Bea Trabajo De Analisis De Laboratorio

UNIVERSIDAD Dr. ANDRES BELLO FACULTAD CIENCIA DE LA SALUD Lic. En Laboratorio Clínico

TEMA: Examen de heces y Métodos de concentración DOCENTE: Licda. Patricia de Mejía CATEDRA: Análisis de laboratorio clínico Presentado por: Otilia Venegas Rivera Karla Yanira Hernández Lissette Beatriz Caballero CICLO: 02-2008 San Salvador, 29de agosto de 2008

Introducción En este trabajo se dará a conocer como realizar el examen de heces que es una técnica de mucha importancia útil para el laboratorio clínico en el cual a través de el examen podemos identificar cada uno de los diferentes parásitos que puede infestar al hombre para poder dar un diagnostico de parasitismo intestinal. También los diferentes métodos de concentración en relación a las probabilidades de para descubrir las diferente formas de parásitos intestinales.

Objetivo general Determinar la forma adecuada de procesar una muestra de heces para el examen para hacer un buen diagnóstico parasicológico y los diferentes métodos de concentración. Objetivos específicos 

Identificar las técnicas de cada método de concentración para descubrir los diferentes parásitos intestinales.



Conocer los materiales y el uso adecuado para procesar una muestra de heces

EXAMEN GENAERAL DE HECES El examen general de heces es una técnica de laboratorio útil para el diagnostico de parasisitismo intestinal. A través de este examen podemos identificar cada uno de los parásitos de importancia clínica que puede infestar el hombre. Las muestras sometidas a examen deben ser recién emitidas no contaminadas examinarlas de inmediato o preservadas adecuadamente para asegurar sus propiedades diagnosticas características. PROCEDIMIENTO MATERIAL Y EQUIPO PARA REALIZAR EL EXAMEN DE HECES •

Muestras de heces frescas

•

Porta objetos

•

Cubre objetos

•

Lapices de cera o grasa

•

Palillos de madera

•

Solucion salina

•

Solucion de lugol para heces

•

Microscopio

EXAMEN MACROSCOPICO De

forma

rutinaria

la

muestra

debe

de

ser

primero

examinada

microscópicamente, anotando sus características físicas como: •

Color

•

Olor

•

Consistencia

•

Presencia de mucus, sangre, cantidad de restos alimenticios y la presencia de parásitos adultos (si lo hay)

EXAMEN MICROSCOPICO a) Diluir una pequeña porción de heces en una gota de solución salina, y colocar en la mitad izquierda de un porta objeto. En a otra mitad del porta objeto colocar igual una gota solución de yodo con otra porción heces. b) Mezcle la porción tomada de la muestra con la gota de solución salina igual mezclar también la muestra con la gota de solución de yodo. c) Con un lápiz de cera o graso marque el número de la muestra en el porta objeto. d) Cubrir las preparaciones con laminillas (cubreobjeto) cuidando de no dejar burbujas de aire, ni partículas gruesas de desechos alimenticios. e) Observar al microscopio con el objetivo de bajo poder a seco débil (10X) para buscar trofozoito y quistes de protozoario, así como pequeños helmintos, sus huevos y larvas; también de hará un reconocimiento general en busca de sangre, signos inflamatorios o irritativos (moco pus epitelio) hongos (levaduras o hifas) restos vegetales, restos alimenticios, cristales, etc. f) Haga uso del objetivo seco fuerte (40x) para observar e identificar las etapas evolutivas y características morfológicas típicas de cada parásito. La solución salina se utiliza para poder observar en el microscopio los trofozoitos (activos). La con la solución de yodo colorea los quistes (inactivos) Errores en las preparaciones microscópicas: 

Hacerlas muy gruesas



No usar laminas cubre objetos



Usar agua en lugar de solución salina



Usar solución de yodo muy concentrado o muy diluido



Usar portaobjeto de menor anchura que la indicada, pues no queda suficiente espacio y la muestra se derrama

.METODOS DE CONCENTRACION Se utiliza principalmente para poder concentrar los parásitos y eliminar la mayor cantidad de restos alimenticios. Su finalidad es aumentar el número de parásitos en el volumen de materia fecal que se examina mediante procedimiento de sedimentación o flotación, el material concentrado se encuentra más parásitos que en el resto de materia fecal. Este método puede considerarse el mas eficaz con que se cuenta el presente par concentrar quistes de protozoarios, huevos y larvas de helmintos los cuales se deforman un poco y resulta indicado para concentrar muestras conservadas en formol. Los resultados no son los mejores en cuanto a quistes de giardia lamblia o iodomoeba butshii.

