Aula 7

Enzimologia Marcus Aurélio Miranda de Araújo.

Inibição irreversível “Substrato que se combina irreversivelmente com uma enzima.” „

Assemelha-se a um inibidor não-competitivo.

„

A enzima é completamente removida do sistema.

„

Vmáx↓ e Km permanece o mesmo.

Inibição irreversível „

Inibidores suicidas „

„

é uma classe especial, participa dos primeiros passos químicos da reação enzimática normal,

„

Composto reativo – combina irreversivelmente,

„

Chamados de inibidores com base no mecanismo.

Enzimas reguladoras “enzima que determina a velocidade de toda a seqüência, pois ela catalisa a reação mais lenta.” „

Geralmente, a 1ª enzima multienzimático é a reguladora.

de

um

sistema

Enzimas reguladoras „

A atividade destas enzimas é regulada através de vários tipos de moléculas sinalizadoras, que podem ser: „ „

„

Pequenos metabólitos, Cofatores.

Classes de enzimas reguladoras: „ „

Alostéricas, Reguladas pela modificação covalente reversível.

Enzimas Alostéricas „

„

„

Deriva do grego allos = “outros” e stereos = “sólido ou forma”. Funcionamento: ligação não-covalente e reversível de um metabólito regulador chamado de modulador. Enzimas alostéricas – possuem “outras formas” ou conformações induzidas pela união com moduladores.

„

Inibição por retroalimentação (inibição alostérica).

Enzimas Alostéricas „

„

Os moduladores podem ser: „ Inibidores ou „ Estimuladores. Tipos de enzimas alostéricas: „ homotrópicas = modulador é idêntico ao substrato. „ Heterotrópica = quando o modulador é uma molécula ≠ do substrato.

Enzimas Alostéricas „

Apresentam 1 ou mais sítios alostéricos ou regulador e 1 sítio ativo ou catalítico. „

„

Ex: calcineurina – fosfatase.

Enzimas homotrópicas – sítio ativo e o regulador são os mesmos.

Enzimas Alostéricas „

Dados cinéticos: „

„

Curva de saturação é uma sigmóide. Comportamento cinético sigmóide – interações cooperativa entre as múltiplas subunidades protéicas.

Estabilidade das proteínas/enzimas „

Podem ser desnaturadas por mudanças de vários parâmetros externos: „ „ „ „

Temperatura, pH, Pressão, [ ] de desnaturantes: Uréia ou GdmCl.