Afifatul Hasanah (resume).docx

Serum Neurofilament Light Protein Predicts Clinical Outcome In Traumatic Brain Injury

Pendahuluan Cedera otak traumatis (TBI) adalah penyebab paling umum dari kematian dan kecacatan setelah trauma tumpul di antara anak muda di seluruh dunia. Dalam pengaturan klinis, keparahan TBI biasanya diklasifikasikan menggunakan Glasgow Coma Scale (GCS), di mana TBI parah (sTBI) memiliki skor GCS 3-8. Kerusakan struktural setelah sTBI dapat dideteksi dengan teknik resonansi magnetik lanjut (MRI), tetapi tidak cukup untuk memprediksi hasil klinis jangka panjang. Metode ELISA ELISA standar komersial untuk pengukuran NF-L dalam serum pasien dengan sTBI, di mana mereka menemukan bahwa kadar serum NF-L yang tinggi mungkin memiliki utilitas prognostik untuk sTBI 17 . Namun, salah satu keterbatasan utama menggunakan ELISA tradisional untuk kuantifikasi protein dengan kelimpahan rendah seperti neurofilamen dalam cairan perifer tidak mampu mengukur kerusakan aksonal kecil dalam kasus TBI atau membandingkan dengan tingkat yang ditemukan pada subyek sehat. Prosedur Sampel darah dikumpulkan dengan venipuncture ke dalam tabung pemisah gel untuk serum dan disentrifugasi dalam 20-60 menit. Serum dipisahkan, dialihkan dan disimpan pada suhu −80 ° C sambil menunggu analisis biokimia. Tingkat vCSF NF-L diukur menggunakan ELISA komersial (NF-light ELISA, Uman Diagnostics, Umeå, Swedia) seperti yang dijelaskan sebelumnya 46 . Tingkat S100B diukur menggunakan Cobas e601 (Roche Diagnostics, Mannheim, Jerman) dengan uji Elecsys S100 yang tersedia secara komersial (Roche Diagnostics, Mannheim, Jerman, batas deteksi yang lebih rendah <0,005 μg / L, lihat Metode pada bahan pelengkap untuk penjelasan terperinci dari metode. Kadar NF-L dalam serum diukur menggunakan platform Simoa (Quanterix, Lexington, MA, USA), ELISA digital berbasis manik magnetik yang memungkinkan deteksi protein pada konsentrasi subfemtomolar. Batas deteksi (LOD) untuk uji NF-L adalah 0,29 pg / mL dan batas bawah kuantifikasi (LLOQ) adalah 2,7 pg / mL ketika dikompensasi untuk pengenceran sampel

empat kali lipat. LOD dan LLOQ ditentukan oleh rata-rata sinyal kosong +3 SD dan +10 SD. Koefisien variasi duplikat variasi (CV) rata-rata untuk sampel adalah 6,5% (SD 8,6%). Rincian tentang pengembangan uji NF-L dapat ditemukan dalam Metode Suplemen. Semua sampel dianalisis menggunakan batch reagen yang sama oleh teknisi laboratorium bersertifikat yang tidak mengetahui informasi klinis. Hasil

Penjelasan : sTBI, cedera otak traumatis yang parah; GCS, skala koma Glasgow; GOS, skor hasil Glasgow; NF-L, protein ringan Neurofilamen; S100B, S100 mengikat kalsium B. NA menunjukkan tidak berlaku / tersedia. Genotipe APOE ε4 + ditentukan oleh keberadaan setidaknya satu alel APOE ε4 . GOS dinilai pada tindak lanjut 12 bulan. Nilai-P adalah untuk asosiasi dengan masing-masing variabel dan tingkat biomarker (kontinu), diuji dengan korelasi peringkat Spearman (reaktivitas pupil, klasifikasi Marshall CT, dan skala GOS) atau uji MannWhitney U (skor GCS, genotipe dan kontrol APOE).