JUSTIFICACIÓN DEL USO DE SIMPLATE Como prueba rápida para conteo de microorganismos (totales, coliformes totales y hongos y levaduras)
SIMPLATE
Es un sistema con tecnología de sustrato definido (es decir nutrientes específicos para cada uno de los microorganismos) que nos permite evaluar una muestra determinada en cualquiera de los tres métodos que se requiera: Cuenta total (mesófilos aerobios en 24 hrs), Hongos y Levaduras (48 hrs) y Coliformes y E. coli ( 24 hrs). La tecnología de Simplate nos permite determinar el crecimiento de diferentes microorganismos por medio de una variación de color o fluorescencia, ya que el microorganismo utiliza el sustrato y se produce el vire o fluorescencia por la utilización de nutrientes. El uso de Simplate en los laboratorios permite disminuir el tiempo de entrega de resultados, ya que en el caso de Hongos y levaduras (método tradicional y Petrifilm) requieren 5 días a 30ªC para poder ser confirmados, y en el caso de Coliformes y E. coli (método tradicional y Petrifilm) se tienen que correr por separado, es decir identificamos coliformes y después se tiene que confirmar E. coli. Simplate permite disminuir las pérdidas que se generan en almacén de producto terminado, ya que se podrán liberar los lotes en menos tiempo con la seguridad de que cumple con los requisitos establecidos. En México, la media mensual del costo de almacén de producto es del 6% del costo del producto, lo que implica una pérdida alta cada mes. Además la tecnología de Simplate nos permite cuantificar a los microorganismos con mayor precisión, ya que solo depende del vire de color, y tiene una sensibilidad desde 1 UFC, lo cual nos ahorra tiempo y dinero, ya que no se requiere hacer diluciones extras al tratamiento de la muestra. Otra ventaja es que no requerimos montar un gran laboratorio para poder hacer estas determinaciones, sólo requerimos pipetas, incubadora, autoclave y así podremos correr nuestros métodos son la confianza de obtener resultados certeros. Este método también nos ayuda a invertir el tiempo en tareas más importantes o a cubrir los imprevistos que deban ser atendidos. Es decir el tiempo que antes se invertía en preparación de medios, esterilización, llenado, y demás procesos, lo podemos canalizar a actividades que anteriormente no se podían llevar a cabo por falta de tiempo. Realmente Simplate es una opción confiable y que brinda grandes beneficios que con el tiempo se verán siempre reflejados en el renombre de la empresa y la seguridad de los clientes.
Justificativas técnicas para el uso de SimPlate Característica Interpretación de resultados Tiempo y temperatura para obtener resultados
Simplate Cambio de color de pocillos del mismo tamaño. Conteo binario (positivo x negativo) Cuenta total 24 horas 35ªC+/-2 Coli. total/E.coli 24 horas 35ªC+/-2 Hongos/ Levaduras 48 hrs 30ªC+/-2 a) b)
Inoculación
Conteo
Interferencias
Adición directa de 1ml de leches pasteurizadas. Productos sólidos: quesos, mantequilla, cremas, flanes, gelatinas, preparados de manera tradicional e inocular 1ml del preparado directo en la charola SimPlate.
Permite conteo hasta 738 UFC sin dilución. Una charola Simplate sustituye por lo menos dos Petrifilm. a) Partículas de alimentos NO se confunden con colonia, por lo tanto no interfiere en el resultado. b) Colonias invasoras se aíslan en los pocillos. c) El reactivo Simplate NO es agar por lo tanto las bacterias con enzima gelatinasa no interfieren. d) pH: muestras con pH < 3.5 NO deben ser inoculadas directamente en Simplate, en este caso debe hacerse una dilución 10-1 o neutralizar la muestra como se hace para el método tradicional. e) Vitamina C: se debe agregar 0.1 ml del suplemento V al reactivo Simplate o diluir la muestra. f) Presencia de gran cantidad de otras bacterias NO interfiere en los resultados.
