Informe_fenoles-3.docx

UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS

Departamento de Ciencias de la Vida y la Agricultura Fitoquímica INFORME DE LABORATORIO Integrantes: Álvarez Jesús, Campaña Alexis, Criollo Victor, Simaluisa Dayana. NRC: 4217

Docente: Dra. Blanca Naranjo

1. TEMA Extración y cuantificación de fenoles por un método analítico. 2. OBJETIVOS 2.1 Objetivo General Extraer y cuantificar fenoles de Cyclamen persicum (ciclamen) utilizando solventes polares. 2.2 Objetivos Específicos    

Realizar una curva de calibración a partir de soluciones estándares. Comprender el mecanismo de oxidación de fenoles con el reactivo de FolinCiocalteu. Cuantificar los fenoles presentes en Cyclamen persicum (ciclamen) comparando con una curva de calibración obtenida. Evaluar el contenido de compuestos fenólicos del extracto de Cyclamen persicum (ciclamen).

3. RESULTADOS A 1.2 1.0 0.8 0.6 0.4 0.2 0.0 0

100

200

300

400

500

600

700

800

900

mg/L

Parámetros de la curva: y = 1,280151E-03 x -4,786227E-02 Resíduos: 0,0169 Coeficiente de Correlación: 0,99919 Fecha: 11/12/2017 16:00:49

Fig 1. Curva de calibracion para la cantificación de fenoles.

1000

Tabla 1. Patrones para la curva de calibración realizada en el espectofotómetro.

Nº

Concentración [mg/L]

Ordenadas [A]

Error [A]

Empleado

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18

100 100 100 300 300 300 500 500 500 700 700 700 900 900 900 1000 1000 1000

0,083 0,089 0,088 0,320 0,332 0,328 0,588 0,576 0,581 0,865 0,878 0,863 1,099 1,114 1,060 1,185 1,246 1,194

0,003 0,009 0,007 -0,016 -0,005 -0,008 -0,004 -0,016 -0,012 0,017 0,030 0,015 -0,005 0,010 -0,044 -0,047 0,014 -0,038

Sí Sí Sí Sí Sí Sí Sí Sí Sí Sí Sí Sí Sí Sí No No Sí Sí

Tabla 2. Concentración de fenoles presentes en Cyclamen persicum (ciclamen) realizado en el espectofotómetro.

Muestra

Factor de dilución

Ordenadas [A]

Concentración [mg/L] en 1 g de muestra

Concentración [mg/L] en 100 g de muestra

1 2 3

0,25 0,25 0,25

0,013 0,015 0,019

19,75 21,25 23,75 Promedio:

0.1975 0.2125 0.2375 0.2158

4. DISCUCIÓN La extracción de compuestos fenólicos con disolventes orgánicos, se utiliza en el pretratamiento de la muestra para la cuantificación. Las características físicas de las muestras cambian debido a la polaridad del solvente, por el tiempo y la temperatura de extracción, quedándonos un precipitado despigmentado más los componentes disueltos en el solvente (Ochoa & Michelis, 2013). Al realizar la extracción con metanol acidificado, la muestra se decoloro parcialmente, comprobando demostrado la presencia de fenoles. El coeficiente de correlación lineal se correlacionan en sentido directo si r >0. Si r = 1 se habla de una correlación positiva perfecta, es decir existe una relación lineal perfecta (Lahura, 2003). Se utilizó un r igual a 0.99919, de donde se deduce que existe una fuerte relación lineal positiva entre la concentración de ácido gálico y la absorbancia. No se utilizó el r=0.33 que obtuvo nuestro grupo porque significa que no existe relación lineal entre los datos. Este error fue producido debido a que los principales factores que gobiernan la degradación de las fenoles son el pH, temperatura y concentración de oxígeno (Luna, Barreto, & Marín., 2016).

El método de Folin-Ciocalteu proporciona una evaluación media de fenoles totales presentes en el extracto de la planta, basándose en la oxidación de compuestos fenólicos a pH básico, dando lugar a una coloración azul intensa, que es susceptible a ser determinada por espectrofotometría 765 nm, cuantificado en base a una recta patrón de ácido gálico. Este método no es muy preciso debido a la interferencia de algunas moléculas que pueden reaccionar con el reactivo dando concentraciones de fenoles elevadas lo cual puede alterar los resultados. Esto se pudo confirmar en nuestra práctica debido a que la oxidación de fenoles con el reactivo de Folin-Ciocalteu no dio la coloración azul intensa por lo cual existió una alteración en los resultados (Muñoz et al, 2017). La concentracion de fenoles [mg/L] en 100 g de muestra de Cyclamen persicum (ciclamen) fue 0.2158 en promedio. Según un estudio de Jaradat, y otros (2017), la concentración para la misma cantidad de muestra fue de 0.327 en promedio aproximadamente. Esta variación puede deberse a un error al realizar las diluciones del extracto de la muestra. 5. CONCLUSIONES 





Fue posible la extracción de fenoles presentes en Cyclamen persicum (ciclamen) utilizando metanol acidificado como solvente polar para triturar la muestra y evitar alteraciones en los compuestos. Se obtuvo una curva de calibración con una relacion lineal muy baja, por lo que se utilizó una curva de cursos anteriores. La ecuacion de la curva fue: y=1,280151E-03 x -4,786227E-02. La concentracion de fenoles en Cyclamen persicum (ciclamen) fue de 0.2158 [mg/L] en 100 g de muestra.

6. BIBLIOGRAFÍA

Jaradat, N. A., Al-Masri, M., Hussen, F., Zaid, A. N., Ali, I., Tammam, A., & & Rajabi, A. (2017). Preliminary Phytochemical and Biological Screening of Cyclamen coum a Member of Palestinian Flora. Pharmaceutical Sciences . Luna, Barreto, & Marín. (2016). DESARROLLO DE UN MODELO MATEMÁTICO QUE PERMITA PREDECIR EL CAMBIO DEL CONTENIDO DE POLIFENOLES EN UNA MATRIZ. Revista de asociacion colombiana de ciencia y tecnología de alimentos, 117-128. Muñoz et al. (2017). NUEVO ACERCAMIENTO A LA INTERACCIÓN DEL REACTIVO DE FOLIN-CIOCALTEU CON AZÚCARES DURANTE LA CUANTIFICACIÓN DE POLIFENOLES TOTALES. TIP Revista Especializada en Ciencias QuímicoBiológicas. Ochoa, M., & Michelis, A. (2013). Compuestos bioactivos en frutas pequeñas de la Patagonia argentina: Efecto del solvente. Argentina : Editorial Recitela.