LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA UNIVERSIDAD POPULAR DEL CESAR
CARACTERIZACIÓN MORFOLÓGICA DE LAS BACTERIAS (FISIOLOGÍA MICROBIANA)
INTEGRANTES: YURANIS HERNANDEZ DUVAN PUENTES GERMAN LOZANO RICARDO PIZARRO PAULA VEGA
JUAN CARLOS PRADA (MICROBIÓLOGO)
CIENCIAS DE LA SALUD PROGRAMA DE MICROBIOLOGÍA VALLEDUPAR – CESAR 2018 – 01
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INTRODUCCIÓN
Entre las principales características de las bacterias se encuentran su tamaño, forma, estructura y tipo de agrupación. Todas estas características van a constituir la morfología propia de las células bacterianas, gracias a la morfología aprenderemos información sobre el tipo de bacteria, y esta será un paso previo a cualquier proceso de identificación y clasificación taxonómica.
Es importante resaltar las agrupaciones bacterianas ya que se van a clasificar en dos grandes grupos: las agrupaciones microscópicas y las macroscópicas, ya que permiten dar un buen diagnóstico en resultados preliminares.
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OBJETIVOS GENERALES
Identificar las diferentes características morfológicas utilizadas en la identificación de bacterias
OBJETIVOS ESPECÍFICOS
Identificar las características morfológicas a partir de diferentes cepas bacterianas. Aplicar técnicas bacteriológicas que permitan observar las formas y agrupaciones bacterianas de una forma concisa y rápida.
MATERIALES Y REACTIVOS Universidad Popular del Cesar Edificio Luis Antonio Egea Vargas Sede del Campus Universitario Bloque P
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Cepas bacterianas: Escherichia coli, Bacillus spp, Pseudomonas, Micrococcus, Staphylococcus aureus, Streptococcus, Pseudomonas aeruginosa. Asas bacteriológicas Lamina portaobjetos Gradilla Mechero Solución salina Cristal violeta Lugol Alcohol cetona Safranina Aceite de inmersión
EQUIPOS
Microscopio
NORMAS DE BIOSEGURIDAD Los laboratorios de microbiología constituyen ambientes de trabajo especiales que pueden presentar riesgos de enfermedades infecciosas para las personas que se Universidad Popular del Cesar Edificio Luis Antonio Egea Vargas Sede del Campus Universitario Bloque P
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encuentren en o cerca de ellos. Debido a esto se requieren medidas de bioseguridad para trabajar en el laboratorio, en esta práctica realizada en el laboratorio de microbiología trabajamos con las siguientes normas:
Llevar puesta la bata de laboratorio en todo momento. La misma debe permanecer completamente cerrada. Lavar las manos con agua y jabón antes de realizar las actividades programadas, antes de salir del laboratorio y siempre después de manejar materiales que se sabe o se sospecha que son contaminantes. Limpiar y desinfectar las superficies de trabajo, antes de comenzar y al finalizar la sesión práctica. Llevar un calzado apropiado, preferiblemente cerrado. Evitar llevar al laboratorio accesorio que podrían ser fuente de contaminación (por ejemplo joyas). Recoger el cabello largo. 9. Conocer el manejo de todos los equipos y reactivos a emplear antes de iniciar las actividades indicadas en la práctica. Durante la práctica se usó los elementos de bioseguridad personales como: tapa boca, gorro, y guantes.
PROCEDIMIENTO Primero realizamos una lectura de los medios de cultivo y una identificación de las características macroscópicas de las siguientes cepas bacterianas: Universidad Popular del Cesar Edificio Luis Antonio Egea Vargas Sede del Campus Universitario Bloque P
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Escherichia coli Bacillus spp Pseudomona aeruginosa Micrococcus spp Staphylococcus aureus Streptococcus spp Luego mediante la tinción de Gram se hizo una identificación microscópica observando la morfología, agrupación y reacción al Gram del microorganismo, teniendo en cuenta los reactivos y tiempos estipulados: 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7.
Se depositó en la porta objeto una gota de solución salina y se tomó con el asa redonda una pequeña muestra de cepa del cultivo para emulsionarla, luego se dejó secar. Fijamos el extendido flameando tres veces sobre la llama del mechero. Cubrimos el extendido con cristal violeta durante 1 minuto y luego se lavó suavemente con agua. Luego se cubrió con lugol por 1 minuto y se lavó suavemente. Posteriormente se cubrió con alcohol acetona y se dejó actuar por 30 segundos y se lavó. Luego se coloreó con safranina por 1 minuto, se lavó y se dejó secar. Por último se observó en 100X – objetivo de inmersión.
