Informe -abs Carbs

INTEGRANTES: 1. ALIAGA ECHEVARRIA, KATIA 2. BARRAGÁN RIVAS, DANIEL 3. CASTRO CONSTANTINO, JOSE 4. GOMEZ CASTRO, JOSE

5. VELEZ ABANTO FRANKLIN

Laboratorio de Bioquímica

EXPERIMENTO Absorción de la glucosa por el intestino de la rata

1.Preparación de Homogenizado de higado

• Pesar 10 g de higado de pollo y triturarlo adicionandole una solución KCl ( 9g/1000 ml)

• Luego filtrar y centrifugar a 3500 rpm por 10 minutos

• Utiizar liquido centrifugado.

el

Luego proceder a preparar 4 tubos de acuerdo al siguiente esquema.

TUBO

1

2

3

4

ml solución de Potter pH 7,4

2,5

2,5

2,5

2,5

ml Glucosa 0,1 m

0,5

0,5

0,5

0,5

ml NAD 10m g/ml

0,2

0,0

0,2

0,2

ml ATP 5m g/ml

0,2

0,2

0

0,2

ml Nicotinamida 0,4m

0,1

0,1

0,1

0,1

ml Fluoruro de sodio 0,1m

0

0

0

0,1

ml Agua destilada

0,1

0,3

0,3

0

Colocar en baño de maría 37ºC por 5 minutos Gotas de rojo de fenol

Ii

Ii

ii

Ii

ml homogenizado de hígado

0,5

0,5

0,5

0,5

Tapar e incubar 1 hora a 37ºC Titular cada tubo con NaOH 0,01N hasta el color original

RESULTADOS

Los resultados dependen de las sustancias que son añadidas a cada uno de los 2 tubos, cuales son los tubos 3 y 4.

3

4

TUBO Nº 1: TUBO CONTROL ➢ Presencia de glucosa ➢ Presencia de agua

➢ No tiene solución diluida intra saco ➢ No tiene solución diluida extra saco  No se trabajo con la solución intra ni extra saco, por lo tanto no

se evidencio una actividad de la glucosa en el intestino.  No se llevo al espectrofotómetro, por lo tanto no medimos su absorbancia, ya que solo se iba a utilizar como un patrón de color para ver como viraban los demás tubos.  Su color es un amarillo muy pálido, el mas claro de todos los tubos.

TUBO Nº 2: TUBO PATRON ➢ Presencia de glucosa ➢ No tiene agua

➢ Presencia de la solución patrón ➢ No tiene solución diluida intra saco ➢ No tiene solución diluida extra saco  Como no se trabajo con la solución intra ni con la extra saco

    

entonces al ponerle la glucosa estos no interactuaron. El intestino del cuy no perdió ni necesito mas líquido fuera o dentro del saco así que quedo en une estado basal. Este fue el primer tuvo que medimos en el espectrofotómetro para tenerlo de patrón en la absorbancia. Se observa una coloración amarilla muy transparente La absorbancia en el TUBO Nº 2 es 0.137. Lo que nos indica que es significativamente clara que el TUBO Nº 3.

TUBO Nº 3: ➢ Presencia de glucosa ➢ No tiene agua

➢ No tiene la solución patrón ➢ Tiene solución diluida intra saco ➢ No tiene solución diluida extra saco  Se trabajo con la glucosa que interactúo con la solución intra saco.  El intestino del cuy no perdió en cambio necesito mas líquido dentro del saco, ósea hubo una absorción.  La absorbancia es mayor que el TUBO Nº4.  La absorbancia en el TUBO Nº 3 es 0.086  Coloración amarillo transparente (poco mas que el TUBO Nº 4).

TUBO Nº 4: ➢ Presencia de glucosa ➢ No tiene agua

➢ No tiene la solución patrón ➢ No tiene solución diluida intra saco

➢ Tiene solución diluida extra saco

 Se trabajo con la glucosa que interactúo con la solución extra saco.  El intestino del cuy no perdió en cambio necesito mas líquido dentro del saco, ósea hubo una absorción.  La absorbancia es menor que el TUBO Nº3.  La absorbancia en el TUBO Nº 4 es 0.041.  Coloración amarillo transparente (poco menos que el TUBO Nº 3).

