Antiseptik Dan Desinfektan Madina.docx

LAPORAN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI INDUSTRI

JUDUL PERCOBAAN : ANTISEPTIK DAN DESINFEKTAN

NAMA PRAKTIKAN

: MADINATUN NUR LAILI

NIM/ GRUP

: 2031710027 / II

TANGGAL PRAKTIKUM : 12 MARET 2019 ASISTEN

: MUHAMMAD SALMAN ALFARISI

LABORATORIUM ANALISA BAHAN UNIVERSITAS INTERNASIONAL SEMEN INDONESIA TAHUN AKADEMIK 2018/2019

DAFTAR ISI DAFTAR ISI ..................................................................................................................... i ABSTRAK ...................................................................................................................... iii ABSTRACT .................................................................................................................... iv BAB I................................................................................................................................ 1 PENDAHULUAN ............................................................................................................ 1 1.1

Latar Belakang ................................................................................................... 1

1.2

Rumusan Masalah .............................................................................................. 1

1.3

Tujuan ................................................................................................................ 1

BAB II .............................................................................................................................. 2 TINJUAN PUSTAKA ...................................................................................................... 2 2.1 Mikroorganisme ...................................................................................................... 2 2.2 Pengertian Antiseptik .............................................................................................. 2 2.3 Pengertian Desinfektan ........................................................................................... 2 2.4 Macam-macam Antiseptik dan Desinfektan .......................................................... 3 2.5 Mekanisme Kerja Antiseptik dan Desinfektan ....................................................... 4 2.6 Faktor yang Mempengaruhi Efektivitas Antiseptik dan Desinfektan ..................... 5 2.7 Grafik Pertumbuhan Mikroorganisme .................................................................... 6 2.8 Bakteri Gram Positif dan Negatif ........................................................................... 7 2.9 Bakteri Stapylococcus aureus ................................................................................. 8 2.10 Bakteri Pseudomonas aeruginosa ......................................................................... 8 BAB III ............................................................................................................................. 9 METODOLOGI PERCOBAAN ...................................................................................... 9 3.1 Alat dan Bahan ........................................................................................................ 9 3.1.1 Alat ................................................................................................................... 9 3.1.2 Bahan ................................................................................................................ 9 3.2 Cara Kerja ........................................................................................................... 9 BAB IV ........................................................................................................................... 11 HASIL DAN PEMBAHASAN ...................................................................................... 11 4.1 Analisa Data .......................................................................................................... 11 4.2 Pembahasan .......................................................................................................... 13 BAB V ............................................................................................................................ 17

i

PENUTUP ...................................................................................................................... 17 5.1 Kesimpulan ........................................................................................................... 17 DAFTAR PUSTAKA ..................................................................................................... 18 LAMPIRAN ................................................................................................................... 19 SKEMA KERJA ............................................................................................................. 19 LAMPIRAN ................................................................................................................... 21 SKEMA ALAT .............................................................................................................. 21 LAMPIRAN ................................................................................................................... 23 TIME SCHEDULE ........................................................................................................ 23 TUGAS PENDAHULUAN............................................................................................ 25

ii

ANTISEPTIK DAN DESINFEKTAN Laili, Madinatun Nur, Muhammad Salman Alfarisi Jurusan Teknik Kimia, Fakultas Teknologi Industri dan Argoindustri Universitas Internasional Semen Indonesia Jl. Veteran, Kompleks PT. Semen Indonesia Persero Tbk, Gresik 61122, Indonesia E-mail: [email protected]

ABSTRAK Antiseptik merupakan disinfektan yang nontoksik karena digunakan untuk kulit, mukosa atau jaringan hidup lainnya. Sedangkan Desinfektan adalah zat kimia yang mematikan sel vegetatif belum tentu mematikan bentuk spora mikroorganisme penyebab suatu penyakit. Bakteri yang digunakan pada percobaan ini yaitu bakteri S. Aereus dan Pseudomonas. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mempelajari pengaruh antiseptik dan desinfektan terhadap pertumbuhan mikroorganisme. Prinsip pada praktikum ini adalah menggunakan prinsip sterilisasi. Langkah kerja yang dilakukan yaitu dengan menggunakan larutan antiseptic dan desinfektan yang diletakan pada petridish dan menginkubasinya. Sehingga diperoleh hasil penggunaan desinfektan yang paling efektif dibandingkan antiseptik, karena pada desinfekan terdapat beberapa kandungan seperti klorin yang sangat efektif membunuh kuman dan dapat menyebabkan dinding sel dan membran sel bakteri menjadi terganggu terutama protein pada bakteri menjadi hancur dan akhirnya mati. Proses pertumbuhan bakteri disekitar desinfektan hanya sedikit jika dihitung dari zona bebasnya. Dan, bakteri yang paling resistan yaitu S. aureus dibandingkan dengan Pseudomonas jika dilihat dari zona bebas bakteri yang diperoleh.

Kata kunci : antiseptik, desinfektan, microorganism, pseudomonas, S. Aereus

iii

ABSTRACT Antiseptics are nontoxic disinfectants because they are used for skin, mucosa or other living tissues. While disinfectants are chemicals that kill vegetative cells, not necessarily to kill the spores of microorganisms that cause a disease. The bacteria used in this experiment were S. Aureus and Pseudomonas. The purpose of this study was to study the effect of antiseptics and disinfectants on the growth of microorganisms. The principle in this lab is to use the principle of sterilization. The work step taken is to use an antiseptic solution and disinfectant which is placed on the petridish and incubate it. So that the results So that the results of the use of disinfectants are most effective than antiseptics, because in disinfectants there are several ingredients such as chlorine which is very effective at killing germs and can cause the cell walls and bacterial cell membranes to be disturbed, especially proteins in the bacteria to be destroyed and eventually die. The process of growth of bacteria around disinfectants is only a little if calculated from the free zone. And, the most resistant bacteria is S. aureus compared to Pseudomonas when viewed from the bacterial free zone obtained.

