Farmacologia Practica1 (1).docx

Universidad Autónoma de Nuevo León Facultad de Ciencias Químicas Farmacología I

Dr. Marcos Jair Guerrero Muñoz GRUPO 02 Integrantes: Gricelda Denisse Nuñez Tirado #1672020 Diana Laura Jerónimo López #1885697 Jaime Arturo Mondragón Flores #1836051 Merari Elioenai Salazar García #1836059 Andrea Monserrat Nava Alanís #1658952

Práctica #1. Determinación de parámetros farmacocinéticos del ácido acetil salicílico

Introducción Los salicilatos son medicamentos denominados AINES (antiinflamatorio no esteroideo) que se utilizan para tratar el dolor e inflamación y en algunos casos para el alivio de la fiebre. Este tipo de medicamentos, por lo general, son de venta libre por lo cual su uso desmedido puede ser tóxico para las personas. Los salicilatos son derivados del ácido salicílico tales como la aspirina, el salicilato de colina, salicilato de magnesio, salicilato de sodio, entre otros. Este tipo de medicamentos pueden causar efectos secundarios como lo son diarreas, náuseas, vómito, estreñimiento, distención abdominal, etc.

La concentración terapéutica de salicilatos en sangre es de 10-30 mg/dl y en condiciones normales, esta concentración plasmática se alcanza en 30 minutos y es máxima pasada 1 hora, pero en sobredosis puede tardar en alcanzarse hasta 46 horas. Por tanto, la valoración de la salicilemia debe hacerse en base a una muestra obtenida al menos 6 horas post-ingesta. La dosis tóxica por ingesta de AAS se estima en 150 mg/kg de peso (intoxicación leve). Entre 150 y 300 mg/kg, las manifestaciones serán moderadas y son muy graves las intoxicaciones con dosis superiores a 300 mg/kg (potencialmente mortales al superar los 500 mg/kg). Cuando se presenta una intoxicación ya sea aguda o crónica por salicilatos o por algún AINE en general se pueden presentar los siguientes efectos colaterales: ulceras gástricas, disminución de la función renal, aumentar la presión sanguínea, etc. Las manifestaciones más importantes en el envenenamiento por salicilatos son la hiperpnea, y los trastornos en el equilibrio ácido-básico.

Los salicilatos se pueden determinar ya sea cualitativa o cuantitativamente en muestras de orina o sangre mediante reacciones colorimétricas creando complejos.

Objetivo: Determinar los parámetros farmacocinéticos del ácido acetil salicílico en una muestra de sangre.

Fundamento La determinación de ASA se basa en la formación de un complejo de color púrpura por reacción de los salicilatos con nitrato férrico y la precipitación simultánea de las proteínas séricas en presencia de cloruro mercúrico en medio ácido. Posteriormente la solución coloreada es sometida a un análisis espectrofotométrico a 540 nm.

Reactivos: Ácido acetil salicílico Nitrato férrico Cloruro mercúrico Tableta de aspirina de 500 mg (una para cada voluntario) Agua destilada Ácido clorhídrico 0.1N

Equipo: Matraces erlem meyer Matraz de aforación 250 mL Tubos para sacar sangre que contengan oxalato de sodio Equipo para sacar sangre (vacutainer o jeringa y torniquete, torunda) Bolsa para RPBI Espectrofotómetro UV-Vis. Preparación de soluciones: Solución de fierro y mercurio: 10 g de cloruro mercúrico en una pequeña cantidad de agua destilada en matraz A

En matraz B: 10 g de nitrato férrico disueltos en 30 mL de ácido clorhídrico 1N Mezclar ambas soluciones y aforar en matraz volumétrico de 250 mL con agua destilada

Solución de estándar de aspirina: Solución stock de aspirina, 0.1 mg/mL de ácido acetil salicílico en agua destilada. De esta solución se preparan estándares de 10, 20, 40, 60, 80 y 100 µ/mL.

Procedimiento: Preparación de la curva de calibración: Tomar un mL de cada estándar y colocarlo en un tubo de ensayo. Aplicar calor: 3-5 min a 45+/-2°C. Enfriar con agua corriente Añadir 5 mL de reactivo cloruro férrico-mercúrico a cada tubo de estándar. Llevar un blanco con 1ml de agua destilada más 5 ml del reactivo Calentar todos los tubos de nuevo, por 1-2 minutos Enfriar y medir la absorbancia a 540 nm contra el blanco preparado.

