Biomoleculas 1.docx

Materiales y métodos Materiales: para el desarrollo de nuestra practica realizada en ámbitos de estudio hacia la biología molecular en la Universidad del Magdalena utilizamos: Azúcar, pan, pescado, miel, leche pura, levadura, orina normal y diabética, huevos, mantequilla, jugo de limón, vinagre, aceite de cocina, zanahoria, y gelatina. Pipetas, goteros punta larga, gradillas, espátula, guantes, tapabocas, pipetas, calentador tubos de ensayo, Baker, papel filtro, papel absorbente. Soluciones A y B de Fehling o reactivo de Benedict, reactivo de Biuret (A y B) lugol, sudan III, ácido nítrico concentrado, agua destilada. Métodos: Según la biomolécula que queríamos identificar en cada alimento utilizamos un procedimiento y reactivos distintos sin embargo todas las muestras eran necesarias en estado líquido por lo que los componentes en estado sólido fueron licuados y convertidos en soluciones acuosas de las cuales se extrajeron cinco muestras de un cm3 cada una, las cuales fueron rotuladas y puestas en un tubo de ensayo , los componentes utilizados fueron : aceite, zanahoria , vinagre, mantequilla, azúcar, orina , orina de una persona diabética , miel , limón , clara de huevo, pescado, leche, pan , y gelatina sin sabor , en algunas muestras hicimos procesos para determinar otras características , como por ejemplo la saturación y la miscibilidad , de esta forma los procesos fueron los siguientes:

Carbohidratos Para determinar la presencia de estos componentes en las muestras de alimentos se utilizaron dos reactivos distintos: En el primer proceso a una de las muestras de cada alimento se le agregaron 20 gotas de reactivo de Benedict y posteriormente se calentaron las muestras de 5 a 10 minutos sumergiéndolas en agua destilada expuesta a una llama sin introducir demasiado la muestra para evitar que el agua entre en ella, luego se retiraron del agua y se observó detenidamente cada muestra. El segundo proceso consistió en agregar de 5 a 10 gotas de lugar a las muestras de todos los alimentos, cabe aclarar que fueron muestras distintas de las que se le agrego reactivo de Benedict, pero de los mismos alimentos, luego se agitó hasta combinar el contenido de la muestra y el reactivo para luego observar los cambios en las muestras. Lípidos o grasas Para determinar la presencia de lípidos y grasas en las muestras de alimentos a cada una de ellas se le agregaron 5 gotas de sudan III y observar los cambios. Para estos componentes además de identificar su presencia en los alimentos se hicieron experimentos para observar su saturación, para hacerlo se utilizó un pedazo de papel filtro en el cual se limitaron tres zonas circulares en las cuales se agregó leche, mantequilla y aceite de manera que cada componente estuviera en una zona diferente, luego se esperó que se secaran las muestras y fueron colocadas frente a una fuente de luz (bombilla) para hacer las respectivas observaciones. Por ultimo realizamos la mezcla de agua, aceite y éter en un tubo de ensayo, con un cm3 de cada una de las sustancias antes mencionados

Proteínas Al igual que en los carbohidratos, aquí se utilizaron dos procesos diferentes: En el primer proceso a todas las muestras se le agregaron 5 gotas de reactivo de Biuret A y al instante se le agregaron la misma cantidad de gotas de reactivo de bureta B para luego observar y anotar los cambios. En el otro proceso a la totalidad de las muestras se le adicionaron cinco gotas de ácido nítrico, considerando que para realizar este proceso era necesario dirigirse a la campana extractora de gases y solo allí adicionar el ácido ya que resulta riesgoso para la integridad física realizarla fuera de este dispositivo, luego de agregar el ácido nítrico las muestras podían ser retiradas de allí, para realizar las respectivas observaciones.

Resultados Al realizar las respectivas observaciones y el análisis a las muestras de alimento y su reacción, además de las experiencias adicionales en los lípidos, obtuvimos: Lípidos: Para determinar la presencia de estos compuestos en los alimentos teníamos en cuenta lo siguiente: Si al agregar el sudan III a las muestras estas presentaban micelas o se tornaban de un color rosado, era positivo para la presencia de lípidos o grasas, mientras que cuando las muestras no se combinaban con el reactivo o se coloraban rojas, la presencia de lípidos era negativa. Teniendo en cuenta estas pautas las muestras que resultaron con presencia de lípidos fueron las muestras de leche, clara de huevo, triturado de pan, pescado, mantequilla, levadura y aceite.

Clara de huevo

Triturado de pan

Levadura

Mantequilla

Leche

Pescado

Aceite (formación de micelas)

Algunas de las muestras que resultaron negativas Saturación Para esta experiencia utilizamos tres sustancias con presencia de lípidos, la leche , la mantequilla y el aceite , de este modo al esparcirlos en una zona delimitada de papel filtro y dejarlas secar , la llevamos frente a una fuente de luz en la que pudimos observar que el aceite presentaba mayor transparencia , en ese orden seguía la leche y por último la mantequilla que tenía un color más concentrado y era menos transparente, por lo que de mayo a menor saturación la mantequilla es más saturada , sigue la leche y luego el aceite.

