Clase Leptosp 09

Universidad del Zulia Facultad de Ciencias Veterinarias Cátedra de Enfermedades Infecciosas

LEPTOSPIROSIS M. V. Elena Hernández

LEPTOSPIROSIS 

Enfermedad de amplia distribución mundial, afecta a mamíferos domésticos y silvestres (Thierman, 1984)



Es una zoonosis (Faine, 1982; Thierman, 1984)



En las explotaciones ganaderas se produce grandes pérdidas económicas (Ellis,1994)



Existencia de hospedadores de mantenimiento y largos períodos de excreción renal al ambiente (Radostis y col.1999)

LEPTOSPIROSIS  Taxonomia    



y Clasificación:

Orden: Spirochaetales Familia: Leptospiraceae Género: Leptospira Especie: L. interrogans, L. biflexa y L. illini (año 1917)

LEPTOSPIROSIS Según homologia del ADN: 16 genomaespecies:  





  

L. interrogans: bratislava, canícola,



icterohaemorrhagiae y pomona



L. borgpetersenii: hardjo L. kirschneri: grippotyphosa L. noguchii L. weilii



  

L. alexanderi L. biflexa L. fainei L. wolbachii L. inadai L. parva L. meyeri

EPIDEMIOLOGIA Distribución Geográfica: Mundial

Alta morbilidad. Baja mortalidad adultos (5%), Alta mortalidad en terneros Mas del 50% población bovina con leptospirosis

EPIDEMIOLOGIA Reportes del INIA, bovinos (1998-2002): 3.380 muestras, 302 fincas, 19 estados 46.0 % títulos seroaglutinantes 76.2 % fincas positivas Serovares predominantes: hardjo, icterohaemorrhagiae y hebdomadis 

En el Municipio Rosario de Perijá, Angelossante y Col., reportaron



21,66 % de prevalencia en el año 1999



En el estado Monagas, Alfaro y col., 2004, en ganadería doble propósito



muestran una prevalencia global del 48%

Pomona Sari Wolffi

6

Copenhageni

12 ,5

20

Hardjo

18 ,6 18 ,1 4 15 ,8 1

25

25 ,1 24 2 ,6 23 5 ,2 6

30

31 ,1

35

6

DISTRIBUCIÓN PORCENTUAL DE SEROVARES DURANTE EL PERIODO 2003-2005

15

Hebdomadis

98

Icterohaemorrhagiae Bratislava

6,

10

Canicola

0,

47

5

Grippotyphosa

0

SEROVARES

Datos obtenidos de La Unidad de Diagnostico e Investigación de Leptospirosis. FCV-LUZ

EPIDEMIOLOGIA  Estudio

en humanos realizado en Perú, localidades mineras, Cespedes y col, 2003,



Reportan una prevalencia 36,6% de 71 muestras personas con antecedentes de fiebre, asociados a factores de riesgo y en caninos 66,6%

 García

A., 1994, dos hospitales de Maracaibo, Edo. Zulia,



Encontró incidencia 13,5%, 33,3% prevalencia

EPIDEMIOLOGIA Muestras de Humanos remitidas a la Unidad de Diagnostico e Investigación de Leptospirosis de la Facultad de Ciencias Veterinarias. L. U. Z. Año Total de % Negativos % Positivos Serovares predominantes Muestra s

2004

30

73.3

26.6

Icterohaemorrhagiae, Copenhageni

2005

24

58.3

41.6

Icterohaemorrhagiae, Copenhageni, Canícola, Wolffi

2007

67

92.5

7.4

Icterohaemorrhagiae, Copenhageni Autumnalis, Pyrogenes, Canícola, wolfii.

