alel VNTR utama, STin 2.9, hadir pada dua pasien dan dimasukkan dalam kelompok STin 2.10. Alel L dan alel S, alel 12 dan alel 10 dengan frekuensi genotipe untuk CTTH dan kelompok kontrol disajikan pada [Tabel 1]. Tidak ada hasil yang signifikan secara statistik antara masing-masing kelompok menurut alel gen 5-HTTLPR, tetapi genotipe STin 2.12 / 12 dan alin STin 2.12 mendominasi pada kelompok kontrol. Untuk menyelidiki efek gabungan dari dua lokus polimorfik pada ekspresi gen 5-HTT, sampel dipisahkan menjadi sembilan kelompok: Genotipe (L / L-12/12), (L / L-12/10), (L / L-10/10), (L / S-12/12), (L / S-12/10),

(L / S-10/10), (S / S-12/12), (S / S-12/10), (S / S-10/10). Genotipe (S / S-12/10) dan (L / S12/10) mencapai frekuensi signifikan secara statistik pada kelompok CTTH dibandingkan pada kelompok kontrol (χ2 = 5,64 P = 0,017, χ2 = 3,89 P = 0,048). Kombinasi frekuensi genotipe dalam CTTH dan kelompok kontrol dirangkum dalam [Tabel 2]. Durasi dan frekuensi sakit kepala meningkat secara signifikan setelah delapan minggu perawatan (P <0,001). Tidak ada perbedaan signifikan yang terlihat antara 5-HTTLPR dan VNTR kelompok genotipe dan keberhasilan dalam pengobatan karena penurunan 50% dalam skor VAS (P = 0,996). Tidak ada perbedaan yang signifikan antara genotipe dan tingkat keparahan CTTH (VAS ≥ 7) baik (P = 0,784). Tidak ada perbedaan antara obat dan respons terhadap pengobatan (χ2 = 0,22, P = 0,636).

Diskusi Studi sakit kepala tipe-tensi belum dilakukan sebanyak studi migrain. Baru-baru ini, ICHD-II (Klasifikasi internasional dari gangguan sakit kepala) merevisi kriteria yang menggabungkan banyak perkembangan dan menyajikan klasifikasi yang efektif. [1] Dibandingkan dengan populasi umum, kerabat tingkat pertama dari pasien CTTH memiliki risiko CTTH tiga kali lebih tinggi. Hasil ini mendukung pentingnya faktor genetik dalam CTTH. [21]

Studi epidemiologis pada frekuensi sakit kepala tipe tegang dan polimorfisme genetik dapat meringankan faktor risiko polimorfisme gen 5-HTT. Kehadiran alel S telah ditemukan memiliki aktivitas serotonin dan serotonin yang lebih sedikit. [7], [11], [12] Dalam kelompok studi Cina dan Korea, alel S telah ditemukan dua atau tiga kali lebih sering daripada alel L dan pasien depresi dengan alel L menunjukkan respons yang lebih baik terhadap SSRI. [18], [22], [23] Dua penelitian dari populasi yang sama menunjukkan tidak ada hubungan yang signifikan antara frekuensi migrain dan alel S, tetapi menunjukkan perbedaan dalam distribusi genotipe alel S pada pasien dengan CTTH. [6], [18] Selain itu, dalam studi yang sama, pasien dengan alel S memiliki serangan migrain yang jauh lebih sering daripada mereka yang memiliki alel L. [18] Alel 5-HTTLPR S telah dikaitkan dengan respons yang lebih lambat terhadap berbagai perawatan antidepresan [24], [25], [26], [27] meskipun tidak secara univokal. [28] Ada hasil yang kontroversial dengan asosiasi alel S dan migrain. [29], [30] Menurut hasil kami, genotipe tidak diamati dalam kaitannya dengan respons terhadap SSRI dan TCA. Dalam penelitian kami, alel S lebih sering baik pada CTTH dan kelompok kontrol (masing-masing 56%, 55%), tetapi tidak sebanyak frekuensi orang Korea dengan alel S pada tingkat 86%. [19] Polimorfisme VNTR dalam sel pengekspresian asli menunjukkan tidak ada efek signifikan pada tingkat asam 5-hydroxyindoleacetic dalam cairan serebrospinal, tetapi mengungkapkan tingkat yang lebih tinggi dari metabolit norepinefrin pada kelompok ST 12/12 [31] STin 2.12 telah ditemukan dikaitkan dengan risiko gangguan kecemasan dan kita tahu bahwa sakit kepala tipe tegang telah terlihat dalam kombinasi dengan gangguan kecemasan. [32], [33], [34] Studi lain menunjukkan bahwa pasien migrain dengan atau tanpa aura memiliki representasi STin 2.12 yang berlebihan. [35] Berbagai hasil

penelitian polimorfisme ini mari kita berpikir bahwa faktor-faktor lain seperti enzim, reseptor serotonin, dan polimorfisme dapat berperan dalam sistem serotonergik. Menurut hasil kami, dominasi genotipe STin 2.12 / 12 dan alel STin 2.12 pada kelompok kontrol dapat menyatakan bahwa kerentanan terhadap CTTH memiliki komponen genetik. Hubungan antara polimorfisme VNTR dan CTTH patut dievaluasi lebih lanjut.

Meskipun tidak ada perbedaan statistik antara kemanjuran obat dan genotipe, manfaat pada durasi dan keparahan sakit kepala adalah signifikan (P <0,05). Respon klinis terhadap SSRI dan TCA dapat mengindikasikan disfungsi serotonergik pada sistem saraf pusat pasien CTTH. Kemandirian kemanjuran obat dari genotipe berarti bahwa mempelajari faktor tunggal yang terlibat dalam aktivitas serotonergik mungkin tidak cukup untuk mengakhiri subjek ini. Peningkatan pengetahuan tentang faktor-faktor risiko genetik akan memberikan kesempatan untuk memahami patogenesis CTTH, yang karenanya diharapkan memungkinkan dokter untuk memilih orang yang akan memiliki risiko CCTH yang tinggi dan mendapat manfaat dari perawatan. Seperti disebutkan di atas, semua penelitian ditujukan untuk melihat efek polimorfisme tunggal fungsi 5-HTT secara terpisah. Namun, jauh lebih informatif untuk menganalisis penanda di wilayah yang diminati secara bersamaan. Analisis genotipe harus diuji dalam sampel klinis besar untuk meningkatkan pengetahuan tentang kerentanan CTTH. Mungkin juga bahwa heterogenitas di antara penyakit yang menunjukkan penelitian klinis yang sama akan membutuhkan waktu dan upaya untuk identifikasi individu. Sebagai kesimpulan, sepengetahuan kami, ini adalah studi pertama yang menghasilkan bukti sederhana untuk kemungkinan kombinasi polimorfisme 5-HTTLPR dan VNTR dengan CTTH. Lebih lanjut, studi lintas etnis besar termasuk penilaian psikiatrik diperlukan untuk menentukan apakah perubahan dalam ekspresi gen serotonin terlibat dalam CTTH.