ACEITE

LECHE

MANTEQUILLA

Miscibilidad Al mezclar el éter, el aceite y el agua en un tubo de ensayo, se pudieron observar dos fases en las que se determinó que una correspondía al agua y la otra a la mezcla del éter con el aceite, ya que por ser ambas sustancias apolares, por ende, se pueden mezclar mientras que el agua es una sustancia polar, por lo tanto, no se mezcló con las otras dos sustancias. De igual forma determinamos que la fase ubicada en el fondo correspondía al agua por su mayor densidad con respecto a la mezcla de los otros dos componentes que permaneció en la parte superior.

Mezcla de aceite y éter agua

Proteínas En este caso al utilizar el reactivo de Biuret la presencia de proteínas era positiva cuando las muestras adquirían un color lila, si estas biomoléculas no estaban presentes la muestra no cambiaba o no se mezclaba con el reactivo. En este caso solo las muestras de leche, gelatina, clara de huevo, triturado de pan y pescado resultaron positivas para la presencia de proteínas.

Pescado

Clara de huevo

Leche

Gelatina

Triturado de pan

Otras muestras tratadas con el reactivo de Biuret (resultado negativo)

Cuando utilizamos el ácido nítrico como reactivo, resultaron positivas las mismas muestras, sin embargo, con el ácido nítrico resultaba una reacción diferente, ya que en vez de tornarse lila la muestra, ésta presentaba un coagulo amarillo claro.

Triturado de pan

leche

clara de huevo

gelatina

pescado

Otras muestras a las que se le adicionó ácido nítrico (resultado negativo) Carbohidratos Para determinar la presencia de estas biomoléculas en las muestras se tenía en cuenta que si al agregar las 20 gotas de reactivo de Benedict y posteriormente calentarlas, la presencia de carbohidratos resultaba positiva si adquirían un color amarillo o naranja, si no se percibían estos colores en las muestras no había presencia de carbohidratos en ellas, sin embargo, cabe aclarar que este reactivo solo demostraba la presencia de carbohidratos de los que se clasifican en azucares simples. En las otras muestras idénticas a las anteriores, donde utilizamos lugol en vez de reactivo de Benedict para que resultara positiva la presencia de polisacáridos (carbohidratos más complejos)

la mezcla se debía tornar gris y con presencia de precipitados, en caso de no existir la presencia de estas biomoléculas en las muestras, no se daba ninguna coloración. De esta forma para las muestras de miel, extracto de zanahoria, triturado de pan, y azúcar resultaron positivas para la presencia de azucares simples al agregar el reactivo de Benedict, las otras muestras no presentaron la presencia de estas biomoléculas.

Azúcar

Miel

Triturado de pan

Zanahoria

Algunas muestras que resultaron negativas al adicionar reactivo de Biuret

Mientras que al agregar el lugol las muestras que resultaron con presencia de polisacáridos fueron la de extracto de zanahoria, y el triturado de pan.

Triturado de pan

DISCUSION Las biomoléculas orgánicas son los carbohidratos, lípidos, proteínas y ácidos nucleicos, cada uno de ellos con características definidas y funciones específicas, propiedades que adquieren por la variedad de grupos funcionales que poseen. La biomolécula al romper se liberan energía la cual es utilizada en el proceso del metabolismo para el funcionamiento celular. Las biomoléculas están presentes en una gran variedad de alimentos que a diario consumimos en nuestra alimentación. Como son carbohidratos, que aunque su función principal es la energética, también hay ciertos hidratos de carbono cuya función está relacionada con la estructura de las células o aparatos del organismo, sobre todo en el caso de los polisacáridos. Estos pueden dar lugar a estructuras esqueléticas muy resistentes y también pueden formar parte de la estructura propia de otras biomoléculas como proteínas, grasas y ácidos nucleicos. Gracias a su resistencia, es posible sintetizarlos en el exterior del cuerpo y utilizarlos para fabricar diversos tejidos, plásticos y otros productos artificiales. Lípidos, pen el laboratorio se sacaron los siguientes laboratorio, el aceite es soluble en éter de petróleo debido a que ambos compuestos no son polares, en sus moléculas no se presentan densidades de cargas opuestas. Las moléculas del agua son polares y las del aceite (lípido) son no polares, debido a las diferentes estructuras y densidades, no hay adhesión entre las moléculas de agua y la sustancia lipídica. Por lo tanto estos dos reactivos se repelen entre sí frente a una prueba de solubilidad y dan como resultado dos fases.

El aceite reacciona con el detergente, al agitarse fuertemente se rompen cadenas y se dividen en pequeñísimas gotitas, dando como resultado una emulsión con aspecto lechoso, que al permanecer en reposo, desaparecen y se dividen en fases.

La saponificación es una reacción de un ácido graso (aceite) y una base (NaOH). Las grasas se combinan con los iones sodio del hidróxido. Al reaccionar con el hidróxido de sodio produce una sal que es el jabón y otro producto secundario que es la Glicerina.

Proteínas, la practica concluyo con éxito ya que se logro identificar, las proteínas. Las proteínas están enlazadas con enlaces peptídicos, disulfuros puentes de hidrogeno de la cadena carbonada. Las fuentes dietéticas de proteínas incluyen carne, huevos, soya, granos, leguminosas y productos lácteos tales como queso o yogurt. Las fuentes animales de proteínas poseen los 20 aminoácidos. Las fuentes vegetales son deficientes en aminoácidos y se dice que sus proteínas son incompletas. Por ejemplo, la mayoría de las leguminosas típicamente carecen de cuatro aminoácidos incluyendo el aminoácido esencial metionina, mientras los granos carecen de dos, tres o cuatro aminoácidos incluyendo el aminoácido esencial lisina.