Croma En Papel 16-02-09
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- Words: 460
- Pages: 13
Desarrollo Histórico:
Desarrollado desde 1944 por J.P. Martin et.al. para investigaciones en biotecnología, por ejemplo: Determinación de aminoácidos en proteínas (usando ninhidrina como revelador). Aislamiento e identificación de ácidos nucleicos.
Separación de iones metálicos.
Separación de pigmentos vegetales Aislamiento e identificación de aminoácidos en la insulina. Sanger recibió el Nobel de Química 1958 por este trabajo.
En ésta técnica, la celulosa del papel actúa como soporte de la fase estacionaria, que suele ser agua (cromatografía de partición).
La celulosa es un polisacarido, formado por millones de unidades de ß-glucosa, es incolora e insoluble en agua y en la mayor parte de disolvetes organicos. La celulosa es la biomolécula mas abundante que existe en nuestro planeta.componente principal de las paredes celulares vegetales.es una fibra que al ser observada en el microscopio es similar a un cabello humano,cuya longitud y espesor varia segun el arbol o planta.
Esta técnica puede efectuarse con el desarrollo frontal ascendente o descendentemente.
Para lograr un desarrollo óptimo de los cromatogramas es necesario controlar los siguientes factores:
La difusión molecular y la difusión turbulenta: aplicando las muestras suficientemente separadas entre sí y a una distancia prudencial del frente inicial del solvente.
La resistencia a la transferencia de la mancha: usando disolventes con una viscosidad adecuada.
El pH del medio (importante en separación de aminas, alcaloides y ácidos orgánicos).
•
Existen en el comercio papeles “impregnados” con sílica gel o alúmina para separaciones en fase reversa (para sustancias moderadamente hidrófilas o hidrófobas); silicona, parafina, látex, dimetilformamida o aminas de alto peso molecular.
•
Los papeles “cargados” con resinas poliestirénicas o intercambiadores de iones permiten la separación de sustancias orgánicas o inorgánicas poco polares o iónicas, respectivamente.
•
Existen también papeles tratados químicamente para alterar la estructura polimérica de la celulosa y así ampliar la aplicabilidad de ésta técnica.
•
Puede usarse papel de fibra de vidrio para condiciones de pH y temperatura extremas.
•
Para condiciones especialmente extremas
•
Los papeles “cargados” con resinas poliestirénicas o intercambiadores de iones permiten la separación de sustancias orgánicas o inorgánicas poco polares o iónicas, respectivamente.
•
Existen también papeles tratados químicamente para alterar la estructura polimérica de la celulosa y así ampliar la aplicabilidad de ésta técnica.
Selección de Disolventes por familias de Compuestos a Separar:
Selección de Disolventes por familias de Compuestos a Separar:
Rf: Es el cociente entre la distancia recorrida por la mancha de la sustancia (respecto a su centro geométrico), y la distancia recorrida al mismo tiempo por el frente del disolvente. Rx: Es el cociente entre la distancia recorrida por la mancha de una sustancia de referencia (respecto a su centro geométrico), y la distancia recorrida el mismo tiempo por el frente del disolvente.
Desarrollo Histórico:
Desarrollado desde 1944 por J.P. Martin et.al. para investigaciones en biotecnología, por ejemplo: Determinación de aminoácidos en proteínas (usando ninhidrina como revelador). Aislamiento e identificación de ácidos nucleicos.
Separación de iones metálicos.
Separación de pigmentos vegetales Aislamiento e identificación de aminoácidos en la insulina. Sanger recibió el Nobel de Química 1958 por este trabajo.
En ésta técnica, la celulosa del papel actúa como soporte de la fase estacionaria, que suele ser agua (cromatografía de partición).
La celulosa es un polisacarido, formado por millones de unidades de ß-glucosa, es incolora e insoluble en agua y en la mayor parte de disolvetes organicos. La celulosa es la biomolécula mas abundante que existe en nuestro planeta.componente principal de las paredes celulares vegetales.es una fibra que al ser observada en el microscopio es similar a un cabello humano,cuya longitud y espesor varia segun el arbol o planta.
Esta técnica puede efectuarse con el desarrollo frontal ascendente o descendentemente.
Para lograr un desarrollo óptimo de los cromatogramas es necesario controlar los siguientes factores:
La difusión molecular y la difusión turbulenta: aplicando las muestras suficientemente separadas entre sí y a una distancia prudencial del frente inicial del solvente.
La resistencia a la transferencia de la mancha: usando disolventes con una viscosidad adecuada.
El pH del medio (importante en separación de aminas, alcaloides y ácidos orgánicos).
•
Existen en el comercio papeles “impregnados” con sílica gel o alúmina para separaciones en fase reversa (para sustancias moderadamente hidrófilas o hidrófobas); silicona, parafina, látex, dimetilformamida o aminas de alto peso molecular.
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Los papeles “cargados” con resinas poliestirénicas o intercambiadores de iones permiten la separación de sustancias orgánicas o inorgánicas poco polares o iónicas, respectivamente.
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Existen también papeles tratados químicamente para alterar la estructura polimérica de la celulosa y así ampliar la aplicabilidad de ésta técnica.
•
Puede usarse papel de fibra de vidrio para condiciones de pH y temperatura extremas.
•
Para condiciones especialmente extremas
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Los papeles “cargados” con resinas poliestirénicas o intercambiadores de iones permiten la separación de sustancias orgánicas o inorgánicas poco polares o iónicas, respectivamente.
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Existen también papeles tratados químicamente para alterar la estructura polimérica de la celulosa y así ampliar la aplicabilidad de ésta técnica.
Selección de Disolventes por familias de Compuestos a Separar:
Selección de Disolventes por familias de Compuestos a Separar:
Rf: Es el cociente entre la distancia recorrida por la mancha de la sustancia (respecto a su centro geométrico), y la distancia recorrida al mismo tiempo por el frente del disolvente. Rx: Es el cociente entre la distancia recorrida por la mancha de una sustancia de referencia (respecto a su centro geométrico), y la distancia recorrida el mismo tiempo por el frente del disolvente.
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