No existe problemática alguna. Burbujas
Petrifilm
Método tradicional
Colonias en forma de puntos en Colonias puntiformes y cuadrantes. amorfas de acuerdo al microorganismo en cuadrantes. Cuenta total 24 horas 35ªC +/-2 Cuenta total 24 horas 35ªC +/-2 Coli total/E.coli 48 horas 35ªC+/- 2 Coli total/E.coli 48 horas Hongos/ Levaduras5 días 30ªC+/-2 35ªC+/- 2 Hongos/ Levaduras5 días 30ªC+/-2 a) Es necesario hacer mínimo c) Es necesario hacer una dilución. mínimo una dilución. b) Productos sólidos: quesos, d) Productos sólidos: quesos, mantequilla, cremas, flanes, mantequilla, cremas, gelatinas, preparados de flanes, gelatinas, manera tradicional, pero es preparados de manera necesario hacer una dilución tradicional, pero es adicional para poder inocular. necesario hacer una dilución adicional para poder inocular. Conteo máximo de 300UFC sin Conteo máximo de 300UFC dilución. sin dilución. a)
Partículas de alimentos se pueden confundir con colonias o dificultar la inoculación de la muestra, por esto se tiene que hacer una dilución adicional. b) Colonias invasoras se expanden compitiendo por el mismo alimento con otras colonias. c) Comprobado por varios autores las bacterias productoras de gelatinasa, muy común en gran parte de los alimentos, licúan el agar del Petrifilm, imposibilitando la formación de las colonias. d) pH: muestras con pH bajo no deben ser inoculadas directamente, en este caso debe hacerse una dilución 101 o neutralizar la muestra como se hace para el método tradicional. e) Vitamina C: No hay interferencia. f) Estudio publicado por el fabricante de Petrifilm indica que la presencia de alto recuento de coliformes u otras bacterias pueden hacer el recuento difícil o imposible. Según varios autores hay posibilidad de que puntos o colonias azules sin burbujas de aire no sean E. coli, generando falsos positivos.
JUSTIFICACIÓN ECONÓMICA
a)
b)
c) d)
Partículas de alimentos se pueden confundir con colonias o dificultar la inoculación de la muestra, por esto se tiene que hacer una dilución adicional. Colonias invasoras se expanden compitiendo por el mismo alimento con otras colonias. pH: neutralizar la muestra. Vitamina C: No hay interferencia.
No deben formarse burbujas.
SimPlate es el método más ECONÓMICO COSTO DEL MÉTODO TRADICIONAL CUENTA TOTAL VS. SIMPLATE CUENTA TOTAL (TPC-CI) MATERIAL
DURACIÓN
Tubo de ensayo 4 x 180 mm. Caja Petri de vidrio. Medio de Cultivo Pipetas Tapón de rosca para tubo. Charola Simplate estéril.
6 meses 6 meses 6 meses 6 meses 6 meses
SIMPLATE TPC-CI 0,004
PLACA
CANTIDAD
COSTO INVESTIGADO
0,004 0,013 0,008 0,010 0,004
4 tubos /muestra 2 placas /nuestra para 20 análisis
0,20 1,20 30,00 1,80 2,00 150/200
0,010
4tapones/muestra
0.650
SUBTOTAL DE CONSUMIBLES 0,664 Destilador 60 meses Deionizador 60meses Depreciación de autoclave 60 meses Depreciación balanza 60 meses Depreciación incubadora 60 meses Depreciación esterilizador 60 meses SUBTOTAL DE DEPRECIACIÓN Medio de cultivo en PCA por placa 75,00U por 500g utilizados +/- 17.5 g/litro, se utilizan +/- 15 ml/placa.
0,039 0,17 0,011 0,069
0,017 0,011 0,069 0,056 0,056 0,017
0,056 0,017 0,169
Considerando media de 20 análisis por día
0,225 Costo por placa =+/- 75 $ / 500 g.
0,040
Simplate Cuenta Total CI prueba múltiple SUBTOTAL MEDIOS DE CULTIVO Energía balanza 0,18 Kw / hr Energía autoclave 0,30 Kw / hr Energía incubadora 0,57 Kw / hr Energía esterilizador 3,96 Kw / hr ENERGÍA ELÉCTRICA (Kw) TOTAL x 0,11U$ Kw / hora TOTAL GENERAL DE MANO DE OBRA Tiempo de manipulación de análisis Tiempo de resultados Salario Costo por hora trabajada Costo de salario por análisis
COSTO TOTAL POR ANÁLISIS
600,00 400,00 2.500,00 2.000,00 2.000,00 600,00
Costo $170 / 200 análisis 0,85 0,015/hr 0,684 (24 horas)
0,040 0,00075 (5min) 0,0375 (2,5h) 1,368 (48 h) 0,792 (4 h)
0,699 Kw 0,077
2,20 Kw 0,242
0,33
1,69
5 min. 24 hrs
25 min. 24-48 hrs
Por placa = 0,18 Kw/ 60 min. x 5 min. Por placa = 0,30 Kw x 2,5 H / 20 análisis / día Por placa = 0,57 Kw x 48 h / 20 análisis / día Por placa = 3, 96 Kw x 4 h / 20 análisis / día
U$ 500,00 + 30% (Prestaciones) = U$ 650,00 U$ 650,00 / 160h (8h/díax5díasx4semanas/mes = 160 hrs trabajadas.) = U$ 4.06 por hora. Placa: 25min. X 4,06/60min. = (U$ 1,69) Simplate: 5 min. X 4,06/60 min. =( U$ 0,33) Placa: 0,54 + 1,69 = Simplate: 1.683 + 0,33=
2,2300 U$ 2,0130 U$
Tradicional PCA 24-48 h Simplate TPC-CI 24 h
Para calcular el tiempo de manipulación se considera lo siguiente: - 5 minutos para pesar el medio para las placas - 10 minutos para la disolución del medio - 5 minutos para la esterilización del medio - 5 minutos para la inoculación de las placas - Lavado por material: 10segundos, Simplate 0 - Lectura de placas: 2 minutos, Simplate 10 segundos No se consideran las horas extras trabajadas. No se considera el costo del lavado del material de vidrio. No está considerado el costo de obtención de resultados confirmativos a las 24 horas. La facilidad de lectura y menor manipulación de Simplate permite mayor confiabilidad en los resultados.