Keywords: antiseptics, disinfectants, microorganisms, pseudomonas, S. Aureus

iv

BAB I PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang Berbagai keperluan tentunya telah dikenal, bahkan mungkin menggunakan beberapa produk keperluan rumah tangga, laboratorium atau rumah sakit yang bernama desinfektan. Desinfektan didefinisikan sebagai bahan kimia atau pengaruh fisika yang digunakan untuk mencegah terjadinya infeksi atau pencemaran jasad renik seperti bakteri dan virus, juga untuk membunuh atau menurunkan jumalah mikroorganisme atau kuman penyakit lainnya. Antiseptik didefinisikan sebagai bahan kimia yang dapat menghambat atau membunuh pertumbuhan jasad renk seperti bakteri, jamur dan pada jaringan hidup lainnya. Desinfeksi merupakan proses penting dalam pengendalian penyakit, karena tujuannya adalah perusakan agen-agen pathogen. Antiseptic dan desinfektan pada dasarnya ada persamaan bahan kimia yang digunakan, tetapi tidak semua bahan dsinfektan adalah bahan antiseptik karena adanya batasan dalam penggunaan antiseptik. Antiseptik tersebut harus memiliki sifat tidak merusak jaringan tubuh atau tidak bersifat keras. Terkadang penambahan bahan desinfektan juga dijadikan sebagai salah satu cara dalam proses sterilisasi, yaitu proses pembebasan kuman. Tetapi pada kenyataannya tidak semua bahan desinfektan dapat berfungsi sebagai bahan dalam proses sterilisasi. Maka dalam percobaan yang akan dilakukan ini akan mempelajari bagaimana pengaruh antiseptik dan desinfektan terhadap perumbuhan mikroorgaisme. 1.2 Rumusan Masalah Adapun rumusan masalah pada praktikum Antiseptik dan Desinfektan adalah bagaimana pengaruh antiseptik dan desinfektan terhadap pertumbuhan mikroorganisme? 1.3 Tujuan Adapun tujuan dari percobaan praktikum Antiseptik dan Desinfektan adalah untuk mempelajari pengaruh antiseptik dan desinfektan terhadap pertumbuhan mikroorganisme

1

BAB II TINJUAN PUSTAKA 2.1 Mikroorganisme Mikroorganisme merupakan semua makhluk yang berukuran beberapa mikron atau lebih kecil lagi. Yang termasuk golongan ini adalah bakteri, cendawan atau jamur tingkat rendah, ragi yang menurut sistematik masuk golongan jamur, ganggang, hewan bersel satu atau protozoa, dan virus yang hanya nampak dengan mikroskop electron. Mikroorganisme umumnya terdapat di mana-mana, seperti di dalam tanah, di lingkungan akuatik, berkisar dari aliran air sampai lautan, dan atmosfer. Mikroorganisme tersebut mempunyai beberapa peranan salah satunya mikroorganisme yang hidup dalam tanah dapat membantu pembentukan struktur tanah yang mantap, karena mikroorganisme tanah dapat mengeluarkan (sekresi) zat perekat yang tidak mudah larut dalam air (Hidayat, 2018). 2.2 Pengertian Antiseptik Antiseptik merupakan disinfektan yang nontoksik karena digunakan untuk kulit, mukosa atau jaringan hidup lainnya. Antiseptik adalah zat yang biasa digunakan untuk menghambat pertumbuhan dan membunuh mikroorganisme berbahaya (patogenik) yang terdapat pada permukaan tubuh luar mahluk hidup. Secara umum, antiseptik berbeda dengan obat-obatan maupun disinfektan. Obat-obatan seperti antibiotik misalnya, membunuh mikroorganisme secara internal, sedangkan disinfektan berfungsi sebagai zat untuk membunuh mikroorganisme yang terdapat pada benda yang tidak bernyawa. Sampai saat ini belum ada antiseptic yang ideal, tidak jarang bersifat toksik bagi jaringan, menghambat penyembuhan luka dan menimbulkan sensitivitas (Darmadi, 2008). 2.3 Pengertian Desinfektan Desinfektan adalah zat kimia yang mematikan sel vegetatif belum tentu mematikan bentuk spora mikroorganisme penyebab suatu penyakit. Desinfektan juga digunakan untuk menghambat pertumbuhan mikroorganisme pada benda-benda mati seperti meja, lantai, objek glass dan lain-lain. Kelompok utama desinfektan yaitu fenol, alkohol, aldehid, halogen, logam berat, detergen, dan kemosterilisator gas. Cara kerja zat-zat kimia dalam mematikan atau menghambat pertumbuhan mikroorganisme berbeda-beda antara 2

