Izpit - 9.3.2003

Osnove farmacevtske biotehnologije, 9. 3. 2002 1. Kakšne encimske sisteme lahko pričakujemo pri makrofagih? 2. Kaj so protoplasti, kako jih dobimo? 3. Kako je regulirana transkripcija pri evkariontih? 4. Napiši postopek izolacije penicilina G in nariši strukturo pri pH 3,5. 5. Katere rastline proizvajajo vinkristin, diosgenin in safron? 6. Kaj vse potrebujemo za izvedbo PCR reakcije? 7. Opiši postopek RT-PCR, za kaj je ta metoda uporabna? 8. Kratko opiši postopek pridobivanja rekombinantnega eritropoetina. 9. Natančno opiši postopek izdelave genomske knjižnice. 10. Opiši princip čiščenja produkta z gelsko filtracijo. 11. Opiši princip peptidnega mapiranja. 12. Obkroži številko pred pravilno trditvijo oziroma vse nepravilnosti pri nepravilnih trditvah. (Pozor, negativne točke!) a) V mitohondrijih in plastidih lahko najdemo tudi DNA in RNA. b) lac represor, ki se veže na promotor, je proteinskega izvora. c) Sinteza druge verige cDNA poteka s polimerazo I. d) Asparaginska kislina lahko nastane z deamidacijo kot posledica posttranslacijskih sprememb. e) Iz mieloidne celice se razvijejo nevtrofilci. f) Pri heterolognih serumih pride do nastanka protiteles po i.m. aplikaciji. 13. Opiši princip pridobivanja toksoidov. 14. Biotehnološki problem: v zadnjem času se pogosto pojavlja bolezen TSE. a) Kaj je TSE in kaj so povzročitelji? b) Natančno napiši, kako bi razvil diagnostično metodo za TSE na osnovi monoklonskih protiteles. Kako bi potekal diagnostični postopek? Kaj vse bi vseboval diagnostični komplet?

Osnove farmacevtske biotehnologij - izpit (9. 3. 2002)

1. Encimski kompleksi v makrofagih? 2. Ali bi lahko za ekstrakcijo penicilinov uporabili aceton , izopropilni alkohol? Zakaj? Pri kaksnem pH izvajamo ekstrakcijo? 3. RT- PCR 4. Razlika: filgramostim in sargramostim in njuna uporaba. 5. Obkrozi pravilno in podcrtaj nepravilno: • Celoten genom je v jedru, ki je obdano z dvojno jedrno membrano. • DNA polimeraza se veze na promoter na strukturnem delu operona. • Asparaginska kislina nastane s posttranslacijsko amidacijo. • Homologni serum ne povzroci imunskega odziva, ce ga apliciramo i.m. • Najpogosteje uporabljene bakterije v rekombinantni tehnologiji so E. coli in Pichia pastoris. • Z dediferenciacijo mieloidnih celic nastanejo makrofagi. 6. Kako naredimo cDNA knjiznico? Natancno opiši celoten postopek. 7. Kako bi izoliral klon, ki proizvaja monoklonska protiitelesa? 8. Molekularno predstavi delovanje formalina pri pripravi mrtvih bakterijskih cepiv E. coli. 9. Regulacija DNA replikacije! 10. Kaj so heterofilni antigeni? 11. Biotehnoloski problem: rastlina proizvaja artemisinin (seskviterpenski lakton). Za njegovo sintezo je pomemben encim, katerega primarno strukturo poznamo, ne pa nukleotidnega zaporedja. Rastlina tvori produkt v premajhni kolicini. Kako bi biotehnološko pripravili transgeno rastlino, ki bi tvorila vsaj 10-krat toliko produkta? • • •

Opiši celoten potek pridobitve genske informacije (3 tocke) Opiši pripravo transgene rastline (2 tocki) Kako bi analiziral produkt? (1 tocka)