Amiba En Fresco.docx

TÉCNICA DE LABORATORIO PARA LA IDENTIFICACIÓN DE E. HISTOLYTICA OBJETIVOS GENERALES El alumno de medicina aprenderá la realización del método de laboratorio para la toma de muestra en el estudio de la amiba en fresco el cual le permitirá identificar la E. Histolytica, agente causal de amebiasis,

MARCO TEÓRICO Amebiasis La amebiasis es una infección humana producida por el protozoario Entamoeba Histolytica y afecta sobre todo al intestino grueso. El diagnóstico de la amebiasis se realiza demostrando la presencia de trofozoítos o quiste. Los quistes resisten condiciones adversas. Son las formas infectantes para el hombre porque resisten la acidez gástrica. Esta acidez los rompe y dan origen a trofozoítos. Llegan a la luz del colon e invaden la pared. Se reproducen por división binaria. Salen con las materias fecales en forma de quiste inmaduros (1 núcleo) o maduros (4 núcleos), pasando previamente por pre-quiste.

TROFOZOITO

PREQUISTE

QUISTE

Ciclo biológico

Patología   

Los trofozoítos invaden mucosa del colon. Se multiplican llegando a la submucosa. Destruyen tejidos en forma horizontal y se sobre infecta con bacterias provocando microabscesos.  Puede haber perforación y vuelco del contenido colónico a la cavidad peritoneal con producción de peritonitis séptica y química. Es la causa más común de muerte.

FUNDAMENTO El método en fresco se basa en la utilización de solución salina fisiológica para conservar condiciones similares a la del cuerpo humano y de esta manera poder observar los trofozoítos. Se debe realizar utilizando montajes en solución salina y en una pequeña cantidad de yodo Lugol. Los montajes en solución salina tienen la ventaja de que retienen la movilidad de los trofozoítos; sin embargo, la identificación definitiva de trofozoítos o quistes en estos preparados es difícil pues las estructuras internas son con frecuencia poco identificadas. El yodo Lugol se emplea para destacar las estructuras internas de los parásitos presentes. El yodo tiñe el núcleo y los organelos intracitoplasmáticos de manera que son más fáciles de visualizar.

MATERIALES Y REACTIVOS       

Portaobjetos Cubreobjetos Aplicadores de madera Microscopio Lugol Solución salina Muestra de heces

DESARROLLO DE LA PRÁCTICA 

En un portaobjetos limpio y desengrasado se colocan separadamente, una gota de solución salina y de Lugol.

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Con el aplicador de madera se toma una pequeña porción de materia fecal y se mezcla con la solución, con el mismo aplicador se retiran las fibras y otros fragmentos gruesos, procurando hacer una suspensión.

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Colocar el cubreobjetos

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Repetir estas operaciones en la gota de Lugol. Observar en el microscopio con los objetivos de 10x y 40x

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Recorrer la laminilla siguiendo un sentido direccional

Nota: es importante que las preparaciones no sean densas, si no transparentes.