lain yaitu dengan merusak dinding sel, mengubah permeabilitas sel, mengubah molekul protein dan asam amino yang dimiliki mikroorganisme, menghambat kerja enzim, menghambat sintesis asam nukleat dan protein, serta sebagai antimetabolite (Ascenzi, 1969). 2.4 Macam-macam Antiseptik dan Desinfektan 2.4.1 Macam-macam Antiseptik Secara garis besar, Antiseptik dibagi menjadi beberapa bagian antara lain : a. Alkohol b. Halogen dan senyawanya : Iodium, Povidon Iodine, Yodoform (obat uning), dan Klorheksidin c. Oksidansia : kalium permananat dan Peridrol d. Logam berat dan garamnya : Merkuri klorida dan Merkukrom (obat merah) e. Asam : Asam Borat f. Turunan Fenol : trinitrofenol (asam pikrat), dan heksaklorofen (phisohex) g. Basa Amonium Kuarterner (quats) : Etakridin (rivanol) (Darmadi, 2008). 2.4.2 Macam-macam Desinfektan Desinfektan dibagi menjadi beberapa bagian, antara lain : a. Grup alkohol larut, contoh: (etanol, isopropil alkohol). b. Grup gas sterilisasi, contoh: etilen oksida. Waktu reaksi: 4-8 jam. c. Grup gas desinfektan, contoh : formaldehida. d. Grup halogen, contoh : khlorin, yodium. e. Grup fenol, contoh : kreosol, fenol semi sintetis, lisol. f. Grup detergen kationik (amonium quaternam). g. Grup detergen anionik (adiktif sabun atau detergen), contoh: heksakhlorfen (G11), tertrakhlorsalisilanida. h. Desinfektan lain-lain, Garam: komponen mercuri organik seperti merkurokhom dan tiomersal.

3

Alkali: larutan NaOH sering digunakan dalam kedokteran veterinel untuk desinfeksi kandang. Hidrogen peroksida: dalam konsentrasi 3% digunakan untuk mencuci dan desinfektan luka. Sabun: aktivitas bakterisidal lemah tetapi efektif untuk mencuci atau menghilangkan jasad renik. Komponen biguanida: misalnya kholorheksidin, bersifat bakterisidal, tetapi tidak efektif terhadap virus, spora dan mikrobakteri, biasanya dicampur dengan detergen kationik. Diadelhida : spektrum aktivitasnya paling luas, yaitu bersifat bakterisidal, virisidal, fingisidal, dan sporosidal. (Darmadi, 2008).

2.5 Mekanisme Kerja Antiseptik dan Desinfektan Mekanisme kerja antiseptik dan desinfektan sebagai zat kimia sangat berpengaruh terhadap mikroba, yaitu melalui unsur protein yang membentuk struktur seluler mikroba dengan akibat sebagai berikut : a. Rusaknya dinding sel Danya bahan kimia pada permukaan sel akan menimbulkan lisis yang berakhir dengan kematian sel b. Adanya gangguan sistem enzim Terjadinya perubahan struktur kimia enzim yang berakhibat adanya gagguan metabolism sel c. Terjadinya denaturasi protein Rusaknya ikatan protein berakibat terjadinya perubahan struktur sel, sehingg sifatsifat khasnya hilang d. Rusaknya asam nukleat Berakibat pada keampuan sel melakukan replikasi maupun sintesis enzim (Darmadi, 2008).

4

2.6 Faktor yang Mempengaruhi Efektivitas Antiseptik dan Desinfektan 2.6.1 Faktor yang Mempengaruhi Efektivitas Antiseptik 1. Faktor antiseptik a. Konsentrasi Pada konsentrasi yang sediit lebih tinggi, efek fungisid lebih kuat daripada efek bakterisid. Serta adanya perbedaan efek misalnya pada pengunaan fenol 1% mempunyai efek bakteriostasis, tetapi bila diatas 1,5% mempunyai efek bakterisid. b. pH. Efek klorheksidin 10 kali lebih kuat pada pH 6 daripada pH 9. c. Zat pelarut. Klorheksidin dalam larutan alcohol kerjanya fungisid, sedangkan larutannya dalam air hanya berdaya fungiistatis lemah. 2. Faktor mikroba a. Jumlah mikroba. Semakin banyak jumlah mikroba, makin lama waktu yang diperlukan untuk membunuhnya. b. Bentuk endospora sulit dibunuh, sedangka bentuk vegetative menunjukkan kepekaan yang bervariasi. 3. Faktor lingkungan. Adanya bahan organic misalnya darah, pus, saliva atau feses dapat menghambat kerja antiseptik. 4. Waktu Pemaparan. Larutan Iodine 4% membunuh kuman dalam waktu 1 menit, sedngkan larutan 1% memrlukan waktu 4 menit. (Darmadi, 2008).

2.6.2 Faktor yang Mempengaruhi Efektivitas Desinfektan Efektivitas mikroba ditentukan oleh beberapa factor, antara lain : a. Faktor mikroba 1. Jenis mikroba pathogen. Beberapa mikroba pathogen memiliki daya tahan lebih baik dibandingkan dengan yang lainnya.

5

2. Jumlah mikroba pathogen (bioburden). Semakin banyak mikroba pathogen, maka beban kerja disinfektan akan semakin berat. b. Faktor peralatan media 1. Adanya perlakuan-perlakuan sebelumnya, yaitu proses dekontaminasi dan proses pembersihan. 2. Beban kandungan materi oerganik, adanya materi organic dapat memengaruhi kerja disinfektan dengan cara melakukan pengikatan terhadap zat aktif disinfektan. 3. Struktur fisik peralatan medis dengan permukaan rata atau rumit 4. Adanya larutan yang berisi mineral seperti kalsium dan magnesium yang menempel pada peralatan medis dapat memengarui elfektivitas disinfektan dengan cara mengikat zat aktif disinfektan c. Waktu pemaparan (durasi) Lamanya kontak antara disinfektan dengan ikroba pathogen yang akan dieliminasi d. Faktor disinfektan Tingat keasaman atau kebasaan (pH) disinfektan. Tergantung dari disinfektannya, ada yang bekerja secara optimal pada suasana asam atau suasana basa (Darmadi, 2008).