COSTO DEL MÉTODO TRADICIONAL HONGOS Y LEVADURAS PDA VS. SIMPLATE HONGOS Y LEVADURAS CI) MATERIAL Tubo de ensayo 4 x 180 mm. Caja Petri de vidrio. Medio de Cultivo Pipetas Tapón de rosca para tubo. Charola Simplate estéril.
DURACIÓN
SIMPLATE HyL CI 0,004
6 meses 6 meses 6 meses 6 meses 6 meses 60 meses
PLACA
CANTIDAD
COSTO INVESTIGADO
0,004 0,013 0,008 0,010 0,004
4 tubos /muestra 2 placas /nuestra para 20 análisis
0,20 1,20 30,00 1,80 2,00 150/200
0,010
4tapones/muestra
0,650
SUBTOTAL DE CONSUMIBLES 0,664 Destilador 60 meses Deionizador 60meses Depreciación de autoclave 60 meses Depreciación balanza 60 meses Depreciación incubadora 60 meses Depreciación esterilizador 60 meses SUBTOTAL DE DEPRECIACIÓN Medio de cultivo en PDA por placa 75,00U por 500g utilizados +/- 17.5 g/litro, se utilizan +/- 15 ml/placa.
0,169
2,375
COSTO TOTAL POR ANÁLISIS Costo “extra” por prueba = Aprox. 12 pesos
Considerando media de 20 análisis por día
0,225 Costo PDA =+/- 75 $ / 500 g.
SUBTOTAL MEDIOS DE CULTIVO Energía balanza 0,18 Kw / hr Energía autoclave 0,30 Kw / hr Energía incubadora 0,57 Kw / hr Energía esterilizador 3,96 Kw / hr
Salario Costo por hora trabajada Costo de salario por análisis
600,00 400,00 2.500,00 2.000,00 2.000,00 600,00
0,045 2,375
TOTAL GENERAL DE MANO DE OBRA Tiempo de manipulación de análisis Tiempo de resultados
0,017 0,011 0,069 0,056 0,056 0,017
0,056 0,017
Simplate SYM (hongos y levaduras) prueba múltiple.
ENERGÍA ELÉCTRICA (Kw) TOTAL x 0,11U$ Kw / hora
0,039 0,17 0,011 0,069
Costo 475 $ / 200 análisis
0,015/hr 1,386 (48 horas)
0,045 0,00075 (5min) 0,0375 (2,5h) 3,42 (120 h) 0,792 (4 h)
1,401 Kw 0,15
4,250 Kw 0,47
0,33
1,69
5 min. 48-72 hrs
25 min. 72-120 hrs
Por placa = 0,18 Kw/ 60 min. x 5 min. Por placa = 0,30 Kw x 2,5 H / 20 análisis / día Por placa = 0,57 Kw x 48 h / 20 análisis / día Por placa = 3, 96 Kw x 4 h / 20 análisis / día
U$ 500,00 + 30% () = U$ 650,00 U$ 650,00 / 160h (8h/díax5díasx4semanas/mes = 160 hrs trabajadas.) = U$ 4,06 por hora. Placa: 25min. X 4,06/60min. = U$ 1,69 Simplate: 5 min. X 4,06/60 min. = U$ 0,33
Placa: 0,779 + 1,69 = Simplate: 3,208 + 0,33 =
Ahorro mínimo de 2 días en tiempo
2,469 U$ 3,508 U$
Tradicional PDA 72-120 h Simplate HyL 48-72 h
COSTO DEL MÉTODO TRADICIONAL HONGOS Y LEVADURAS PDA VS. SIMPLATE HONGOS Y LEVADURAS CI
CONSIDERACIONES:
Para calcular el tiempo de manipulación se considera lo siguiente:
-
5 minutos para pesar el medio para las placas 10 minutos para la disolución del medio 5 minutos para la esterilización del medio 5 minutos para la inoculación de las placas
No se consideran las horas extras trabajadas. No se considera el costo del lavado del material de vidrio. No está considerado el costo de obtención de resultados confirmativos a las 48-72 horas. La facilidad de lectura y menor manipulación de Simplate permite mayor confiabilidad en los resultados. Es importante considerar los costos de retención en almacén del producto, la media mensual del costo de almacén de producto en México es del 6% del costo del producto, por lo tanto si tomamos como ejemplo U$ 10.000,00 perderá U$ 600,00 por día. Simplate nos permite ahorrar de 2 a 3 días en la liberación del lote, por lo tanto una economía de aproximadamente U$ 600,00 por día o U$ 18,000.00 al mes.