Análisis de aspirina en suero: Cada voluntario tomara una tableta de ácido acetil salicílico de 500 mg. Después de 0.5, 1 y 2 hr extraer 5 - 10 mL de sangre en tubos de ensayo con 0.5g de oxalato de sodio. Centrifugar las muestras a 4500 rpm por 5 minutos. Tomar 1 mL del suero sobrenadante y colocarlo en un tubo de ensayo (realizarlo por triplicado). Se añaden 5 mL del reactivo férrico-mercúrico y se agita por 2-3 minutos. Si es posible utilizar un vortex Centrifugar a 4500 rpm para la precipitación completa de las proteínas plasmáticas. El sobrenadante es recolectado y la absorbancia se mide a 540 nm.

Resultados: Identificación de muestra: Lote: 232N Caducidad: JUN 20 Tabletas 500 mg

X [µg/ml] 10 20 40 60 80 100

Y Absorbancia 0.125 0.134 0.152 0.17 0.188 0.197

Corrección con blanco BLANCO: 0.056 X [µg/ml] 10 20 40 60 80 100

muestra 1 2

tiempo 1:30 h 2:00 h

Absorbancia 0.14 0.078

Corrección con blanco BLANCO: 0.056 muestra tiempo 1 1:30 h 2 2:00 h

Y Absorbancia 0.069 0.078 0.096 0.114 0.132 0.141

Absorbancia 0.084 0.022

Absorbancia

Curva de calibracion del ácido acetil salicílico 0.16 0.14 0.12 0.1 0.08 0.06 0.04 0.02 0

y = 0.0008x + 0.0622 R² = 0.9914 r= 0.9956

0

20

40

60

[µg/ml]

80

100

120

[ ]muestra 1 =

0.084−0.0622

[ ] muestra 2=

0.022−0.0622

0.0008

0.0008

= 27.25 µg/ml

= 48.55 µg/ml

Discusión: Los resultados obtenidos experimentalmente son muy parecidos a los reportados en la literatura, en donde los sujetos de prueba fueron 12 mujeres de edades entre los 20 y 22 años con un peso y altura promedio de 57.7 Kg y 159.9 cm respectivamente. En dicho estudio se reporta que la concentración plasmática luego de 2 horas de haberse administrado una dosis oral de 600 mg de aspirina fue de 49.66 μg/mL. Mientras que la concentración plasmática que obtuvimos experimentalmente después de 2 horas de la administración oral de aspirina de 500 mg de nuestro sujeto de prueba cuyos datos de sexo, edad, peso y altura coinciden con los rangos del experimento llevado a cabo en la literatura (mujer de 20 años con un peso de 50 Kg y una altura de 1.58 cm) fue de 48.55 μg/mL. Tal similitud entre nuestro sujeto de prueba y las 12 mujeres del estudio nos permite hacer una comparación rápida de los valores. A pesar de que hay una diferencia de 100 mg entre las dosis administradas, la concentración plasmática es prácticamente la misma en ambos experimentos. Cabe señalar que a los sujetos de prueba del estudio reportado en la literatura no se les restringió un consumo de alimentos ni se reporta que hayan realizado ejercicio u otro tipo de actividad física previo al muestreo de sangre, mientras que en nuestro experimento el sujeto de prueba no había desayunado previamente y realizó ejercicio físico 7 horas antes de la toma de muestras. Estos factores pueden influenciar los resultados y justificar por qué la diferencia entre las concentraciones plasmáticas es tan similar y no mayor a pesar de los 100 g de diferencia entre las dosis administradas de aspirina. Solo fue posible obtener 2 muestras de sangre de la persona que ingirió el del ácido acetil salicílico, ya que se realizó venopuncion en ambos brazos, pero no le salía sangre al paciente, entre las posibles causas de esta situación está la deshidratación o el estado anímico de la persona no obstante, se obtuvieron 2

muestras a la 1:30 h y 2:00 h, finalmente se tomó otra muestra a las 2:15:00 hr pero la cantidad de muestra que se le logra sacar no fue suficiente para poder realizar la determinación por lo que solo se cuantificaron los salicilatos en 2 muestras.

Conclusión: Con base en la práctica realizada se pudo cuantificar los salicilatos en sangre obteniendo 27.25 µg/ml para la muestra 1 y 48.55 µg/ml por lo tanto se prefiere el consumo de la marca miloden porque alcanza concentraciones plasmáticas más altas en menor tiempo.

Bibliografía: H. N. B., . B. S., . A. I., . S. R., & . R. N. (2009). Pharmacokinetic Study of Aspirin in Healthy Female Volunteers. Pakistan Journal of Biological Sciences. https://doi.org/10.3923/pjbs.2003.1404.1407