“AÑO DEL BUEN SERVICIO AL CIUDADANO ”
UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN MARTIN- TARAPOTO
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA AGROINDUSTRIAL FACULTAD DE INGENIERIA AGROINDUSTRIAL
ASIGNATURA
:
MICROBIOLOGIA AGROINDUSTRIAL.
TEMA
:
“DETERMINACION DE BACTERIAS HETERÓTROFAS”
DOCENTE
:
ING.NELSON GARCIA GARAY.
ALUMNOS
:
GINO RENGIFO GANOZA. JOSÉ LUIS CASTILLO JIBAJA.
FECHA
:
28/11/2017
Tarapoto –Peru 2017
PRACTICA:
“DETERMINACIÓN DE BACTERIAS HETERÒTROFAS”
I.
INTRODUCCIÓN Las bacterias se encuentran en todas parte del planeta, ya sea integrando relaciones simbióticas con diversos organismo conocidos, por ejemplo algunas se encuentran formando parte de la flora intestinas de animales y el hombre, además una de las características notable de ellas es que se les encuentra en diversas condiciones climáticas, favoreciendo así la producción de nutrientes específicos que son utilizadas por otros organismos para su propia sobrevivencia, se les encuentra en ambientes reductoras u oxidantes de materia orgánica e inorgánica. Aludiendo a lo mismo también se les encuentra en aguas, suelos húmedos y secos, lugares ácidos, alcalinos, y en el aire. Las bacterias hoy en día son de gran importancia, debido a la producción de distintas sustancias y al cultivo de algunas otras para cosechar un gran beneficio para el hombre con el objetivo de inhibir o combatir algunas enfermedades producidas por un descontrol en el propio organismo, como es el caso de la diabetes, el cáncer y algunos otros síndromes. De la misma manera se encuentran como autoras de diversas enfermedades en plantas, en animales y el caso muy especial, en el hombre. Debido a la importancia radical ecológica de estos microorganismos la presente va encaminada a proporcionar información acerca de la actividad de las bacterias heterótrofas por medio de muestras de agua residuales. La importancia de llevar a cabo investigación de ésta índole se debe a que la aguas residuales, son de principal utilidad tanto para fines de consumo humano como para la propia agricultura de los campesinos, también es importante mencionar que la gran mayoría de bacterias productoras de enfermedades se encuentran en éste grupo (bacterias heterótrofas), debido a lo mismo es de principal importancia conocer a qué se exponen las personas que hacen uso las aguas residuales , además informar qué tipo de riesgos se corre al consumir alimentos cosechados con aguas de éste tipo, que por lo que se mencionó que se utilizan para el riego de hortalizas y otros cultivos por los campesinos.
II.
OBJETIVOS. -
III.
Introducir en el estudiante, las operaciones básicas de determinación de bacterias heterótrofas. REVICION DE LITERATURA. Las bacterias se clasifican en autótrofas y heterótrofas; las primeras utilizan compuestos inorgánicos oxidados como única fuente de energía y CO2 como fuente de carbono, el segundo grupo requiere una forma orgánica de carbono como
nutrientes, una de las cuales son los carbohidratos, además utilizan CO2, pero no les satisface las necesidades de carbono. Estas son de gran importancia, puesto que participan en los procesos de auto purificación del agua y procesos biogeoquímicos presentes en la misma, también intervienen en la producción de diversas enfermedades (cuadro 1). Muchas de estas bacterias presentan una gran diversidad con respecto a sus necesidades de nitrógeno, e incluso algunas crecen en medios exentos de vitaminas. Las bacterias heterótrofas pertenecen al grupo de las enterobacterias (tabla 1), que son negativas a la tinción de Gram, además tienen forma de bacilos de tamaño mediano, que pueden ser aerobios y anaerobios facultativos, son fermentativas de algunos carbohidratos, casi siempre con producción de gas, y generalmente son móviles, reducen los nitratos y los nitritos, necesitan de compuestos orgánicos tanto como para obtener energía como para su crecimiento. Se asocian con enfermedades humanas, algunas de ellas son provenientes de heces fecales y la presencia de estas en medios externos como es el agua indica una contaminación de origen fecal, además son productoras de enfermedades gastrointestinales en el hombre, en algunos animales y en algunos peces que se ven perjudicados con la presencia de estas bacterias en el agua en que ellos se encuentran, algunos ejemplos de géneros bacterianos patógenos pertenecientes a éste grupo son las que se mencionan a continuación: Escherichia, Shigella, Edwardsiella,Citrobacter, Salmonella, Klebsiella,Enterobacter, Serratia, Proteus, Yersinia,y Erwinia. Los