LEPTOSPIROSIS NÚMERO DE MUESTRAS

1200 1000 800 600

TOTAL POSITIVOS

400 200 0

1993 1994 1995 1996 1997 1998 1999 2000 2001 2002

AÑOS Total de muestras humanas recibidas anualmenmte y porcentaje positivas determinado con la prueba de MAT con títulos anticuerpos >. 200. Fuente: INH “RAFAEL RANGEL - INIA

Biología de las Leptospiras 

Bacteria Gram negativa



Forma helicoidal, espirales finas, móviles (Greene G, 2000)



Los LPS difieren entre los serovares, las proteínas de membrana altamente conservadas: transmembrana Ompl 1, externas Lipl 32, Lipl 41. (Haake y col. 2000)



Temperatura 28-30°C, pH 7.2 - 7.6, agua dulce, sobrevive 180 días



Sensible a desecación y calor, desinfectantes comunes, agua salada, leche normal, orina ácida (Radostis y col. 1999)

LEPTOSPIROSIS • FACTORES QUE AFECTAN LA SUSCEPTIBILIDAD * Directa: Orina A. infectado

vía oral/mucosas animal susceptible

Transmisión venérea Transmisión vertical: vía transplacentaria, vía galactófora * Indirecta: Agua o barro contaminado

contacto con la piel

* Otros: participación de artrópodos? * IMPORTANTE:

Participación de Roedores y Animales Silvestres

Factores de Riesgo

LEPTOSPIROSIS • TRANSMISIÓN EN HUMANOS ES CONSIDERADA UNA ENFERMEDAD 0CUPACIONAL

FUENTES DE INFECCIÓN:

- Consumo de alimentos y aguas contaminados con orinas de animales portadores

- Alimentos y agua almacenados de forma inadecuada expuestos a excretas de ratas

LEPTOSPIROSIS • TRANSMISIÓN EN HUMANOS ES CONSIDERADA UNA ENFERMEDAD 0CUPACIONAL

FUENTES DE INFECCIÓN:

- Uso de fuentes de aguas contaminadas en el riego de cultivos de hortalizas y verduras.

- Contacto con agua o pantanos contaminados con fines recreacionales

EPIDEMIOLOGIA Hospedador de Mantenimiento Bovinos Porcinos Equinos Caninos Rata Ratones Rabipelados, otros.

Serovariedad Hardjo Pomona, Bratislava Bratislava Canicola Icterohaemorrhagia e Ballum Grippotyphosa

EPIDEMIOLOGIA Hospedador Adaptado (mantenimiento) Alta susceptibilidad a la infección Baja patogenicidad para el huésped Baja respuesta inmunológica Tendencia a sufrir enfermedad crónica Persistencia del serovar en los riñones y tracto

EPIDEMIOLOGIA Hospedador Adaptado (mantenimiento) Período largo de excreción renal del serovar (Leptospiruria) Poca eficiencia de las vacunas Transmisión endémica Difícil Diagnóstico

EPIDEMIOLOGIA Hospedador No Adaptado (Accidental) Baja susceptibilidad a la infección Alta patogenicidad para el huésped Altos títulos de Anticuerpos Tendencia a producir enfermedad aguda

EPIDEMIOLOGIA Hospedador No Adaptado (Accidental) Período corto de excreción renal Las vacunas son mas eficaces Transmisión epidémica Fácil Diagnóstico

LEPTOSPIROSIS • PATOGÉNESIS:

* Período de Incubación: 3 a 12 días * Fase de Leptospiremia: (horas hasta 7 días) Día 10

El microorganismo se multiplica en el espacio vascular, diseminación a muchos órganos: Hígado, bazo, SNC, ojos, aparato genital y riñones Día 20 a 30

Aparición de AC. Aglutinantes * Fase de Leptospiruria: Colonización del riñón, expulsión de leptospiras por la orina

LEPTOSPIROSIS • PATOGÉNESIS: -L. hardjo no produce hemolisina, ni nefritis intersticial aguda -L. pomona produce hemólisis intravascular y nefritis intersticial - L. Hardjo y L. pomona causan infección generalizada, causan Abortos y Mastitis (síndrome de agalactia)

LEPTOSPIROSIS ¿POR QUÉ OCURREN LAS ALTERACIONES?