COSTO DEL MÉTODO TRADICIONAL COLIFORMES TOTALES VS. SIMPLATE COLIFORMES TOTALES Y E.coli (CeC) MATERIAL
DURACIÓN
Tubo de ensayo 4 x 180 mm. Caja Petri de vidrio. Medio de Cultivo Pipetas Tapón de rosca para tubo. Charola Simplate estéril.
SIMPLATE TPC-CI 0,004
6 meses 6 meses 6 meses 6 meses 6 meses
PLACA
CANTIDAD
COSTO INVESTIGADO
0,004 0,013 0,008 0,010 0,004
4 tubos /muestra 2 placas /nuestra para 20 análisis
0,20 1,20 30,00 1,80 2,00 150/200
0,010
4tapones/muestra
0.650
SUBTOTAL DE CONSUMIBLES 0,664 Destilador 60 meses Deionizador 60meses Depreciación de autoclave 60 meses Depreciación balanza 60 meses Depreciación incubadora 60 meses Depreciación esterilizador 60 meses SUBTOTAL DE DEPRECIACIÓN Medio de cultivo en BRV por placa 65,00U por 500g utilizados +/- 17.5 g/litro, se utilizan +/- 15 ml/placa.
0,039 0,17 0,011 0,069
0,017 0,011 0,069 0,056 0,056 0,017
0,056 0,017 0,169
Considerando media de 20 análisis por día
0,225 Costo por placa =+/- 65 $ / 500 g.
0,035
Simplate Cuenta Total CI prueba múltiple SUBTOTAL MEDIOS DE CULTIVO Energía balanza 0,18 Kw / hr Energía autoclave 0,30 Kw / hr Energía incubadora 0,57 Kw / hr Energía esterilizador 3,96 Kw / hr ENERGÍA ELÉCTRICA (Kw) TOTAL x 0,11U$ Kw / hora TOTAL GENERAL DE MANO DE OBRA Tiempo de manipulación de análisis Tiempo de resultados Salario Costo por hora trabajada Costo de salario por análisis
COSTO TOTAL POR ANÁLISIS
600,00 400,00 2.500,00 2.000,00 2.000,00 600,00
Costo $170 / 200 análisis 0,85 0,015/hr 0,684 (24 horas)
0,035 0,00075 (5min) 0,0375 (2,5h) 1,368 (48 h) 0,792 (4 h)
0,699 Kw 0,077
2,20 Kw 0,242
0,33
1,69
5 min. 24 hrs
25 min. 24-48 hrs
Por placa = 0,18 Kw/ 60 min. x 5 min. Por placa = 0,30 Kw x 2,5 H / 20 análisis / día Por placa = 0,57 Kw x 48 h / 20 análisis / día Por placa = 3, 96 Kw x 4 h / 20 análisis / día
U$ 500,00 + 30% (Prestaciones) = U$ 650,00 U$ 650,00 / 160h (8h/díax5díasx4semanas/mes = 160 hrs trabajadas.) = U$ 4.06 por hora. Placa: 25min. X 4,06/60min. = (U$ 1,69) Simplate: 5 min. X 4,06/60 min. =( U$ 0,33) Placa: 0,541 + 1,69 =
2,230 U$
Simplate: 1.760 + 0,33=
2,090 U$
Para calcular el tiempo de manipulación se considera lo siguiente: - 5 minutos para pesar el medio para las placas - 10 minutos para la disolución del medio - 5 minutos para la esterilización del medio - 5 minutos para la inoculación de las placas - Lavado por material: 10segundos, Simplate 0 - Lectura de placas: 2 minutos, Simplate 10 segundos No se consideran las horas extras trabajadas. No se considera el costo del lavado del material de vidrio. No está considerado el costo de obtención de resultados confirmativos a las 24 horas.
