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Universidad Nacional Autónoma de México. Facultad de Estudios Superiores Zaragoza. Laboratorio de bioquímica celular y de tejidos 1 Práctica número 1: Curva Estándar de la albúmina en la clara de huevo

Integrantes:

Badillo Espinoza René Aldhair. Medina Aguilera Marlon Noel. Melo Forjas Ariadna Daniela. Morales Sánchez Paola. Asesor. Adriana Hernández. Grupo: 2451. Equipo 7. Fecha de entrega. 18 de enero de 2019.

OBJETIVOS: ● Desarrollar y analizar una curva estándar. ● Determinar la concentración de albúmina en la clara de huevo por medio del método de Lowry.

INTRODUCCIÓN La curva estándar es una herramienta para la determinación cuantitativa de una sustancia, está construida a partir de cantidades conocidas de una sustancia (la proteína albúmina en este caso) que es analizada para determinar la cantidad de la misma sustancia pero en una muestra problema (la clara de huevo para esta práctica), apoyada en los métodos de espectrofotometría, como también de la ley de Lambert y Beer para conocer una concentración real de la sustancia problema.

RESULTADOS

Concentración (mg)

Absorbancia

0

0

0.01

0.095

0.02

0.126

0.04

0.191

0.08

0.221

r= 0.8933 m= 2.45 b= 0

Experimental Solución problema Albumina de huevo (mL)

Absorbancia

0.4

0.188

0.4

0.172

0.4

0.183

Conversión de las concentraciones 𝑦 = 𝑚𝑥 + 𝑏

𝑥 = 𝑦/𝑚 1. 𝑥 = 0.188/2.45 = 0.0767 𝑚𝑔 0.0767 𝑚𝑔 − −−> 0.4 𝑚𝐿 𝑥 = 0.1911 𝑚𝑔−> 1𝑚𝐿 ↓𝑥1000 (𝑓𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟 𝑑𝑒 𝑑𝑖𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛)

(191 𝑚𝑔/𝑚𝐿 )(1𝑔/1000𝑚𝑔)(100) = 19.1𝑔/100𝑚𝐿 2. 𝑥 = 0.172/2.45 = 0.0702 𝑚𝑔 0.0702 𝑚𝑔 − −−> 0.4 𝑚𝐿 𝑥 = 0.1755 𝑚𝑔−> 1𝑚𝐿 ↓𝑥1000(factor de dilución) (175.5 𝑚𝑔/𝑚𝐿 )(1𝑔/1000𝑚𝑔)(100) = 17.55𝑔/100𝑚𝐿 3. 𝑥 = 0.183/2.45 = 0.0746 𝑚𝑔 0.0746 𝑚𝑔 − −−> 0.4 𝑚𝐿 𝑥 = 0.1867 𝑚𝑔−> 1𝑚𝐿 ↓𝑥1000(factor de dilución) (186.7 𝑚𝑔/𝑚𝐿 )(1𝑔/1000𝑚𝑔)(100) = 18.6𝑔/100𝑚𝐿 Valor de R: 0.893 < 0.99 Concentración teórica de Albumina (mg)

Concentración practico (g/100 mL)

1.-0.0767

19.1

2.- 0.0702

17.55

3.- 0.0746

18.6

Análisis de resultados En base a los resultados obtenidos podemos mencionar que la concentración teórica (11g/ 100ml) comparada concentración experimental (18.5g/100ml ) de la

albúmina en la clara de huevo es alta, esto puede deberse a el origen del huevo, si era una gallina de granja, una doméstica o una gallina de comercio, el tipo de alimento con la cual la alimentaban, factores de producción de huevo, etc. Con ayuda de la curva estándar y la regresión lineal se logró obtener los valores de la concentración experimental, aunque estos datos no son confiables para una investigación rigurosa, ya que la curva solo se realizó una vez, con un resultado del coeficiente de correlación menor al 0.99. El cálculo de absorbancia de los patrones en el espectrofotómetro pudo influir la variación de datos y la toma de absorbancia para trazar la curva estándar, este experimento se realizó con fines prácticos y de experimentación para conocer el manejo del espectrofotómetro y el uso de la curva estándar como herramienta para la determinación cuantitativa de una sustancia. Conclusión. Podemos concluir que en efecto, la curva estándar realizada en la práctica del pasado 11 de febrero no fue confiable, ya que del valor teórico de coeficiente de correlación al valor experimental hay una diferencia bastante notoria. Al darse este tipo de efecto en los valores obtenidos debió de realizarse una segunda calibración con al menos 8 analitos para obtener un intervalo de confianza del 99%, además de verificar con precaución el sistema de medición utilizado, ya que esto podría discriminar entre pequeñas diferencias la concentración de nuestro analito, lamentablemente por falta de tiempo no fue posible. Bibliografía. Harris Daniel C. “Análisis Químico Cuantitativo”, 2ª edición. Editorial Reverte, España 2001. Miller James N., Miller Jane C. “Estadística y Quimiometría para Química Analítica”, 4ª edición, Editorial Prentice Hall, España 2002.