KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING FITOKIMIA SERTA UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN JUS BUAH SIRSAK DAN EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK (Annona muricata L.)
SKRIPSI
OLEH: RINA RIANES NIM 050804005
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2012
Universitas Sumatera Utara
KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING FITOKIMIA SERTA UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN JUS BUAH SIRSAK DAN EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK (Annona muricata L.)
SKRIPSI Diajukan untuk Melengkapi Salah Satu Syarat untuk Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara OLEH: RINA RIANES NIM 050804005
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2012
Universitas Sumatera Utara
PENGESAHAN SKRIPSI
KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING FITOKIMIA SERTA UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN JUS BUAH SIRSAK DAN EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK (Annona muricata L.) OLEH: RINA RIANES NIM 050804005 Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara Pada tanggal : 06 Oktober 2012 Pembimbing I,
Panitia Penguji,
Dra. Saleha Salbi, M.Si., Apt. NIP 194909061980032001
Dra. Aswita Hafni Lubis, M.Si., Apt. NIP 195304031983032001
Pembimbing II,
Dra. Saleha Salbi, M.Si., Apt. NIP 194909061980032001
Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt. NIP 195107231982032001
Drs. Muchlisyam, M.Si., Apt. NIP 195006221980021001
Marianne, S.Si., M.Si, Apt. NIP 198005202005012006 Medan, Oktober 2012 Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara Dekan,
Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt. NIP 195311281983031002
Universitas Sumatera Utara
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur kehadirat Tuhan Yang Maha Esa, karena limpahan rahmat kasih dan karuniaNya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi ini yang berjudul ”Karakterisasi Simplisia dan Skrining Fitokimia serta Uji Aktivitas Antioksidan Jus Buah Sirsak dan Ekstrak Etanol Daun Sirsak”. Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar sarjana farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara. Pada kesempatan ini penulis menyampaikan ucapan terimakasih yang sebesar-besarnya kepada Bapak Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara yang telah memberikan fasilitas selama masa pendidikan. Ibu Dra. Saleha Salbi, M.Si., Apt., dan Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt., selaku pembimbing yang telah memberikan waktu, bimbingan, dan nasehat selama penelitian hingga selesainya penyusunan skripsi ini. Bapak Drs. Awaluddin Saragih, M.Si., Apt., selaku penasehat akademis yang memberikan bimbingan kepada penulis selama ini. Bapak dan Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara yang telah mendidik selama perkuliahan. Bapak dan Ibu Kepala Laboratorium Penelitian dan Farmakognosi yang telah memberikan fasilitas, petunjuk dan membantu selama penelitian. Ibu Dra. Aswita Hafni Lubis, M.Si., Apt., Drs. Syahrial Yoenoes, S.U., Apt., dan Marianne, S.Si., M.Si, Apt., selaku dosen penguji yang memberikan masukan, kritik, arahan dan saran dalam penyusunan skripsi ini. Penulis juga ingin mempersembahkan rasa terima kasih yang tak terhingga kepada Ayahanda Tarmizi dan Ibunda Siti Hasanah atas doa dan pengorbanannya
Universitas Sumatera Utara
dengan tulus dan ikhlas, untuk adik tersayang, dan teman-teman yang selalu setia memberi doa, dorongan dan semangat. Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih banyak kekurangannya, oleh karena itu sangat diharapkan kritik dan saran yang bersifat membangun dari semua pihak guna perbaikan skripsi ini. Akhir kata penulis berharap semoga skripsi ini bermanfaat bagi ilmu pengetahuan khususnya bidang farmasi.
Medan,
Oktober 2012
Penulis,
Rina Rianes
Universitas Sumatera Utara
KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING FITOKIMIA SERTA UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN JUS BUAH SIRSAK DAN EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK (Annona muricata L.)
