Alk Kinase

Η Ανοσοκυτταροχημεία στην πρωτεϊνική έκφραση των αιματολογικών κακοηθειών Γιώργος Ανδρούτσος

ΑΝΟΣΟΚΥΤΤΑΡΟΦΗΜΕΙΑ θσζιολογικά πρωηεϊνικά μόρια όγκο-πρωηεϊνικά μόρια όγκο-καηαζηαληικά μόρια ένζσμα λιπίδια

Σι ανισνεύοςμε;

Ποια είναι η βαζική οςζία πος καθιζηά ενςπόζηαηερ ηιρ ανοζοκςηηαπικέρ μεθόδοςρ;

Το αντίσωμα

Οι ανοζοκςηηαπικέρ μέθοδοι είναι η οπηικοποίηζη μίαρ ανόζος ζςνδέζευρ

Υπερμεταβλητή περιοχή

Fc Fraction

Fab Fraction

Aνηιγονικόρ επίηοπορ

Μέθοδοι ανοζο-κσηηαρικού προζδιοριζμού

Έμμεζες Ανοζοενζσμαηικές μέθοδοι

APAAP PAP Strept-AB Complex AP/ HRP β-Galactosidase Streptavidin EnVision δύο ζηαδίυν TSA (Tyramide Signal Amplification)

ΔΜΜΔ΢Δ΢ ΜΔΘΟΓΟΙ ΣΡΙΩΝ ΢ΣΑΓΙΩΝ APAAP

PAP Perox

AP

AP

Mouse anti-AP

Perox Mouse anti-perox

Rabbit anti-mouse

Rabbit anti-mouse

Mouse Anti-Human

Human Ag

Mouse Anti-Human

Human Ag

Streptavidin-Biotin Complex – AP

Avidin-Biotin Complex – HRP Streptavidin

HRP

AP Rabbit AntiMouse Biotin Mouse Anti-Human

Rabbit AntiMouse Biotin

Biotin

Biotin Mouse Anti-Human

ΔΝΕΤΜO, ΤΠΟ΢ΣΡΩΜΑ ΚΑΙ ΥΡΩΜΟΓΟΝΑ

AP

Napthol AS-MX phosphate

Φυζθ/κά άλαηα +θαινόλερ+Η2Ο

Fast Red TR

Έγτρωμο ίζημα

Ο λόγορ ύπαπξηρ ηηρ ανοζοκςηηαποσημείαρ

Η μεγάλη εςαιζθηζία. H αδςναμία λήτηρ καηάλληληρ ποζόηηηαρ ςλικού. Η αξιόπιζηη ηαςηοποίηζη ζε ζςνδιαζμό με ηην κςηηαποσημεία και ηην κςηηαπομεηπία ποήρ. Οι τεςδείρ θεηικόηηηερ. Δίναι πολύ κονηά ζηα μοπθολογικά δεδομένα ηος οπηικού μικποζκοπίος.

Οξείερ λεςσαιμίερ με γενεηικέρ ανυμαλίερ

Οξεία ππομςελοκςηηαπική λεςσαιμία με t(15;17) DR↓↓, CD34↓↓, CD11a↓↓, CD11b↓↓, CD15-,

CD33↑↑, MPO↑↑↑ – Με μικποκοκκιώδη μοπθολογία ή bcr3 CD34+, CD2+,

PML bodies

Οξείερ λεςσαιμίερ με γενεηικέρ ανυμαλίερ

Οξεία μςελογενήρ λεςσαιμία (μεγακαπςοβλαζηκή) με t(1;22) CD41+, CD61+, CD36+, MPO-, ≈CD13+, CD33+, CD34-, DR-, PLT: CD42-

Οξείερ λεςσαιμίερ με γενεηικέρ ανυμαλίερ Οξεία μςελογενήρ λεςσαιμία με μεηάλαξη ηος NPM1 CD34↓, CD33+, CD13+, MPO+, cytNPM+ ≈CD14+, CD11b+, CD68+

Οξείερ λεςσαιμίερ Οξεία μςελογενήρ λεςσαιμία με ελάσιζηη διαθοποποίηζη – DR+, CD34+, CD38+ ≈CD13+, CD117+, MPO+, CD33+(60%), Tdt+(50%), CD7+(40%) Οι λεμθοκςηηαπικοί δείκηερ (-)

Οξείερ λεςσαιμίερ

Δπςθπολεςσαιμία (erythroid/myeloid) – MPO-, HbA+, Glycophorin-A+

Οξείερ λεςσαιμίερ

Αληθήρ Δπςθπολεςσαιμία – MPO-, HbA+, Glycophorin-A+, Glycophorin-C+, – Carbonic anhydrase-I+, CD36+ ≈ CD117+, DR-, CD34-,

