Clase 2 Tecnicas Ppt

METODOS EN PATOLOGIA

HEMATOXILINA EOSINA

Microscopia de luz polarizada

ROJO CONGO PARA DETECTAR AMILODE

Rojo congo

Rojo congo + luz polarizada

HISTOQUIMICA  

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CIENCIA QUE COMBINA HISTOLOGIA Y BIOQUIMICA IDENTIFICA SUSTANCIAS QUIMICAS Y DETERMINAR SU SIGNIFICADO EN CELULAS Y TEJIDOS. IDENTIFICA UNA ENZIMA UTILIZANDO CROMOGENOS (SUSTANCIAS COLOREADAS POR LA ACCION ENZIMATICAS) UTIL EN ESTUDIO DE MUSCULO ESQUELETICO, SISTEMA NERVIOSO, CELULAS HEMATOPOYETICAS.

METODOS INMUNOHISTOQUIMICOS: - COMPRENDEN LAS TECNICAS PARA DETECCION DE ANTIGENOS CELULARES O TISULARES BASANDOSE EN REACCIONES ANTIGENOANTICUERPO. - LA VISUALIZACION REQUIERE DE UN TRAZADOR O MARCADOR. - COMO MARCADOR SE UTILIZA: FLUOROCROMOS (INMUNO-FLUORESCENCIA), ENZIMAS (TECNICAS INMUNOENZIMATICAS), IONES METALICOS EN FORMA COLOIDAL (TECNICA DE INMUNO-ORO) O ISOTOPOS RADIOACTIVOS.

MARCAJE DIRECTO O INDIRECTO FLUORESCENCIA: SEGÚN EL ORIGEN DE LA FLUORESCENCIA: • PRIMARIA: (LAMINA ELASTICA DE ARTERIA, COLAGENO, LIPIDOS, LIPOFUXINA Y TETRACICLINA). • SECUNDARIA: FLUOROCLOMOS (V-A-R) O UNIENDO FLUOROCROMOS A ANTICUERPOS DIRIGIDOS A ANTIGENOS CELULARES (INMUNOFLUORESCENCIA). EJEMPLO: FLUORESCEINA. REQUIERE DE MICROSCOPIO CON LUZ ULTRAVIOLETA.

INMUNOFLUORESCENCIA POSITIVA-IgG EN CAPILAR GLOMERULAR

INMUNOHISTOQUIMICA: - TECNICAS PARA VISUALIZAR REACCION ANTIGENOANTICUERPO TRAVES DE LA ADICION ENTRE UNA ENZIMA SUSTRATO Y EL CROMOGENO. - TRAZADORES: ENZIMAS (PEROXIDASA Y FOSFATASA ALCALINA). - TIPOS DE ANTIGENOS: POLICLONALES Y MONOCLONALES. - ANTICUERPOS MONOCLONALES (1975).

CROMOGRANINA EN UN ISLOTE DE LANGERHANS

CITOMETRIA Y CITOFLUOROMETRIA CITOMETRIA Y CITOFLUOROMETRIA: REQUIEREN DE ANALIZADORES DE IMÁGENES BASADOS EN PARAMETROS MORFOMETRICOS OBJETIVOS. - LA CITOMETRIA PUEDE SEPARASE EN CITOMETRIA ESTATICA (MICROSCOPIA DIGITAL) PARA EL ANALISIS DE IMÁGENES Y EN LA MICROFLUORIMETRIA DE FLUJO (CITOMETRIA DE FLUJO).

ASPECTOS BASICOS DE CITOMETRIA DE FLUJO: - ANALISIS RAPIDO DE CELULAS Y PARTICULAS BIOLOGICAS EN SUSPENSION DENTRO DE UN SISTEMA DE FLUJO LAMINAR SOBRE EL QUE INCIDE UN HAZ DE LUZ, PROPORCIONAN DATOS SOBRE SUS CARACTERISTICAS FISICOQUIMICAS. - CITOMETRO DE FLUJO SE COMPONE DE UN SISTEMA DE INYECCION Y MANEJO DE LA MUESTRA, DETECTOR FISICO Y OPTICO DE PARAMETROS CITOLOGICOS A MEDIR Y SISTEMA DIGITALIZADO PARA EL PROCESO DE LOS DATOS. - METODO DE TINCION SE USA FLUOROCROMOS.

- APLICACIONES: 1) ANALISIS FENOTIPICOS DE CELULAS SANGUINEAS. 2) IDENTIFICACION DE ANTIGENOS INTRACELULARES. 3) CUANTIFICACION DE ADN Y DETERMINACION DE CICLO CELULAR 4) DETERMINACION DE LA VIABILIDAD Y GRADO DE ACTIVACION DE CELULAS EN CULTIVO. 5) ANALISIS DE RATICULACION CIRCULANTES EN SANGRE. 6) DETECCION DE ANTICUERPOS EN SUERO. 7) CUANTIFICACION DE POTENCIAL Y MEMBRANA. 8) MEDIDA DEL CALCIO INTRACELULAR. 9) PH INTRACELULAR.