2.7 Grafik Pertumbuhan Mikroorganisme Suatu bakteri yang dimasukkan ke dalam medium baru yang sesuai akan tumbuh memperbanyak diri. Jika pada waktu-waktu tertentu jumlah bakteri dihitung dan dibuat grafik hubungan antara jumlah bakteri dengan waktu maka akan diperoleh suatu grafik atau kurva pertumbuhan. Hubungan antara jumlah sel dengan waktu pertumbuhan dapat dinyatakan dalam Kurva atau Grafik Pertumbuhan (Fifendy, 2017). Pertumbuhan populasi mikroba dibedakan menjadi dua yaitu biakan sistem tertutup (batch culture) dan biakan sistem terbuka (continous culture). Pada biakan sistem tertutup, pengamatan jumlah sel dalam waktu yang cukup lama akan memberikan gambaran berdasarkan kurva pertumbuhan bahwa terdapat fase-fase pertumbuhan. Fase pertumbuhan dimulai pada fase permulaan, fase pertumbuhan yang dipercepat, fase

6

pertumbuhan logaritma (eksponensial), fase pertumbuhan yang mulai dihambat, fase stasioner maksimum, fase kematian dipercepat, dan fase kematian logaritma (Fifendy, 2017).

Gambar 1. Grafik Pertumbuhan Mikroorganisme (Fifendy, 2017).

2.8 Bakteri Gram Positif dan Negatif Bakteri gram positif pembentuk spora seperti Spesies Bacillusdan Clostridium. Kedua spesies ini terdapat dimana-mana, membentuk spora, sehingga dapat hidup di lingkungan

selama

bertahun-tahun.

Spesies Basillusbersifat aerob, sedangkan

Clostridiumbersifat anaerob obligat. Bakteri Gram-positif Tidak Membentuk Spora seperti Spesies Corynebacterium, Listeria, Propionibacterium, Actinomycetes. Beberapa anggota genus Corynebacteriumdan kelompok Propionibacterium merupakan flora normal pada kulit dan selaput lender manusia (Steffen, 2008). Bakteri Gram Negatif Berbentuk Batang (Enterobacteriacea). Bakteri gram negatif berbentuk

batang

habitatnya

adalah

usus

manusia

dan

binatang.

Enterobacteriaceaemeliputi Escherichia, Shigella, Salmonella, Enterobacter, Klebsiella, Serratia, Proteus). Beberapa organisme seperti Escherichia coli merupakan flora normal dan

dapat menyebabkan

penyakit, sedangkan

bakteri yang lain

seperti bakteri

salmonella dan shigella merupakan patogen yang umum bagi manusia (Steffen, 2008).

7

2.9 Bakteri Stapylococcus aureus Bakteri Staphyloccus aureus adalah bakteri patogen utama pada manusia. Hampir setiap orang pernah mengalami berbagai infeksi Staphylococcus aureus selama hidupnya, dari keracunan makanan yang berat atau infeksi kulit yang kecil, sampai infeksi yang tidak bisa disembuhkan (Agus Herdiana, 2015). Staphylococcus aureus termasuk dalam family Staphylococcaceae, berukuran diameter 0,5-1,5 μm dan membentuk pigmen kuning keemasan. Bentuk sel kokus tunggal, berpasangan, tetrad dan berbentuk rantai juga tampak dalam biakan cair. Bakteri fakultatif anaerob dan tidak membentuk spora (Dubnau, 1982). 2.10 Bakteri Pseudomonas aeruginosa Bakteri ini Berbentuk batang dengan ukuran sekitar 0,6 x 2 μm. Terlihat sebagai bakteri tunggal, berpasangan, dan terkadang membentuk rantai yang pendek. Termasuk bakteri gram negatif. Bakteri ini bersifat aerob, katalase positif, oksidase positif, tidak mampu memfermentasi tetapi dapat mengoksidasi glukosa/karbohidrat lain, tidak berspora, tidak mempunyai selubung (sheat) dan mempunyai flagel monotrika (flagel tunggal pada kutub) sehingga selalu bergerak. Bakteri ini dapat tumbuh di air suling dan akan tumbuh dengan baik dengan adanya unsur N. Suhu optimum untuk pertumbuhan P. aeruginosa adalah 42◦C. P. aeruginosa mudah tumbuh pada berbagai media pembiakan karena kebutuhan nutrisinya sangat sederhana (Dubnau, 1982).