ABSTRAK
Tanaman sirsak (Annona muricata L.) suku Annonaceae banyak terdapat di Indonesia, masyarakat banyak memanfaatkan buah ini untuk jus, daunnya digunakan masyarakat sebagai obat penyakit kanker. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui karakteristik simplisia dan skrining fitokimia serta aktivitas dari jus buah sirsak dan ekstrak etanol daun sirsak sebagai antioksidan dengan metode penangkapan radikal bebas DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl). Simplisia daun sirsak diekstraksi secara maserasi dengan pelarut etanol 96%, selanjutnya ekstrak dipekatkan menggunakan alat rotary evaporator dan dikeringkan menggunakan freeze dryer. Jus buah sirsak dan ekstrak etanol daun sirsak di uji aktivitas antioksidannya terhadap radikal bebas dengan mengukur absorbansi DPPH pada panjang gelombang 516 nm setelah didiamkan 60 menit suhu kamar. Aktivitas antioksidan diukur sebagai penurunan absorbansi larutan DPPH setelah penambahan ekstrak. Hasil karakteristik simplisia daun sirsak diperoleh kadar air 8,32%, kadar sari larut air 19,09%, kadar sari larut etanol 12,59%, kadar abu total 7,48%, kadar abu tidak larut asam 0,12% dan hasil karakteristik dari jus buah sirsak diperoleh kadar sari larut air 57,06%, kadar sari larut etanol 58,94%, kadar abu total 2,94%, kadar abu tidak larut asam 0,00%. Hasil skrining fitokimia diperoleh bahwa ekstrak etanol daun sirsak mengandung senyawa alkaloid, flavonoida, glikosida, saponin, tanin, steroida dan jus buah sirsak mengandung glikosida. Hasil pengujian aktivitas antioksidan dengan metode penangkapan radikal bebas DPPH menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun sirsak memiliki IC50 sebesar 60,74 ppm, sedangkan jus buah sirsak memiliki IC50 sebesar 760,55 ppm dan IC50 dari vitamin C sebesar 4 ppm.
Kata kunci: antioksidan, daun sirsak, jus, Annona muricata L., DPPH
Universitas Sumatera Utara
SIMPLEX CHARACTERIZATION AND PHYTOCHEMICAL SCREENING AND TESTS ANTIOXIDANT ACTIVITY SOURSOP JUICE AND ETHANOL EXTRACT LEAF OF SOURSOP (Annona muricata L.)
ABSTRACT
Soursop (Annona muricata L.) of the family Annonaceae much found in Indonesia, many people use this fruit for juice, that leaves discussed the public as a cure for cancer. The purpose of this study was to investigate the characteristics of simplicia and phytochemical screening and the activity of soursop juice and ethanol extracts of leaves the soursop as an antioxidant with DPPH radical scavenging method of capture (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl). Simplex soursop leaf was extracted with maceratelly by using 96% ethanol, then the extract was concentrated using a rotary evaporator and dried using a freeze dryer. Juice of soursop and ethanol extracts leaves of the soursop tested activity of antioxidant against free radical by measuring DPPH absorbance at 516 nm of wavelength after 60 minutes left to stand at room temperature. The antioxidant’s activity was measured as a decrease in absorbance of DPPH liquid after addition of extract. The moisture content of soursop leaf simplex is 8.32%, content watersoluble extract is 19.09%, the levels of ethanol-soluble extract 12.59%, 7.48% total ash, acid insoluble ash content of 0.12% and the results characterization from soursop fruit juice content of 57.06% water-soluble extract, ethanol-soluble extract content 58.94%, 2.94% total ash, acid insoluble ash content of 0.00%. Phytochemical screening results obtained that the ethanol extract leaves of the soursop contains alkaloid compounds, flavonoids, glycosides, saponins, tannins, steroida and soursop juice-containing glycosides. The test results of antioxidant activity by DPPH radical scavenging method showed that the ethanol extract leaves of the soursop has IC50 of 60.74 ppm, while the soursop juice has the IC50 of 760.55 ppm and IC50 of vitamin C at 4 ppm.
Keyword: antioxidant, soursop leaf, juice, Annona muricata L., DPPH
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR ISI Halaman JUDUL .......................................................................................................
i
HALAMAN JUDUL .................................................................................
ii
HALAMAN PENGESAHAN SKRIPSI ....................................................
iii
KATA PENGANTAR ...............................................................................
iv
ABSTRAK .................................................................................................
vi
ABSTRACT ...............................................................................................
vii
DAFTAR ISI ..............................................................................................
viii
DAFTAR TABEL ......................................................................................
xiii
DAFTAR GAMBAR .................................................................................
xiv
DAFTAR LAMPIRAN ..............................................................................
xvi
BAB I PENDAHULUAN ............................................................................