Materiales 

Muestras de heces fresca y preservadas



Solución salina fisiológica



Solución de lugol



Solución de tritón al 10% (detergente no lógico)



Solución de formol



Eter (USP)



Cinta de celofán absorbente (40-50 micras de grosor)



Tubos de 85x15mm marcados a 5 y 6ml



Tubos cónicos de centrifuga de 15ml graduados



Gasa cortada en cuadros



Embudos de 50mm de diámetro



Aplicadores de madera hisopos



Pipetas pasteur con bulbo



Porta objetos



Cubre objetos



Tapones de hule



Centrifuga



Microscopio

Método de ritchie (sedimentación por centrifugación formol-éter) Procedimiento a) Colocar en un tubo marcado a 5ml de formalina al 10% b) Agregar una gota de triton c) Agregar hacer con dos aplicadores de madera hasta que el liquido sea desplazado a la marca de 6 ml. d) Mezclar con la ayuda de 2 o 3 aplicadores e) Filtrar a través de gasa húmeda puesta en un embudo de 50mm a un tubo conico de centrifuga de 15ml. La gasa deberá ser doblada a modo que quede en 4 capas, debiendo exprimir al final con la ayuda de aplicadores. f) Agregar igual cantidad de eter (USP) que el filtrado, tapar con tapon de hule y agitar vigorosamente ( hay que aflojar ligeramente el tapon una vez por lo menos para que se escape la presion) g) Quitar el tapón y centrifugar a 1500 o 2000 rpm por 2 minutos. Se observa en el tubo que se ha formado 5 capas. •

Una superior de eter

•

Una de restos fecales

•

Una de formalina

•

Un sedimento inferior donde se depositan los huevos y larvas que pueda tener la muestra.

h) Se afloja la capa de restos fecales ayudándose de un aplicador que se pasa entre dicha capa y la pared del tubo, con un movimiento circular.

i) Descartar rápidamente pero con cuidado las primeras tres capas, de manera que quede el sedimento en el tubo, y limpiar las paredes del tubo utilizando un hisopo. j) Agregar el sedimento 2 a 4 gotas de solución salina y mezclar k) Hacer preparaciones con lugol y observar al microscopio. Método de centrifugación por gravedad Procedimiento 1) Se coloca 4ml de solución salina 0.85% 2) 5 gramos de heces 3) diluir hasta obtener la muestra homogénea 4) se filtra y se deja en reposo por una hora para que sedimente por gravedad. 5) Cuando ya esta sedimentado se descarta el sobrenadante y luego se coloca solución salina en este caso 4mlal sedimento y se deja que vuelva a sedimentar. Se utiliza para muestras que tengan trofozoitos quistes, huevos y larvas. Método de faust (flotación con sulfato de zinc) Procedimiento 1) Preparar una suspensión fecal en agua de chorro en un frasco de boca ancha: un volumen de heces para 14 de agua, desmenuzar completamente las porciones grandes hasta obtener una suspensión uniforme 2) Filtrar a través de gasa húmeda en un embudo de 50mm. A un tubo conico de centrifuga de 15 ml de capacidad. La gasa deberá ser doblada en cuatro capas debiendo exprimirse al final con ayuda de aplicadores 3) Centrifugar a 2500 rpm por un minuto y descartar el sobrenadante 4) Romper el sedimento con un poco de agua de chorro y disolver llenando el tubo con agua. Centrifugar nuevamente a 2500 rpm por un minuto. 5) Repetir este lavado nuevamente si las heces son muy grasosas o con mucho detrito

6) Disolver el sedimento con un poco de solución de sulfato de zinc densidad 1,180 y se termina de llenar el tubo con la misma solución 1cm de su boca. 7) Centrifugar durante un minuto a 2500 RPM 8) Sin agitar o derramar, recoger parte de la película que se forma en la superficie del líquido, por medio de un asa bacteriológica, se traslada dos o tres asadas del material a un porta objeto. 9) Se añade una gota de solución de lugol, se mezcla y se cubre con la laminilla cubre objeto. 10) Examinar al microscópico

Bibliografía

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Parasitología humana. Botero David. Tercera edición Microbiología y parasitologia, edición,1993

Romero cabello Raúl. segunda