8

BAB III METODOLOGI PERCOBAAN

3.1 Alat dan Bahan 3.1.1 Alat Alat yang digunakan dalam percobaan antiseptik dan desinfektan adalah sebagai berikut : 1. Tabung reaksi

6 buah

2. Petridish

6 buah

3. Autoklaf

1 buah

4. Peralatan transfer

1 buah

5. Kertas coklat

1 buah

6. Kertas saring

2 buah

3.1.2 Bahan Bahan yang digunakan dalam percobaan antiseptik dan desinfektan adalah sebagai berikut : 1. Media NB agar 2. Antiseptik Betadine 3. Desinfektan Bayclin 3.2 Cara Kerja Prosedur kerja yang dilakukan dalam percobaan Antiseptik dan Desinfektan adalah : 1. Menyediakan 6 buah tabung reaksi kosong dan 6 buah petridish kosong 2. Memasukkan tabung reaksi ke dalam autoklaf bersama dengan petridish yang kosong tersebut selama 15 menit pada suhu 121⁰C 3. Mendiamkan media sampai kurang lebih 45⁰C 4. Mengisi tabung reaksi tersebut dengan media NB agar sebanyak 10 mL

9

5. Menuangkan media agar yang berada dalam tabung reaksi kedalam petridish dengan komposisi 2 petridish digunakan sebagai larutan blanko, 2 petridish untuk uji antiseptik dan 2 lainnya juga untuk uji desinfektan 6. Membungkus petridish dengan kertas coklat 7. Mengambil 2 tabung reaksi, lalu menuangkan kedalam petridish sebagai blanko 8. Melakukan proses inokulasi kedalam 4 buah tabung rekasi 9. Menuangkan media dan membiarkan hingga padat 10. Mencelupkan 2 potong kertas saring kecil yang berbentuk segitiga dan persegi ke dalam larutan antiseptik dan desinfektan 11. Meletakkan kertas saring ke dalam media yang mulai padat 12. Bungkus petridish dengan kertas coklat dan inkubasikan selama 48 jam dalam suhu 30⁰C dengan posisi terbalik

10

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Analisa Data Berikut merupakan Analisa data dari percobaan antiseptik dan desinfektan : Tabel 4.1 Hasil Perlakuan dan Pengamatan percobaan antiseptik dan desinfektan No

Perlakuan

Pengamatan

1

Disediakan 6 buah tabung reaksi Tabung reaksi kosong sebanyak 6 buah kosong.

yang sudah ditutup kapas diletakkan dalam beaker glass.

2

Petridish dibungkus dengan kertas Petridish sudah dibungkus kertas coklat coklat.

3

Tabung

dan diberi label.

reaksi

dimasukkan Petridish yang dibungkus kertas coklat

kedalam autoklaf bersama dengan dan 6 buah tabung reaksi berada didalam 6 buah petridish yang kosong autoklaf selama 15 menit. tersebut selama 30 menit pada suhu 121⁰C.

11

4

Media NB agar diisikan kedalam Tabung reaksi berisi 10 ml media agar tabung reaksi sebanyak 10 ml.

5

2

tabung

reaksi

diinokulasi

yang

dengan

2

yang berwarna coklat pekat.

telah Media agar yang telah diinokulasi berada bakteri dalam petridish yang dibungkus kertas

berbeda diambil, lalu dituangkan coklat dan diberi label. kedalam petridish sebagai blanko.

6

Proses

inokulasi

dilakukan 4 Petridish berisi media agar dengan 2

kedalam 4 buah tabung reaksi petridish berisi bakteri S.aureus dan 2 selanjutnya

dengan

2

bakteri petridish berisi bakteri Pseudomonas

berbeda.

7

4 potong kertas saring kecil Kertas saring dipotong menjadi kotak dicelupkan

kedalam

larutan kecil

antiseptik dan desinfektan.

12

8

Kertas saring diletakkan kedalam Kertas saring berada ditengah-tengah media yang mulai padat.

9

media dalam petridish.

Petridish dibungkus dengan kertas Petridish diinkubasikan selama 24 jam coklat dan diinkubasikan selama hari pertama dan 24 jam hari kedua dan 48 jam dalam suhu 30⁰C dengan dilakukan pengukuran. posisi terbalik.

4.2 Pembahasan Pada percobaan antiseptik dan desinfektan ini bertujuan untuk mempelajari pengaruh antiseptik dan desinfektan terhadap pertumbuhan mikroorganisme. Antiseptik merupakan disinfektan yang nontoksik karena digunakan untuk kulit, mukosa atau jaringan hidup lainnya. Sedangkan Desinfektan adalah zat kimia yang mematikan sel vegetatif belum tentu mematikan bentuk spora mikroorganisme penyebab suatu penyakit. Pada percobaan ini, antiseptik yang digunakan yaitu Listerine (Darmadi, 2008). Sedangkan desinfektan yang digunakan yaitu superpell. Mekanisme kerja antiseptik dan desinfektan sebagai zat kimia sangat berpengaruh terhadap mikroba, yaitu melalui unsur protein yang membentuk struktur seluler mikroba dengan akibat rusaknya dinding sel, Adanya gangguan sistem enzim, rusaknya denaturasi protein dan rusaknya asam

nukleat

(Darmadi, 2008). Percobaan ini menggunakan bakteri S. Aereus dan Pseudomonas. Dimana Bakteri S. aureus merupakan bakteri yang berbentuk kokus, gram positif, aerob, tidak membentuk spora, tidak motil, menghasilkan pigmen yang mewarnai koloni kuning