Tradicional 24-48 hrs Coliformes totales Simplate 24 hrs. Coliformes totales y E.coli
La facilidad de lectura y menor manipulación de Simplate permite mayor confiabilidad en los resultados. NORMALMENTE SE AHORRA AL MENOS UNA PLACA EN DILUCIONES DE PRODUCTO CRUDO COSTO DEL MÉTODO COLIFORMES POR TUBOS MULTIPLES VS. SIMPLATE COLIFORMES Y E.COLI (CEC-CI) MATERIAL Tubo de ensayo 18 x 180 mm. Medio de Cultivo Tubo de Durhan 9 tubos Pipetas Tapón de rosca para tubo. Charola Simplate estéril.
DURACIÓN
SIMPLATE CEC CI
6 meses 6 meses 3meses 6 meses 6 meses 60 meses
PLACA
CANTIDAD
COSTO INVESTIGADO
0,500 0,008 0,030 0,010 0,100
18 tubos /muestra para 20 análisis
1,00 30,00 0,30 1,80 2,00 150/200
0,010
9tapones/muestra
0,650
SUBTOTAL DE CONSUMIBLES 0,664 Destilador 60 meses Deionizador 60meses Depreciación de autoclave 60 meses Depreciación balanza 60 meses Depreciación incubadora 60 meses Depreciación esterilizador 60 meses SUBTOTAL DE DEPRECIACIÓN Medio de cultivo Verde Brillante precio de 500g U$ 50,00. Se utilizan 40g/Lt y 90ml por muestra. Caldo Lactosado Igual cantidad. Costo: U$50.00
0,648 0,17 0,011 0,069
0,017 0,011 0,069 0,056 0,056 0,017
0,056 0,017 0,169
600,00 400,00 2.500,00 2.000,00 2.000,00 600,00
Considerando media de 20 análisis por día
0,225 500g CVB y 500g CL 0,72 Costo 300,00 $ / 200 análisis
1,500 Simplate Coliformes prueba múltiple. SUBTOTAL MEDIOS DE CULTIVO Energía balanza 0,18 Kw / hr Energía autoclave 0,30 Kw / hr Energía incubadora 0,57 Kw / hr Energía esterilizador 3,96 Kw / hr ENERGÍA ELÉCTRICA (Kw) TOTAL x 0,11U$ Kw / hora TOTAL GENERAL DE MANO DE OBRA Tiempo de manipulación de análisis Tiempo de resultados Salario Costo por hora trabajada Costo de salario por análisis
COSTO TOTAL POR ANÁLISIS
1,500 0,015/hr 0,684 (24 horas)
0,72 0,00075 (5min) 0,0375 (2,0h) 1,368 (48 h) 0,792 (4 h)
0,699 Kw 0,077
2,19 Kw 0,24
0,33
1,69
5 min. 24 hrs
25 min. 24-48 hrs
Por placa = 0,18 Kw/ 60 min. x 5 min./20 análisis Por placa = 0,30 Kw x 2,0 h / 20 análisis / día Por placa = 0,57 Kw x 48 h / 20 análisis / día Por placa = 3, 96 Kw x 4 h / 20 análisis / día
U$ 500,00 + 30% () = U$ 650,00 U$ 650,00 / 160h (8h/díax5díasx4semanas/mes = 160 hrs trabajadas.) = U$ 4,06 por hora. Placa: 25min. X 4,06/60min. = U$ 1,69 Simplate: 5 min. X 4,06/60 min. = U$ 0,33 Placa: 1,833+ 1,69 =
3,523 U$
Simplate: 2,319 + 0,33 =
2,649 U$
VBB (apenas Coliformes totales) Simplate (E.coli y Total)
Los datos para tubos múltiples aquivalen apenas a los resultados de Coliformes Totales por lo tanto los costos del método todavía mayores. No se consideran las horas extras trabajadas. No se considera el costo del lavado del material de vidrio. No está considerado el costo de obtención de resultados confirmativos a las 24 horas. La facilidad de lectura y menor manipulación de Simplate permite mayor confiabilidad en los resultados. El tiempo de 25 minutos calculado para la manipulación del método con VBB se refiere a: 10 minutos para pesar y disolver el medio. 5 minutos para transferir el medio a los tubos por muestra.
-
5 minutos para autoclave. 5 minutos para la inoculación.