* Movilidad mas producción de HIALURONIDASA facilitan la invasión de tejidos * Acción directa del microorganismo, toxinas o lesiones secundarias a la lesión capilar * Lesión que se inicia con un proceso de adhesión específica a las células con posterior invasión

LEPTOSPIROSIS ¿POR QUÉ OCURREN LAS ALTERACIONES?

* Participación de citocinas asociadas a la agresión de las células de la pared vascular (alteraciones mitocondriales y del retículo endoplasmático), desencadena un proceso de anoxia tisular * El LPS desencadena procesos inflamatorios agrediendo a la célula endotelial, liberando citocinas y compuestos vasoactivos

LEPTOSPIRA MUCOSAS: Conjuntiva, vagina Nasofaringe

ABRASIONES EN PIEL

LEPTOSPIREMIA E INVASIÓN

ACCIÓN DIRECTA ¿Citopatogénica?

ACCIÓN INDIRECTA ¿Toxinas? ¿Inmune?

ENDOTELIO CAPILAR Anoxia, Lesión Tisular

HIGADO

RIÑONES

MUSCULO ESQUELÉTICO MIOCARDIO

APARATO REPRODUCTIVO

LEPTOSPIROSIS • SINTOMATOLOGÍA CLÍNICA EN BOVINOS: - Forma Subclínica: serovar Hardjo - Forma Aguda:

* * * * * *

Afecta a bovinos jóvenes, severa, pero poco común Serovar Pomona Fiebre elevada, congestión pulmonar, meningitis Hemoglobinuria, ictericia Agalactia, con coágulos de sangre Síndrome de baja producción de leche

- Forma Crónica:

* Serovar Hardjo (Pomona) * Infección fetal y aborto en vacas preñadas * Infección inaparente en adultos, abortos, mortinatos, nacimiento de crías débiles, retensión placentaria.

LEPTOSPIROSIS • DIAGNÓSTICO DIFERENCIAL BOVINOS: - Hemoglobinuria Bacilar

- Babesiosis y Anaplasmosis

- Clostridium Perfringes Tipo A

- Hemoglobinuria postparto

- Mastitis

- Rinotraqueitis bovina

- Brucelosis

- Aborto epizootico Bovino

- Listeriosis

- Diarrea Viral Bovina

- Lengua Azul

LEPTOSPIROSIS SINTOMATOLOGÍA CLÍNICA EN EQUINOS: - La mayoría de las infecciones son inaparentes - Fase Aguda es febril - Es frecuente conseguir como secuela la OFTALMIA PERIÓDICA - Pueden presentarse síndromes hepatonefríticos y cardiovasculares - Serotipos predominantes: icterohaemorrhagiae, pomona, serjoe, hardjo y canícola

LEPTOSPIROSIS Caninos:

- Enfermedad de Stuggart - Anorexia, debilidad, fiebre - Conjuntivitis - Vómito - Ictericia - Dolor Abdominal y/o lumbar - Ginginorragia, hematemesis - Diarrea con sangre - En gatos es poco frecuente desarrollo de manisfestaciones clínicas  Serotipos predominantes: icterohaemorrhagiae y canícola  (ultimamente grippotyphosa y pomona)

LEPTOSPIROSIS SINTOMATOLOGÍA CLÍNICA EN PORCINOS: - La mayoría de las infecciones son inaparentes - Fase Aguda es febril - Abortos y nacimiento de lechones débiles o con retardo en el crecimiento - Ictericia, hemoglobinuria, convulsiones y trastornos gastrointestinales - Signos neurológicos, meningitis - Serotipos predominantes: pomona, icterohaemorrhagiae, canícola, tarassovi y grippotyphosa