CONCLUSIONES ➢La ABSORCIÓN de la glucosa en el Yeyuno-Íleon se realiza a

través de las vellosidades y microvellosidades intestinales que aumentan la superficie de absorción, la glucosa es absorbida por Difusión facilitada si este cuy hubiera estado vivo y sus intestinos ubieran estado aun unidos se hubiera visto que la glucosa pasa a los capilares centrales de las vellosidades intestinales y de ahí es transportada por la sangre arterial a todas las células del cuerpo. ➢Otro mecanismo que sucedió al momento de exponer al intestino

Copn la glucosa fue la aparición del Glut 5 se encuentra en el intestino delgado en el lado arterial de la célula epitelial, y actúa conjuntamente con el cotransportador de la glucosa y el sodio en el lado luminal. ➢Y también SGLT 1 es un sistema específico de transporte dependiente de Na + para la D-glucosa y la D-galactosa, realiza el cotransporte activo de estos azúcares junto con Na+ desde la superficie luminal de las células con borde en cepillo

➢ La ABSORBANCIA:

Hay menor absorbancia en el tubo 4 debido a que hay menor cantidad de sustrato ósea que se a absorbido en cambio en el tubo 3 hay gran cantidad de sustrato, ósea esta mas concentrado y por lo tanto hay mayor absorbancia como se puede ver en los resultados a continuación: •

•

TUBO Nº 2 : 0.137 (tubo patrón)  TIENE SOLUCIÓN PATRÓN.

LA

GLUCOSA

Y

LA

TIENE

LA

GLUCOSA

Y

LA

TIENE

LA

GLUCOSA

Y

LA

TUBO Nº 3 : 0.086 

SOLUCIÓN INTRA SACO. •

TUBO Nº 4 : 0.041 

SOLUCIÓN EXTRA SACO.

➢ La CONCENTRACIÓN se obtuvo a través del tubo patrón (Nº2)

que tiene 20ml/dL entonces teniendo este dato y su absorbancia pudimos sacar el factor de calibración ( Fc= C/A)  TUBO Nº 2 : Fc= C/A => Fc= 145.99  TUBO Nº 3 : C= AxFc => C= 12.55514

•

TUBO Nº 4 : C= AxFc => C= 5.98559

Curva de Calibración 25

Absorbancia

20 15 10 5 0

0,086

0,041

0,137

Concentración

➢ La COLORACIÓN en los TUBOS Nº 3 Y 4, son muy parecidas

(amarillo), debido a que hubo solución intra y extra saco • •

TUBO Nº3: solución intra saco. TUBO Nº4: solución extra saco

➢ La solución Ringer Fosfato pH 7,4 con 0,2% de glucosa El HCl

0.05 N, la utilizamos dentro y fuera del intestino cerrado esperamos aproximadamente media hora para que esta fuera absorbida ya que el cuy estaba con 1 día de ayuno. ➢ Esperamos ese tiempo ya que como sabemos la cantidad de azucar es igual a un gramo por un kilogramo e peso corporal en una hora.

DISCUSIONES Los resultados obtenidos de la absorción de la glucosa, El transporte de glucosa hacia el interior celular, en contra de su gradiente de concentración, es óptimo cuando existe un gradiente de Na+ a favor, que supere la fuerza antagónica que genera el gradiente de la hexosa. Si la concentración de Na+ externa, es mucho mayor que la interna, el Na+ ligado al transportador tenderá a trasladarse hacia adentro, a favor del gradiente del Na+. El transportador para que funcione, necesita también de glucosa ligada. Entonces el transporte de Na+ a favor de un gradiente puede "arrastrar" también glucosa al interior celular, mediante un transportador pasivo con dos sitios de enlace como se anotó anteriormente, uno para el Na+ y otro para la glucosa. Así de esta manera, se logra acumular glucosa en contra de un gradiente siempre y cuando el gradiente de Na+ hacia el interior exceda el gradiente hacia fuera de la glucosa. La molécula transportada y el ion cotransportado se dirigen en la misma dirección. A esto justamente es a lo que se le denomina cotransporte paralelo. Lo que se vio en el intestino del cuy.

BIBLIOGRAFIA

1.

Bioquímica de Harper; Robert K. Murry, Darul K. Granner, Peter A. Mayes, Víctor W. Rodwell; veintisieteava edición;

2. Bioquímica, las bases moleculares de la estructura y función celular. Albert L. Lehninger. Séptima edición. 3.

www.iocd.unam.mx/organica/lab2/135.htm

4.

www.arrakis.es/~rfluengo/imagenes/glumaterial.jpg

1.

http://www.abcmedicus.com/articulo/pacientes/id/379/ pagina/1/experimentoes.html

2.

http://www.monografias.com/trabajos24/respiracion/tis ular.html

3.

http://www.es.geocities.com/joakinicu/apartado2e.htm

4.

www.zonadiet.com/respiracion/tisular.htm