RESULTADOS CARACTERÍSTICAS MACROSCÓPICAS: Escherichia coli: Universidad Popular del Cesar Edificio Luis Antonio Egea Vargas Sede del Campus Universitario Bloque P
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1. 2. 3. 4. 5. 6. 7.
Forma de crecimiento: Circulares Elevación de la colonia: Convexa Características de los bordes: Continuo Consistencia de la colonia: Mucoide Pigmentación: Blanco Tamaño: Medianas Brillo: Opacas
Bacillus spp: 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7.
Forma de crecimiento: Irregular Elevación de la colonia: Planas Características de los bordes: Ondulado Consistencia de la colonia: Blandas Pigmentación: Blanco Tamaño: Grandes Brillo: Opacas
Pseudomonas aeruginosa: 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7.
Forma de crecimiento: Circulares Elevación de la colonia: Planas Características de los bordes: Continuo Consistencia de la colonia: Blanda Pigmentación: Crema Tamaño: Medianas Brillo: Opacas
Micrococcus spp: 1. Forma de crecimiento: Puntiforme 2. Elevación de la colonia: Elevadas 3. Características de los bordes: Continuo 4. Consistencia de la colonia: Blanda 5. Pigmentación: Amarillas verdosas 6. Tamaño: Pequeñas 7. Brillo: Opacas Staphylococcus aureus: 1. 2. 3. 4. 5. 6.
Forma de crecimiento: Puntiformes Elevación de la colonia: Planas Características de los bordes: Continuo Consistencia de la colonia: Blanda Pigmentación: Blanco Tamaño: Pequeños
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7.
Brillo: Opacas
Streptococcus spp: 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7.
Forma de crecimiento: Circulares Elevación de la colonia: Convexa Características de los bordes: Continuo Consistencia de la colonia: Blanda Pigmentación: Crema Tamaño: Medianas Brillo: Opacas
CARACTERÍSTICAS MICROSCÓPICAS: Microorganismo s Escherichia coli
Tipo de Morfología célula Procariota bacilo
Aumento
cocos cocos
Agrupación Reacción al Gram Se Gram encuentran dispersos, algunos en pares. Algunos en Gram + pares En cadenas, Gram algunos en pares. Tétradas Gram + Racimos Gram +
Bacillus spp
Procariota
bacilo
Pseudomonas aeruginosa
Procariota
bacilo
Micrococcus spp Staphylococcus aureus Streptococcus spp
Procariota Procariota Procariota
cocos
Cadenas
100X
Gram +
100X
100X 100X 100X 100X
ANEXOS Las siguientes imágenes fueron tomadas en el laboratorio de microbiología en día 02/03/2018 en la ciudad de Valledupar en la universidad popular del cesar por YURANIS HERNANDEZ. Escherichia coli
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Bacillus spp
Pseudomonas aeruginosa
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Micrococcus spp
Staphylococcus aureus
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Streptococcus spp
CONCLUSIÓN A partir de lo anterior podemos deducir que las bacterias son organismos que poseen una amplia gama de factores fenotípicos que las hacen únicas y diferentes Universidad Popular del Cesar Edificio Luis Antonio Egea Vargas Sede del Campus Universitario Bloque P
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a otros organismos dada a sus características morfológicas; que a la hora de realizar un estudio podemos dar resultados viables con relación a su identificación, es decir La morfología nos da una información primaria sobre el tipo de bacteria, no de forma concluyente, pero sí como paso previo a cualquier proceso de identificación y clasificación taxonómica.
BIBLIOGRAFÍAS.
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1.
LABORATORIOS BRITANIA. S.A. Medios de cultivo. [En línea]. Disponible en: http://www.britanialab.com/. (Consultado el 12/03/2017).
2. LÓPEZ TÉVEZ, LEONOR. Medios de cultivo. [En línea]. Disponible en: http://www.biologia.edu.ar/microgeneral/tp4.pdf. (Consultado el 12/03/2017). 1.
MERCK, (2002). Microbiology Manual
2. Betty A. Forbes, Daniel Sahm, Alice Weissfeld. “Diagnóstico Microbiológico", Ed. Médica Panamericana, 2009 3. Koneman EW, Allen SD, Janda WM, Schreckenberger PC, Winn WC. "Diagnóstico Microbiológico". 5ª ed. Ed. Médica Panamericana SA. Buenos Aires, 1999.
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