Clase 2 Bm

ESTRUCTURAS DE ADN DE ORDEN SUPERIOR

ESTRUCTURA DE LOS ACIDOS NUCLEICOS - IDENTIFCACION DE LA ESTRUCTURA DE DOBLE HELICE DEL ADN

TOPOLOGIA DEL ADN - El ADN circular se encuentra restringido topológicamente

TOPOLOGIA DEL ADN

- Los eventos de superenrollamiento tienden a una conformación de mínima energía

TOPOLOGIA DEL ADN Lk = número de enlace

El DNA en células eucariontes presente un superenrollamiento negativo

EL NUMERO DE ENLACE SE COMPONE DE GIRO Y SUPERENROLLAMIENTO

Lk = Tw + Wr

Lk = número de enlace (número de veces que pasa una cadena sobre otra) Tw= giro (cantidad de veces que una cadena se enrosca sobre la otra) Wr= superenrollamiento (torsión sobre la doble hélice)

LOS TOPOISOMEROS DE DNA PUEDEN SER DENTIFICADOS POR CENTRIFUGACION DIFERENCIAL Y ELECTROFORESIS

TOPOISOMERASAS

Topoisomerasa I

Topoisomerasa II

- Los nucleosomas inducen superenrollamientos negativos en eucariontes -Las topoisomerasas pueden relajar el ADN superenrollado -Los procariontes tienen una topoisomerasa especial que induce el superenrollamiento (ADN girasa)

Las topoisomerasas también desanudan y desenredan las moléculas de ADN

Las topoisomerasas utilizan una unión covalente proteína-ADN para cortar y volver a unir las cadenas de ADN

- Utilizan un intermediario covalente tirosina-ADN - La unión fosfotirosínica mantiene la energía del enlace fosfodiéster - La topoisomerasa II utiliza ATP para producir cambios conformacionales que favorezcan el proceso enzimático

EMPAQUETAMENTO DEL ADN

NUCLEOSOMAS - Unidad básica de la cromatina y los cromosomas. - Cada nucleosoma está formado por 9 moléculas de Histonas (H1,2H2a,2H2b,2H3,2H4) y una molécula de ADN de aprox. 200 pb.

NUCLEOSOMAS

ESTRUCTURA CROMATINICA DE ORDEN SUPERIOR - La histona H1 se une a dos regiones del ADN: el ADN ligador y un segmento dúplex de ADN. -La histona H1 estabiliza la estructura del nucleosoma permitiendo la formación de estructuras cromatínicas de orden superior: la fibra de 30 nm.

ESTRUCTURA CROMATINICA DE ORDEN SUPERIOR

- Las colas N-terminales de las histonas son necesarias para la formación de las fibras de 30 nm - La compactación adicional de ADN comprende bucles grandes de ADN nucleosómico

REGULACION DE LA ESTRUCTURA CROMATINICA Complejos remodeladores y modificadores nucleosómicos

Complejo

Subunidades

Deslizamiento

Transferencia

Restructuración

SWI/SNF

8­11

SI

SI

SI

ISWI

2­4

SI

NO

NO

Mi2/NuRD

8­10

SI

NO

NO

La modificación de las colas N-terminales de las histonas altera la accesibilidad de la cromatina

- Se cree que las colas histónicas no modificadas y metiladas se asocian en mayor medida con el ADN nucleosómico que las colas de histonas acetiladas. - La modificación de las colas de histona crea sitios de unión para enzimas modificadoras de la cromatina.

LA MODIFICACION DE HISTONAS Y LA REMODELACION NUCLEOSOMICA ACTUAN EN CONJUNTO PARA AUMENTAR LA ACCESIBILIDAD DEL ADN

TOPOLOGIA DEL ADN (animación) ACTIVIDAD DE LA TOPOISOMERASA(animación) ESTRUCURA ADN (estructural) ENSAMBLE DE NUCLEOSOMA (animación) ESTRUCTURA NUCLEOSOMA (estructural)