1
1.1 Latar Belakang ............................................................................
1
1.2 Perumusan Masalah ....................................................................
3
1.3 Hipotesis .....................................................................................
3
1.4 Tujuan .........................................................................................
4
1.5 Manfaat .......................................................................................
4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ...............................................................
5
2.1 Uraian Tumbuhan .......................................................................
5
2.1.1 Morfologi tanaman sirsak ................................................
5
2.1.2 Daerah tumbuh .................................................................
6
2.1.3 Sistematika tumbuhan ......................................................
7
Universitas Sumatera Utara
2.1.4 Uraian kandungan tumbuhan ...........................................
7
2.2 Radikal Bebas .............................................................................
8
2.2.1 Kerusakan jaringan akibat radikal bebas .........................
9
2.2.2 Pertahanan jaringan terhadap radikal bebas .....................
9
2.3 Antioksidan .................................................................................
10
2.3.1 Vitamin C .........................................................................
10
2.3.2 Flavonoid .........................................................................
11
2.4 Ekstraksi ......................................................................................
12
2.5 Spektrofotometer Ultraviolet dan Visibel (UV/Vis) ...................
13
2.6 Metode perangkap radikal 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) ........................................................................................
14
2.6.1 Pelarut .............................................................................
15
2.6.2 Pengukuran absorbansi – panjang gelombang ................
15
2.6.3 Waktu pengukuran ..........................................................
15
BAB III METODE PENELITIAN ............................................................
16
3.1 Alat ..............................................................................................
16
3.2 Bahan ..........................................................................................
16
3.3 Penyiapan Bahan Tumbuhan ......................................................
17
3.3.1 Pengambilan bahan tumbuhan ...........................................
17
3.3.2 Identifikasi tumbuhan ........................................................
17
3.3.3 Pembuatan simplisia daun sirsak .......................................
17
3.4 Pembuatan Pereaksi ....................................................................
17
3.4.1
Besi (III) klorida 1% ....................................................
17
3.4.2
Larutan HCl 2N ............................................................
18
Universitas Sumatera Utara
3.4.3 Timbal (II) asetat 0,4 M .....................................................
18
3.4.4 Pereaksi Mayer ...................................................................
18
3.4.5 Pereaksi Molisch ................................................................
18
3.4.6 Pereaksi Dragendorff .........................................................
18
3.4.7 Larutan kloralhidrat 70% ...................................................
19
3.4.8 Larutan asam sulfat 2 N .....................................................
19
3.4.9 Pereaksi Bouchardat ...........................................................
19
3.4.10 Pereaksi Liebermann-Burchard ...................................
19
3.4.11 Larutan pereaksi DPPH 0,5 mM ..................................
19
3.5 Pemeriksaan Karakteristik Simplisia ..........................................
19
3.5.1 Pemeriksaan makroskopik .................................................
19
3.5.2 Pemeriksaan mikroskopik ..................................................
20
3.5.3 Penetapan kadar air ............................................................
20
3.5.4 Penetapan kadar sari yang larut dalam air .........................
21
3.5.5 Penetapan kadar sari yang larut dalam etanol ....................
21
3.5.6 Penetapan kadar abu total ..................................................
21
3.5.7 Penetapan kadar abu yang tidak larut dalam asam ............
22
3.6 Skrining Fitokimia ......................................................................
22
3.6.1 Pemeriksaan alkaloid .........................................................
22
3.6.2 Pemeriksaan flavonoida .....................................................
23
3.6.3 Pemeriksaan glikosida ........................................................
23
3.6.3.1 Pemeriksaan glikosida antrakinon ...............................
24
3.6.4 Pemeriksaan saponin ..........................................................
24
3.6.5 Pemeriksaan tanin ..............................................................
24
Universitas Sumatera Utara
3.6.6 Pemeriksaan steroida/triterpenoida ...................................
24
3.7 Pembuatan Jus Sirsak ..................................................................
25
3.8 Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Sirsak .....................................
25
3.9 Pengujian Kemampuan Antioksidan dengan Spektrofotometer Visibel .........................................................................................
26
3.9.1 Prinsip metode penangkapan radikal bebas DPPH ............
26
3.9.2 Pembuatan larutan blanko ..................................................
26
3.9.3 Penentuan panjang gelombang serapan maksimum ..........
26
3.9.4 Pembuatan larutan induk ....................................................
26
3.9.5 Pembuatan larutan uji ........................................................
26
3.9.6 Penentuan persen peredaman .............................................
27
3.9.7 Penentuan nilai IC50 ...........................................................
27
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ...................................................