HbF

GlycA

GlycC

Οξείερ λεςσαιμίερ Οξεία μεγακαπςοβλαζηική λεςσαιμία – cytCD41+, cytCD61+, CD36+, MPO≈ von Willebrand’s+, CD13+, CD33+, CD34-, DRPLT: CD42-

Οξείερ λεςσαιμίερ Οξεία βαζεοθιλική λεςσαιμία Βλάστες – CD13+, CD33+, CD123+, CD203c+ – Οι μονοκςηηαπικοί δείκηερ (-) ≈ CD34+, DR+, CD117-,

Παθολογικά μαστοκύτταρα – CD117+, CD25+, mast cell tryptase+

Σ-λεμθοβλαζηική λεςσαιμία

Tdt+, CD7+, cytCD3+ – CD1a+, CD2+, CD3+, CD4+, CD5+, CD7+, CD8+ nucTAL1+(30-50%)

Β-ππολεμθοκςηηαπική λεςσαιμία

IgM↑↑ – CD19+, CD20+, CD22+, CD79a+, CD79b+, FMC7+ CD5+(20-30%), CD23+(10-20%), ZAP70+(57%), CD38+(46%)

Σριτωηή λεσταιμία

sIg+, CD20↑↑, CD22↑↑, CD11c↑↑, CD103+, CD25+, CD123+, annexin A1+, DBA44+, FMC7+, cyclin D1↓ – ≈ TRAP+

CD20

DBA44

TRAP

D1

Β-προλεμθοκσηηαρική λεσταιμία

Υρόνια λεμθοκσηηαρική λεσταιμία

IgH και CCND1 t(11;14)

Σριτωηή λεσταιμία

Πολλαπλούν μσέλωμα

Λέμθωμα ηοσ μανδύα

Cyclin D1

IgH και CCND1 t(11;14)

Λέμθωμα ηοσ μανδύα

Cyclin D2-D3

Αναπλαζηκό λέμθωμα από μεγάλα κύηηαρα ALK+ ΑLK+ λέμθωμα από μεγάλα Β-κύηηαρα

ALK 2p23 NPM, TPM3, TPM4, ATIC, TFG, CLTC, MSN, MYH9, ALO17

Υπυμοζυμική ALK ανυμαλία partner t(2;5)

NPM

t(1;2) inv (2) t(2;3)

TPM3 ATIC TFG

Δνδοκςηηάπια καηανομή ηηρ ALK πςπηνική και διάσςηη κςηηαποπλαζμαηική διάσςηη κςηηαποπλαζμαηική με πεπιθεπιακή ενηόπιζη διάσςηη κςηηαποπλαζμαηική διάσςηη κςηηαποπλαζμαηική

t(2;17)

CLTC

κοκκιώδηρ κςηηαποπλαζμαηική

t(2;X)

MSN

επιθανειακή

t(2;19)

TPM4

διάσςηη κςηηαποπλαζμαηική

t(2;22)

MYH9

διάσςηη κςηηαποπλαζμαηική

CD163 Υπόνια μςελομονοκςηηαπική λεςσαιμία Οξεία μςελομονοκςηηαπική λεςσαιμία Οξεία μονοκςηηαπική λεςσαιμία Μςελικό ζάπκυμα Ιζηιοκςηηαπικό ζάπκυμα ΢πάνια δενδπιηικά νεοπλάζμαηα

Mςελοδςζπλαζηικά ζύνδπομα

CD71

Glyc-A

CD105

H-Ferritin

EBV – LMP1, EBNA-2 EBV+ διάσςηο Β-λέμθυμα από μεγάλα κύηηαπα EBV+ παιδικέρ λεμθοϋπεππλαζίερ Hodgkin λεμθώμαηα

Markers

Hodgkin λέμθωμα λεμθοκσηηαρική ς επικράηηζης

PAX5

TCRBCL

Classical Hodgkin lymphoma

DLBCL

+

+

+

+

-

-

OCT-2

+++

+++

-/+

+

-

-

BOB-1

+

+

-

+

-

-

Perforin/ Granzyme-B

-

-

-

-

+

+

ALK

-

-

-

-

+

-

LMP1

-

-

+/-

-/+

-

-

ALCL ALCL ALK+ ALK-

ΠΟΛΛΑΠΛΟΤΝ ΜΤΔΛΩΜΑ

ΜΑΚΡΟ΢ΦΑΙΡΙΝΑΙΜΙΑ Waldenström

ΚΡΤΟ΢ΦΑΙΡΙΝΑΙΜΙΑ

ΥΡΟΝΙΑ ΛΔΜΦΙΚΗ ΛΔΤΥΑΙΜΙΑ

ΛΔΜΦΩΜΑΣΑ

ΑΓΓΔΙΟΑΝΟ΢ΟΒΛΑ΢ΣΙΚΗ ΛΔΜΦΑΓΔΝΟΠΑΘΔΙΑ

IgG IgM