LEPTOSPIROSIS

SINTOMATOLOGÍA CLÍNICA EN HUMANOS:

- FORMA ANICTERICA FORMA LEVE :  Fiebre súbita  Cefalea  Mialgias  Náuseas  Vómitos FORMA GRAVE:       

Fiebre elevada Cefalea Meningitis Afecciones pulmonares Mialgias Conjuntivitis Hepatomegalia

- FORMA ICTERICA

Sintomatología más intensa que la anictérica: Disfunción:

Renal Hepática Hepatorrenal

Manifestaciones: Hemorrágicas Cardíacas Pulmonares Conciencia

LEPTOSPIROSIS

DIAGNÓSTICO DIFERENCIAL HUMANOS: 

DENGUE, MALARIA, HEPATITIS VIRAL, FIEBRE AMARILLA



FIEBRE HEMORRÁGICA, RICKETTSIOSIS



MENINGITIS



SÍNDROME FEBRIL PROLONGADO.



SÍNDROME HEMORRÁGICO.



SÍNDROME MENÍNGEO.



SÍNDROME PULMONAR.



PANCREATITIS.

VIRAL.

BIOSEGURIDAD Mantener ciclo cerrado Evitar ingreso de animales nuevos (portadores) sin control sanitario Cuarentena Vigilancia Epidemiológica Control de animales silvestres

BIOSEGURIDAD Programas de desratización Evitar acceso de animales a fuentes de agua, lagunas, jagueyes, ríos

Medidas Higiénicos sanitarias Evitar pastoreo de animales infectados junto con los sanos Uso de Inseminación artificial

BIOSEGURIDAD Vacunación: Bovinos, Ovinos, Equinos, Porcinos: - Primovacunación: 4-6 meses, refuerzo 21 días - Según zona agroecológica vacunación cada 4-6 meses Caninos: - Primo - vacunación: 1 1/2 mes. - Dos dosis con intervalo de 21 días

TRATAMIENTO Depende del serovar y de la fase de la enfermedad:

1.-BOVINOS, SUINOS Y EQUINOS 

Dihidroestreptomicina: 25 mg/Kg IM 1-2 v/día por 3 a 4 días



Oxitetraciclina: 20 mg/Kg IM Una sola dosis o dos dosis a intervalo 10 días



Combinaciones Dihidroestreptomicina + Penicilina G

TRATAMIENTO Depende del serovar y de la fase de la enfermedad:

2.- CANINOS 

Penicilina: 100.000 a 150.000 UI/Kg

3.- TRATAMIENTO DE SOSTÉN:     

Cuadros Agudos Soluciones Electrolíticas Vitaminas Complejo B Protectores Hepáticos Transfusión Sanguínea

LEPTOSPIROSIS DIAGNOSTICO Morfología: •Micoorganismos de 0.1 μ de diámetro, 6-12 μ de largo •Espirales finas con extremos en gancho •Cilindro protoplasmático envolviendo un filamento axil central recto •Moviles, flexión y estiramiento

LEPTOSPIROSIS Toma, conservación y envío de muestras al laboratorio: Cinética de Anticuerpos Ac´s Leptospiruria IgM + IgG IgG Leptospiremia IgM

7 a 12

15

DÍAS

LEPTOSPIROSIS • DIAGNÓSTICO: CONSIDERAR PARA LA TOMA DE MUESTRAS:  Historia Clínica del Animal y/o Rebaño  Duración de la Infección  Posibles serovares que causen la infección  Toma conservación y envío de muestras

HERRAMIENTAS PARA LA TOMA DE MUESTRA MUESTREO DEL 10% DE LA POBLACIÓN SUEROS PAREADOS: FASE DE LEPTOSPIREMIA Y FASE DE LEPTOSPIRURIA TOMAR 3 CC SUERO SANGUINEO, TUBO SIN ANTICOAGULANTE, ENVIO EN CONDICIONES ADECUADAS (hielo)