13

emas, memproduksi koagulase dan katalase. S. aureus ditemukan dalam hidung, traktus respiratoorius, dan kulit sebagai flora normal. Sedangkan Bakteri Pseudomonas sendiri memiliki karakteristik seperti, gram negatif, berbentuk batang atau kokus, aerob obligat, motil mempunyai flagel polar. Bakteri ini, oksidase positif, katalase positif, nonfermenter dan tumbuh dengan baik pada suhu 4⁰C atau dibawah 43⁰C (Dubnau, 1982). Pada percobaan ini, langkah pertama yang dilakukan yaitu, menyediakan 6 buah tabung reaksi yang sudah ditutup kapas pada mulut tabungnya. Setelah itu, menyiapkan 6 buah petridish yang sudah dibungkus dengan kertas coklat. Penggunaan kertas coklat pada petridish untuk menghindari air tidak masuk kedalam petridish karena terhalang oleh lapisan kertas yang mengkilap, serta menghindari patogen masuk kedalam petridish yang berisi bakteri tersebut. Setelah itu, memasukkan 6 petridish yang sudah dibungkus kertas coklat dan 6 tabung reaksi kedalam oven selama 15 menit dengan suhu 1210C untuk proses sterilisasi (Suryani,2005). Sterilisasi merupakan suatu proses dengan metode tertentu dapat memberikan hasil akhir, yaitu suatu bentuk keadaan yang tidak dapat ditunjukkan lagi adanya mikroorganisme hidup. karena pada suhu ini, bakteri akan mati dengan uap panas dan juga pada suhu ini spora tidak dapat hidup, dengan demikian sterilisasi akan berjalan maksimal. Pemanasan dilakukan selama 15 menit, karena mikroorganisme dan endospore hanya dapat bertahan selama maksimum 13 menit, maka dengan waktu 15 menit dapat dipastikan bahwa alat akan steril (Troy, 1917). Setelah proses sterilisasi, menyiapkan media NB agar. Memasukkan media NB agar sebanyak 10 ml kedalam tabung reaksi dengan menggunakan gelas ukur. Media NB agar ini merupakan suatu karbohidrat kompleks yang diperoleh dari algae marin tertentu. Agar powder digunakan untuk bahan pemadat media. Agar yang lebur dalam larutan cair akan membentuk gel pada suhu dibawah 450C. Agar bukan merupakan sumber nutrient bagi bakteri. Menggunakan media NB agar ini karena merupakan media yang cocok untuk bakteri yang digunakan (Harmita,2008). Kemudian 6 tabung reaksi yang sudah berisi 10 ml media agar tersebut diinokulasikan dengan bakteri S. aureus dan Pseudomonas, 2 diantaranya yaitu sebagai blanko. Cara menginokulasi yaitu dengan menggunakan jarum ose. Dimana jarum ose tersebut dicelupkan pada bakteri yang digunakan, yang sebelumnya dipanaskan terlebih dahulu diatas api pada ujung jarum ose tersebut agar jarum yang digunakan benr-benar steril.

14

Setelah itu, menggores bagian ujung jarum pada biakan bakteri. Lalu, meletakkan bakteri tersebut dalam media dengan cara jarum ose tersebut dimasukkan langsung dalam tabung yang berisi media agar (Umbreit, 1965). Tujuan dari proses inokulasi ini yaitu menumbuhkan bakteri dari media alami ke media yang baru. Setelah itu, tabung reaksi dihomogenkan dengan memutar - mutar dengan telapak tangan agar media tercampur secara merata. Media agar yang berisi bakteri terebut dimasukkan kedalam 6 masingmasing yang sudah diberi label (nama) dan dibungkus dengan kertas coklat. 4 buah petridish untuk bakteri S. aureus dan Pseudomonas masing-masing 2 buah. Lalu 2 petridish pertama sebagai blanko yang berisi media NB dan bakteri S. aureus dan Pseudomonas. Larutan blanko merupakan, larutan tidak berisi analit (bahan sampel yang ingin diketahui komposisi kimiawinya). Larutan ini digunakan sebagai larutan pembanding dalam analisis kimiawi. Kemudian menyiapkan kertas saring sebanyak 4 buah yang sudah dipotong menjadi persegi empat kecil. 2 potong kertas saring dicelupkan ke dalam larutan antiseptik (Listerine) dan 2 potong kertas saring lainnya dicelupkan ke dalam larutan desinfektan (superpell) yang kemudian masing-masing kertas saring di letakkan di petridish yang sudah berisi media NB dan bakteri. Kertas saring tersebut diletakkan di tengah-tengah media agar memudahkan pengukuran zona saat pengamatan. Kemudian, setelah semua petridish berisi media dan bakteri dibungkus kembali dengan kertas coklat agar tidak terkontaminasi bakteri pathogen. Dimana, inokulasi merupakan suatu proses menumbuhkan mikroba dari media yang alami ke media yang baru dengan tujuan untuk melihat beberapa variasi jenis mikroba yang ditumbuhkan dalam suatu media (Suryani,2005). Lalu melakukan inkubasi selama 24 jam dan 48 jam dengan suhu 300C pada alat inkubator dengan posisi terbalik supaya uap air tidak mengenai bakteri saat bakteri melakukan

respirasi.

Inkubator

merupakan

alat

laboratorium

yang

dapat

mempertahankan suhu dan kelembaban sesuai dengan keinginan dan kebutuhan. Inkubator digunakan untuk menginkubasi atau memeram mikroba. Inkubasi merupakan suatu kegiatan pengkondisian untuk penumbuhan bibit yang ditanam (Muchroji,2008). Setelah 24 jam, mengamati bakteri di dalam petridish dan mengukurnya. Hasilnya yaitu, pada antiseptik merk “Listerine” jarak terjauh pada bakteri S. Aereus yaitu 1,7 cm dan jarak terjauh pada bakteri Pseudomonas yaitu 0,1 cm. Sedangkan pada desinfektan