29
4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan .......................................................
29
4.2 Karakteristik Simplisia ................................................................
29
4.2.1 Identifikasi makroskopik ...................................................
29
4.2.2 Identifikasi mikroskopik ....................................................
29
4.2.3 Hasil karakteristik serbuk simplisia daun sirsak dan jus buah sirsak .........................................................................
30
4.3 Hasil Skrining Fitokimia .............................................................
30
4.4 Hasil Analisis Aktivitas Antioksidan Sampel Uji .......................
32
4.5 Hasil Analisis Peredaman Radikal Bebas DPPH oleh Sampel Uji ..................................................................................
39
4.6 Analisis Nilai IC50 (Inhibitory Concentration) Sampel Uji ........
40
Universitas Sumatera Utara
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ....................................................
41
5.1 Kesimpulan .................................................................................
41
5.2 Saran ...........................................................................................
42
DAFTAR PUSTAKA ................................................................................
43
LAMPIRAN ...............................................................................................
45
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR TABEL Tabel
Halaman
1. Hasil pemeriksaan skrining fitokimia dari serbuk simplisia daun sirsak, ekstrak etanol daun sirsak dan jus buah sirsak .....................................
31
2. Hasil analisis peredaman radikal bebas oleh ekstrak etanol daun sirsak dan jus buah sirsak ...............................................................................
40
3. Karakteristik serbuk simplisia daun sirsak ..........................................
51
4. Karakteristik jus buah sirsak ................................................................
51
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR GAMBAR Gambar
Halaman
1. Struktur kimia vitamin C .....................................................................
11
2. Kerangka flavonoid ..............................................................................
11
3. Struktur dasar flavonoid .......................................................................
12
4. Kurva serapan maksimum larutan DPPH 40 ppm dalam metanol secara spektrofotometri visible ............................................................
32
5. Hasil uji aktivitas antioksidan jus buah sirsak dengan DPPH .............
33
6. Hasil uji aktivitas antioksidan jus buah sirsak dengan DPPH .............
34
7. Hasil uji aktivitas antioksidan jus buah sirsak dengan DPPH .............
35
8. Hasil uji aktivitas antioksidan ekstrak etanol daun sirsak dengan DPPH .......................................................................................
36
9. Hasil uji aktivitas antioksidan ekstrak etanol daun sirsak dengan DPPH .......................................................................................
37
10. Hasil uji aktivitas antioksidan ekstrak etanol daun sirsak dengan DPPH .......................................................................................
38
11. Hasil analisis aktivitas antioksidan ekstrak etanol daun sirsak dan jus buah sirsak ...........................................................................................
39
12. Tumbuhan sirsak (Annona muricata L.) ..............................................
46
13. Daun sirsak ...........................................................................................
46
14. Simplisia daun sirsak ...........................................................................
46
15. Mikroskopik serbuk simplisia daun sirsak ...........................................
47
16. Alat spektrofotometerUV/Vis (Shimadzu 1800) .................................
48
Universitas Sumatera Utara
17. Pembuatan simplisia daun sirsak .........................................................
49
18. Pembuatan ekstrak etanol daun sirsak .................................................
50
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR LAMPIRAN Lampiran
Halaman
1. Surat hasil identifikasi tumbuhan .........................................................
45
2. Gambar tumbuhan sirsak (Annona muricata L.), daun sirsak .............
46
3. Gambar mikroskopik ...........................................................................
47
4. Gambar alat spektrofotometerUV/Vis (Shimadzu 1800) ....................
48
5. Bagan kerja ..........................................................................................
49
6. Hasil Pemeriksaan karakteristik ...........................................................
51
7. Perhitungan Pemeriksaan karakteristik serbuk simplisia .....................
52
8. Perhitungan pemeriksaan karakteristik jus buah sirsak .......................
57
9. Hasil Uji Antioksidan pada jus buah sirsak .........................................
61
10. Hasil Uji Antioksidan pada ekstrak etanol daun sirsak ........................
71
11. Perhitungan persen deviasi ...................................................................
81
Universitas Sumatera Utara