síntomas
de
las
enfermedades
de
enterobact
erias se debe en gran parte a la producción de endotoxinas que ellas fabrica, por ejemplo las enterotoxinas de E. coli tienen importancia en las enfermedades diarreicas, Salmonella y Shigella son francamente patógenas, otros géneros como Proteus, Serratia y Enterobacter, con patógenos oportunistas que producen enfermedades bajo determinadas condiciones, por ejemplo en casos de traumatización de tejidos (mastitis), estados de debilidad, heridas y desnutrición. La infección o riesgo a sufrir alguna enfermedad por alguna enterobacteria se produce en la mayoría de los casos por ingestión, ya sea por agua contaminada o en alimentos que también es muy común su presencia, sobre todo los que están en contacto con el ambiente exterior como los que se elaboran y se consumen en los puestos de mercados, calles, etc.es por esto que debe tenerse mucha precaución de no consumir alimento en cualquier lugar. La contaminación fecal del agua y de los alimentos en contacto con ella está determinada por la presencia de E. coli, organismos coliformes, Estreptococcus fecalis y el Clostridium perfringens. Como ya se mencionó, las bacterias heterótrofas requieren sustratos ricos en nutrientes de carbono, por lo tanto una concentración elevada de compuestos orgánicos en el agua o donde quiera que
exista ésta revela la presencia de éste tipo de bacterias En el canal de cuemanco se han hecho una gran cantidad de investigaciones bacteriológicas cuantitativas, una de ellas revela la presencia de Pseudomona aeruginosa, Pseudomona putida, E. coli, entre otras. La distribución del grupo coniforme en aguas dulces representa un peligro para la salud humana, debido a un aumento de de aguas negras, de desechos domésticos, de residuos industriales, en su mayorías residuos orgánicos, y drenajes de campor agrícolas se has reportados la presencia de bacilos Gram negativos y Cocobacilos, en formas de cadenas: Sarcinas, Estafilococos y Diplococos, También se han identificado bacterias Grampositivas, como el subgénero Aerobacillus; esporógeno, Grampositivo que produce gas. IV.
MATERIALES Y METODOS a) MATERIALES - Placas Petri. - Tubos de ensayo - Pipetas - muestras que contengan baterías heterotrofas - Agitador de tubos - Agar Mac conkey - Gradillas - Mechero b) METODOS
-
-
PROCEDIMIENTO Pesar 10,0 gramos de la muestra y colocar en un matraz con 90,0 mL de solución diluyente adecuada. Para el recuento de microorganismos, se realiza un recuento en placa, Se recolectan muestran que contengan bacterias heterótrofas. Anotar, la clave y número de las muestras a sembrar. Verificar que el volumen de cada tubo de dilución marcado, contengan 9 mL. Preparar diluciones decimales de,101 , 102 ,103 , etc. a partir de la muestra líquida directa. Identificar las placas Petri que se incubarán a temperatura entre el rango 20 ºC y 28°C. Colocar clave, número de la muestra y dilución a cada una de ellas. Sembrar 1 mL por duplicado de la muestra directa y cada dilución en placas estériles previamente identificadas. Verter en cada placa Petri aproximadamente 15 mL de Agar Mac conkey previamente fundido y mantenido en baño de agua a 47ºC. Mezclar el inóculo con el medio fundido, inclinando y girando las placas. Una vez solidificado el Agar Mac conkey, invertir las placas rápidamente para prevenir el crecimiento de colonias invasivas por acumulación de humedad. Incubar a temperatura entre el rango de 20ºC a 28°C durante 6 días. Luego de cumplir el período de incubación, realizar la lectura de las placas Examinar las muestras dudosas con mayor aumento para distinguir las colonias de materias extrañas. Anotar la dilución usada y el número de colonias contadas en cada placa.
V.
BIBLIOGRAFIA -
www.facbio.unitru.edu.pe/index.php?option=com_docman&task=doc... Rheinheimer R. 1987. Microbiología de las aguas. Acribia, S.A. 15-16 p. bvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/manual_practico_analisis_agua_4_ed.pdf http://www.scielo.org.co/scielo.php