15

merk “Superpel”, jarak terjauh pada bakteri S. Aereus yaitu 2,5 cm dan jarak terjauh pada bakteri Pseudomonas yaitu 0,2 cm. Sedangkan setelah 48 jam, didapatkan hasil pada antiseptik merk “Listerine” jarak terjauh pada bakteri S. Aereus yaitu 2 cm dan jarak terjauh pada bakteri Pseudomonas yaitu 0,2 cm. Sedangkan pada desinfektan merk “Superpel”, jarak terjauh pada bakteri S. Aereus yaitu 3 cm dan jarak terjauh pada bakteri Pseudomonas yaitu 0,4 cm. Hasil petridish yang sebagai blanko menghasilkan penuh dengan bakteri jika dibandingkan dengan adanya antiseptik dan desinfektan. Hal tersebut karena tidak ada zat yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri seperti antiseptik dan desinfektan. Perbedaan kedua jarak bakteri disebabkan oleh kedua bakteri mempunyai karakteristik yang berbeda - beda dan adaptasi hidup yang berbeda (Dubnau, 1982). Dari hasil yang diperoleh, dapat diketahui jika zona bebas bakteri dengan bakteri pseudomonas menghasilkan zona bebas yang lebih kecil pada larutan antiseptik maupun desinfektan daripada bakteri S. Aereus, karena perbedaan zona bakteri dapat disebabkan adanya perbedaan alamiah antara kedua golongan bakteri. Staphylococcus aureus adalah bakteri gram positif dimana selnya sebagian besar (90%) terdiri dari lapisan peptidoglikan dan lapisan tipis asam teikoat. Asam teikoat menyebabkan permukaan sel bakteri gram positif bersifat polar dan mempunyai muatan negative. Sifat ini akan mempengaruhi laju penetrasi molekul-molekul ke dalam sel yang akhirnya dapat menyebabkan kebocoran sel. Sedangkan Pseudomonas adalah bakteri gram negatif dimana dinding selnya lebih kompleks dibandingkan dengan bakteri gram positif. Bakteri gram positif

hanya

mempunyai satu lapisan membran yang mengandung peptidoglikan sedangkan bakteri gram negatif mempunyai membran dalam dan membran luar. Lapisan membran luar mengandung fosfolipid, lipopolisakarida, dan lipoprotein. Lapisan ini bersifat impermeabel terhadap molekul besar tetapi dapat melalukan molekul kecil. Lipopolisakarida dan peptidoglikan merupakan saringan bagi berbagai ukuran molekul, sedangkan plasma membran bersifat impermeabel bagi molekul yang ukurannya jauh lebih kecil (James,2008).

16

BAB V PENUTUP

5.1 Kesimpulan Kesimpulan yang didapatkan berdasarkan percobaan yang telah dilakukan adalah sebagai berikut : 1. Adanya penggunaan antiseptik dan desinfektan dapat mempengaruhi pertumbuhan mikroorganisme. 2. Semakin lama waktu inkubasi maka, semakin dekat jarak zona bebas bakterinya. 3. Bakteri yang paling resistan yaitu S. aureus dibandingkan dengan Pseudomonas jika dilihat dari zona bebas bakterinya pada setiap pemberian antiseptik dan desinfektan.

17

DAFTAR PUSTAKA

Ascenzi, Joseph. 1996. Handbook of Disinfectants and Antiseptics. New York. Merce Dekker,Inc. Backert, Steffen. 2008. Type IV Secretion in Gram-Negative and Gram-Positive Bacteria. USA. Springer. Darmadi. 2008. Infeksi Nosokomial. Jakarta. Salemba Medika. Harmita,Apt dan dr.Maksum radji. 2008. Analis Hayati. Jakarta. EGC. Hidayat. 2018. Miroorganisme dan Pemanfaatannya. Malang. UB Press. Fifendy, Mades. 2017. Mikrobiologi Edisi Pertama. Depok. Kencana. James, Joyce. dkk. 2008. Prinsip-prinsip Sains Untuk Keperawatan Jakarta. Erlangga. Suryani, Ani dkk. 2005. Membuat Aneka Nata. Penebar Swadaya. Troy, David B. 1917. Remington The Science and Practice of Pharmacy. USA. Lippincot Williams & Wilkins.

18

LAMPIRAN SKEMA KERJA

Antiseptik dan Desinfektan

Disediakan 6 buah tabung reaksi kosong. Diisi tabung reaksi tersebut dengan media NB agar. Diisikan media agar kedalam tabung reaksi sebanyak 10 ml. Dibungkus petridish dengan keras coklat. Dimasukkan tabung reaksi kedalam autoklaf bersama dengan 6 buah petridish yang kosong tersebut selama 15 menit pada suhu 121⁰C. Didiamkan media sampai ± 45/C. Diambil 1 tabung reaksi, lalu dituangkan kedalam petridish sebagai blanko. Dilakukan proses inokulasi ke dalam 3 buah tabung reaksi pertama. Dituangkan media dan dibiakan hingga padat. Dicelupkan 3 potong kertas saring kecil yang berbentuk lingkaran kedalam larutan antiseptik dan desinfektan. Diletakkan kertas saring kedalam media yang mulai padat. Dibungkus petridish dengan kertas coklat dan dinkubasikan selama 48 jam dalam suhu 30℃ dengan posisi terbalik. HASIL

19

20

LAMPIRAN SKEMA ALAT Tabel 1. Skema Alat Percobaan Antiseptik dan Desinfektan No.

Skema Prosedur

Keterangan

1

Memasukkan tabung reaksi kedalam autoklaf Bersama dengan 6 buah petridish yang kosong tersebut selama 15 menit pada suhu 121⁰C. Lalu mendiamkan hingga alat yang akan digunakan dingin.