HERRAMIENTAS PARA LA TOMA DE MUESTRA ACOMPAÑAR CON FICHA EPIDEMIOLÓGICA ENVÍO A LABORATORIOS DE REFERENCIA PARA SEROLOGÍA: MAT

LEPTOSPIROSIS 

Consideraciones para la toma de muestra de Orina:  A partir del 15 día post-infección  Tomar muestra antes del inicio de toma de antibióticos  Suministrar diurético al paciente (bicarbonato de sodio)  Limpiar genitales  Proteger de la luz, temperatura, ambiente  Procesar en un período menor a 2 horas, sise refrigera se puede mantener hasta por 6 horas  Tomar tres muestras seriadas en intervalos de 2 a 3 horas  Si es posible (caninos y felinos) tomar muestra mediante punción de la vejiga

LEPTOSPIROSIS 

Sangre y líquido cefalorraquídeo:    



Primeros 10 días (estado febril) Envase estéril con heparina (sangre) Antes del tratamiento con antibióticos Sembrar en medio de cultivo sólidos

Tejidos y orina (necropsia):    

Sumergir animales pequeños en una solución de cresol al 10% Envase estériles enviar a 4°C plazo máx. de 6 horas. Usar instrumentos estériles, flamearlos Si se trata de animales pequeños puede tomarse el riñon entero, de no ser así tomar una porción enviar en envase estéril con solución salina tamponada

LEPTOSPIROSIS 

Leche:  

 

Tomar muestras en la fase aguda (0,5ml) en tubo estéril Enviar muestra refrigeradas al laboratorio

Diagnostico: a) OBSERVACIÓN DIRECTA: 





Frotis Directo en Microscopio de Campo Oscuro Microscopia en Campo Claro: (Rojo Congo, Impregnación Argéntica) Microscopia de Fluorescencia

Inmunofluorescencia

PCR

Coloración de Fontana

ELISA

LEPTOSPIROSIS  

Aislamiento Directos: en diferentes medios de cultivos:    

 

Sólidos Semisólidos Líquidos Medios de cultivos más comunes: Fletcher, Ellinghausen, Korhoff, Stuart. Suplementos: Albúmina bovina, suero de conejo y Vit. B12

Indirecto Uso de hamsters destetados o cobayos de 21 días

LEPTOSPIROSIS  Pruebas Serológicas:  Prueba Género estpecíficas:   

Técnica de Antígenos Termorresistentes Contrainmunoelectroforesis ELISA

 Prueba serovar específica 

MAT

Microaglutinación de Antígenos Vivos: • Prueba Pantalla • Extensión de Títulos

Control Neg (-)

Reactivo (2++) No Reactivo (1+)

Reactivo (3+++)

Reactivo (4++++)

Interpretación de Resultados en Animales TITULOS SEROLOGICOS

RECOMENDACIONES 



NEGATIVOS BAJOS 1:100-1:200



MODERADOS 1:200-1:400





MODERADOS A ALTO 1:4001:800





ALTOS MAYO A 1:800







Caso Negativo Sospechoso, enviar muestra 15 días post-resultado Inicio de Infección, resto de Anticuerpo post infección, respuesta en animales vacunados, realizar 2do muestreo serológico en animales no vacunados Infección probable, enviar 3era muestra en animales no vacunados (suero convalesciente) Infección activa

Interpretación de resultados en Humanos: Sueros Pareados

SUERO I SUERO II

Negativos (Títulos <200)

SUERO I

Negativo (Titulos Infección Probable <200) Positivo (Títulos>200)

SUERO II SUERO I

Caso Negativo

SUERO II

Negativo (Titulos >200) Positivo aumento del de 4 veces el titulo del S-I

Infeccion reciente

SUERO I

Positivo (titulos <800) Infeccion Pasada

SUERO II

Positivo (Titulos iguales al S-I

Muchas Gracias ….