2

Menyediakan 6 buah tabung reaksi kosong.

3

Mengisikan media agar kedalam 6 buah tabung reaksi sebanyak 10 ml.

4

Melakukan proses inokulasi bakteri S. Aereus 3 buah tabung reaksi pertama dan bakteri Pseudomonas kedalam 3 tabung reaksi selanjutnya.

5

Mengambil 2 tabung reaksi, lalu menuangkan kedalam petridish sebagai blanko.

6

Menuangkan 4 buah tabung reaksi ke dalam petridish dan membiarkan hingga padat.

21

7

Menyelupkan kertas saring kecil kedalam larutan antiseptik dan desinfektan masingmasing 3 potong.

8

Meletakkan kertas saring kedalam masingmasing media yang mulai padat.

9

Membungkus petridish dengan kertas coklat dan menginkubasi selama 24 dan 48 jam dalam suhu 30⁰C dengan posisi terbalik.

10

Melakukan pengamatan setelah 24 jam dan 48 jam inkubasi.

22

LAMPIRAN TIME SCHEDULE

Tabel 2. Time Schedule Percoban Antiseptik dan Desinfektan No. Keterangan

Estimasi Waktu

Real Time

PJ

1

Melakukan sterilisasi alat

11.30-12.30 (12/03/19)

12.00-12.30 (12/03/19)

Semua Praktikan

2

Briefing awal

12.30-12.35

12.30-12.35

Aslab

3

Mendiamkan hingga alat yang akan digunakan dingin.

12.35-12.40

12.35-12.45

Bilal

4

Menyediakan 6 buah tabung reaksi kosong.

12.40-12.45

12.45-12.50

Bilal

5

Mengisikan media agar kedalam 6 buah tabung reaksi sebanyak 10 ml.

12.55-13.10

12.50-13.10

Celvin dan Yemima

6

Melakukan proses inokulasi bakteri S. Aereus 3 buah tabung reaksi pertama dan bakteri Pseudomonas kedalam 3 tabung reaksi selanjutnya.

13.10-13.25

13.10-13.30

Madina

7

Mengambil 2 tabung reaksi, lalu menuangkan kedalam petridish sebagai blanko.

13.25-13.35

13.30-13.40

Madina

8

Menuangkan 4 buah tabung reaksi ke dalam petridish dan membiarkan hingga padat.

13.35-13.40

13.35-13.40

Yemima

9

Menyelupkan kertas saring kecil kedalam larutan antiseptik dan desinfektan masing-masing 3 potong.

13.40-14.00

13.40-13.50

Bilal

10

Meletakkan kertas saring kedalam masing-masing media yang mulai padat.

14.00-14.05

13.50-14.00

Bilal dan celvin

23

11

Membungkus petridish dengan kertas coklat dan menginkubasi selama 24 dan 48 jam dalam suhu 30⁰C dengan posisi terbalik.

14.05-14.10

14.00-14.10

Yemima

12

Melakukan pengamatan setelah 24 jam dan 48 jam inkubasi.

14.10-14.05 (14/03/1918/02/19)

15.00-15.30 (14/03/1918/02/19)

Semua praktikan

13

Membersihkan alat-alat praktikum

14.05-14.05 (12/03/19)

14.15-14.30 (12/03/19)

Semua praktikan

14

Evaluasi

15.15-15.30 (12/03/19)

15.15-15.30 (12/03/19)

Aslab

24

TUGAS PENDAHULUAN

1. Jelaskan apa yang disebut antiseptic dan desinfektan! Dan beri contoh 2. Dalam hal apa biasanya antiseptic dan desinfektan digunakan? 3. Apa itu mikrobiostatis? Sebutkan contoh zat kimia yang termasuk mikrobiostatis! 4. Jelaskan perbedaannya dengan disenfeksi! Jawaban 1. - Antiseptik adalah zat yang biasa digunakan untuk menghambat pertumbuhan dan membunuh mikroorganisme berbahaya (patogenik) yang terdapat pada permukaan tubuh luar mahluk hidup. Contoh : hydrogen peroksida, garam merkuri, asam borat dan triclosan. - Desinfektan adalah zat kimia yang mematikan sel vegetatif belum tentu mematikan bentuk spora mikroorganisme penyebab suatu penyakit. Contoh : iodine, alcohol, ammonium kuarterner, formaldehida, kalium permanganate dan fenol. 2. - Desinfektan digunakan untuk pengelolaan air bersih, membersihkan alat-alat lab, sebagai pemutih, membersihkan toilet, sebagai detergen, untuk pembersih permukaan yang keras. Yang mana biasanya di gunakan pada benda mati. - Antiseptik digunakan ntuk keperluan mencuci tangan tenaga medis, Membersihkan kulit bagian tubuh yang akan dilakukan pembedahan, membersihkan bagian yang disiapkan untuk disuntik. Maupun membersihkan tangan pada saat mau makan ataupun lainya. 3. Mikrobiostatis adalah suatu keadaan mikroorganisme yang meskipun masih hidup (viable) tetapi tidak mengadakan multiplikasi. Contoh zat kimia yang termasuk mikrobiostatis yaitu zat wrna aniline, sulfonamide dan antibiotic. 4. mikrobiostatis dan disinfektan adalah dua ungkapan yang perbedaannya terletak pada apa yang diartikan dengan mematikan secara cepat (disenfeksi) dan apa yang diartikan dengan memastikan secara lambat (yaitu mikrobiostatis)

25

26

27

28

29

30

31

32

33

34

35

36